【摘要】目的 相容性输血。方法 不规则抗体的筛选、鉴定与交叉配血。结果 检出抗-JKb 抗体,抗-Ec 抗体及自身抗体, 与多份ABO、RH 同型的血液交叉配血,挑选凝集强度最弱的应急输血。结论对于直抗阳性标本进一步做抗体鉴定,挑选避开 该抗体的血液进行配血,存在自身抗体干扰交叉配血时挑选凝集强度最弱的应急输血。
【关键词】交叉配血;抗-JKb 抗体;抗-Ec 抗体
现将在上海市血液中心血型参比实验室学习期间所遇到 的疑难配血一例报告如下:
进口谱细胞进一步鉴定抗体特异性实验(卡氏法)
患者 患者
一般资料
患者:陈 XX ,男,61 岁,来自上海市第六人民医院, 临床
编号 C D E c e JKa JKb
1 + + 0 0 + 0 +
血清 放散
液
2+ 3+
诊断:骨髓增生异常综合征;输血史:3 次,末次输血: 2014 年 9
月;要求:特配三洗红细胞。
血清学检查
试剂和仪器:抗-A、抗-B 血清(批号: 20130509)、IgM 抗D( 批号:20130322)、反 定型 ABO 红细胞(批号:20145320))、 IgM 抗 E(批号: 20133201)、IgM 抗 C(批号:20143001 )、IgM 抗 c(批 号:20133102)、IgM 抗 e (批号:20133302)、多特异性 抗人球蛋白试剂(批号:20130904)、单抗 IgG(批号: 20140108)、抗 C3( 批 号:20130807)、国 谱( 批 号:20145706 ) 均来自上海血液生物医药有限公司, 进口谱细胞( 批 号: 8000211388)、IgM 抗 JKa(批号:8000184076)、IgM 抗 JKb(批号: 8000197772)来自 Sanquin 公司, 抗人球蛋白 卡(批号: 50531.89.14)来自DiaMed,所有试剂均在有效期内, 久保田离心机、37 度水浴箱等。
2 + + 0 0 + + + 2+ 3+
3 0 + + + 0 + + 2+ 3+
4 0 + 0 + + + 0 2+ 3+
5 + 0 0 0 + + + 2+s 3+
6 0 0 + + 0 + 0 2+s 3+
7 0 0 0 + + + + 2+s 3+
8 0 0 0 + + + 0 2+ 3+w
9 0 0 0 + + + 0 2+ 3+w
10 0 0 0 + + 0 + 2+ 3+w
11 + + + 0 + + 0 2+ 3+
12 w + + + 0 + + 2+s 3+
13 + + 0 0 + 0 + 2+ 3+
14 + 0 0 + + + + 2+s 3+
15 0 + + + 0 + 0 2+s 3+
16 + 0 0 + + + 0 2+ 3+
实验方法:严格按照上海市血液中心血型参比研究室《血 自身
2+ 3+
型和血液免疫学常规检查操作细则》进行操作。全部实 验均在上海市血液中心血型参比研究室完成。
实验结果:
盐水介质试管法直接抗人球蛋白实验
直抗
3.4 盐水介质试管法 ABO 及Rh 分型、Kidd 系统分型
反
应 正定型
反应条件 多抗 单抗 IgG 单抗 C3 ABS 对照 条
室温 2+s 1+s 2+ 0 件
反定型 Rh 系统定型 Kidd 系统分型
3.2 国谱细胞鉴定抗体特异性实验(卡氏法)
自身
-A -B AcBc Oc -D -C -c ——E -e
-JKa -JKb
c
患者 室
血清 0 4+ 3+ 0 0 0 3+ 3+ 0 0 3+ 2+ 0
编 DCE c e JKa JKb M N S s Mur Fya Fyb IS IAT 3.5盐水介质试管法抗体验证实验 号 | |||||||||
| | | | | | | | | |
1 + 0 | + + 0 + | + + + | + + \ + | 0 0 2+ | | 进进国筛 | 国献进进 | 进进 | 自直 |
2 + + | 0 0 + + | + + + | 0 + + + | 0 0 1+ | | 1# 2# 2# 2# | 3# 13# 6# 15# | 8# 9# | 身抗 |
3 + + 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + 0 0 土2+ 2+ 2+ 1+ ± ± 2+ 2+ 2+ 2+ 2+ w3+ 4 + + + + + 0 + + 0 + + \ + 0 0 2+ | |||||||||
5+0 | + + + 0 | + + + | 0 + 0 + | 0 0 2+ | 注:进 1#、进 2#、国 2#均为 CCDee 表型,JKb 阳性细胞; 筛 | ||||
6+0 | 0 + + 0 | + 0 + | 0 + 0 + | 0 0 1+s | 2#、国 3#、献 13#均为 CCDee 表型,JKb 阴性细胞;进 6#、进 15# |
温
7 0 0 0 0 + + 0 + + 0 + \ +0 0 土
8 + + 0 0 + 0 + + + 0 + \ + 0 0 1+
9 0 0 0 + + + + 0 + 0 + 0 + 0 0 1+s
10 + + + + + + + 0 + 0 + 0 + 0 0 1+s
自
0 2+
从表中可以看出 3 号和 7 号反应比较弱,首先怀疑 JKb
抗体的存在,但不能排除抗-Ec 抗体!
分别为 ccdEE 和 ccDEE 表型,且 JKb 皆为阴性细胞; 进 8#、进9#均为ccdee 表型,JKb 阴性细胞。以上细胞跟患 者血清反应,根据实验结果可证实该患者血清中确实存在抗-c 抗-JKb 抗体,但还不能证实是否还含有抗-E 抗体!自身和 直抗所用的细胞均为温盐水6 洗后的患者细胞,以排除自身
抗体对实验结果的影响!
3.6 患者吸收液和放散液进一步鉴定抗体特异性实验(卡 氏法)
编号 C D E c e JKa JKb 患者吸收患者放散
该患者血型为 B 型,Rh 阳性,CCDee,JK(a+b-),血清中检 出
液 液 不规则抗体,为抗 JKb 抗体和抗 -Ec 抗体!该患者血样与 献 13#
1 + + 0 0 + 0+ 1+ 3+
2 + + 0 0 + + + 1+ 2+s
3 0 + + + 0 + + 2+s 2+s
4 0 + 0 + + + 0 2+ 0
5 + 0 0 0 + + + 2+ 2+s
6 0 0 + + 0 + 0 2+ 0
7 0 0 0 + + + + 2+ 2+s
8 0 0 0 + + + 0 2+s 0
9 0 0 0 + + + 0 2+s 0
10 0 0 0 + + 0 + 2+s 2+
11 + + + 0 + + 0 2+s 0
12 w + + + 0 + + 2+s 2+s
13 + + 0 0 + 0 + 2+w 3+
14 + 0 0 + + + + 2+w ±
15 0 + + + 0 + 0 2+s 0
16 + 0 0 + + + 0 2+ 0
注:用Ec 阴性,JKb 阳性细胞进行吸收,结果提示放散 液中放散下来的抗体为 JKb 抗体,但吸收液中仍旧不能证实 为抗 Ec 抗体! 造成这以原因可能是抗 JKb 抗体和自身抗体还 没有吸收干净!接下来我们再次对患者血清进行两次吸收, 结果如下:
3.7 进口谱细胞鉴定三次吸收后抗体特异性实验(卡氏法)
患者 吸编号 C D E c e JKa JKb 收液
1 + + 0 0 + 0 + ±
2 + + 0 0 + + + ±
3 0 + + + 0 + + 2+s
4 0 + 0 + + + 0 2+
5 + 0 0 0 + + + 0
6 0 0 + + 0 + 0 2+s
7 | 0 | 0 | 0 | + | + | + | + | 2+ |
8 | 0 | 0 | 0 | + | + | + | 0 | 2+ |
9 | 0 | 0 | 0 | + | + | + | 0 | 2+ |
10 | 0 | 0 | 0 | + | + | 0 | + | 2+ |
11 | + | + | + | 0 | + | + | 0 | 2+ |
12 | w | + | + | + | 0 | + | + | 2+ |
13 | + | + | 0 | 0 | + | 0 | + | ± |
14 | + | 0 | 0 | + | + | + | + | 2+s |
15 | 0 | + | + | + | 0 | + | 0 | 2+s |
16 | + | 0 | 0 | + | + | + | 0 | 2+ |
直抗 ±
根据实验结果,结合计量效应,确定为抗-Ec 的联合抗体!由此可证实该患者血清中亦存在抗-E 抗体!
3.8 三次吸收后的患者血清再分别与献 13#和筛 2#细胞 反应结果:
吸收液+ 献 13# 吸收液 + 筛 2#
0 0 由此可说明 3.5 的表中的献 13#和筛 2#细胞呈弱阳性实 为自身抗体的 干 扰 。 3.9.交叉配血实验 选献 13#献血样本(CCDee, JKb 阴性),与
患者进行主侧配血,结果凝聚胺法为阴性,抗人球蛋白法 弱阳性, 两者自身对照均为弱阳性。
结论
献血者血样(CCDee, JKb 阴性)进行主侧配血,在盐 水和聚凝胺介质中均无凝集无溶血现象,在抗人球介质中有 凝集无溶血现象, 上述献血者洗涤红细胞 2 单位可供患者输 注,输注时应放慢速度, 密切观察!
讨论
Kidd 血型系统中的抗-JKa 和抗-JKb 抗体是易于结 合补体的IgG 抗体,多抗体存在,有剂量效应!而 Rh 系统的 抗体除抗D 外,其他抗体也会引起输血反应。其中抗-E 抗 体最常见,其次为抗-c 抗体,这些抗体可为天然发生,但大 多为免疫产生,且抗-E 和抗-c 常常同时出现,为联合抗体, 可造成严重的溶血性输血反应。
本案例中自身抗体和多种抗体同时存在,自身抗体往 往容易掩盖同种抗体,给抗体鉴定带来很大的困难,因此, 我们在做抗体鉴定碰到复杂或不明朗的格局时可以增加一些 附加实验, 如进行抗体验证试验、吸收放散实验、温水洗涤 红细胞以排除自身抗体对同种抗体检测的干扰实验等,并运 用一些分析技巧,如看有无剂量效应,叠加加分等,红细胞 相应抗原的检测也是检测抗体的必要补充!本次实验是名男 性,有过三次输血史,抗体可能是由于曾经输过不配合的血 液产生的,要善于将国谱和进口谱细胞结合起来分析,做免 疫学检查时要认真细致,保证结果的准确性和真实性,配合 临床的治疗,以达到输血安全的目的!
参考文献:
上海市血液中心血型和血液免疫学常规操作细则。
上海市血液中心免疫学讲义。
刘知兰, 王学惠, 赵月凯. 不规则抗体筛查与输血安全 分析[J].中国误诊学杂志,2007, 7(17).
作者简介:杜新凤(1985-1),性别:女,民族:壮族, 籍贯:广西南宁,职称:中级职称,学历:本科,单位:玉 林市中心血站,研究方向:酶免、输血,单位