微小RNA-17通过抑制波形蛋白表达影响上皮-间充质转化对前列腺癌细胞侵袭能力的影响及其机制

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摘要 摘要目的观察前列腺癌(PC)细胞中微小RNA(miR)-17对波形蛋白(Vimentin)表达的影响,及与上皮-间充质转化(EMT)及细胞侵袭间的关系。方法收集河北省中医院泌尿外科2019年1月至2020年12月间20例前列腺癌组织及其癌旁组织标本;采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)的方法检测miR-17的表达水平;将miR-17模拟物转染到前列腺癌(LNCaP)细胞中,应用蛋白质印迹法(Western blot)实验检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)及E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)蛋白的表达水平,采用双荧光素酶报告基因实验及荧光定量PCR观察miR-17与Vimentin基因间的关系;随后,将miR-17模拟物与Vimentin过表达质粒共转染至前列腺癌细胞中,应用Transwell细胞侵袭实验观察miR-17与Vimentin表达变化对前列腺癌细胞侵袭能力的影响。组间比较采用t检验。结果荧光定量PCR结果表明,miR-17在前列腺癌组织中的表达水平(0.45±0.07)低于癌旁组织(1.02±0.08)中的表达水平(t=9.182,P<0.05),差异有统计学意义;细胞侵袭实验结果表明,miR-17模拟物转染组侵袭细胞数(106.00±11.78)低于对照组(266.33±13.05,t=15.790,P<0.05),差异有统计学意义;Western blot实验结果表明,miR-17模拟物转染组E-cadherin蛋白表达(0.86±0.08)高于对照组(0.43±0.12,t=5.203,P<0.05),差异有统计学意义,N-cadherin蛋白表达量(0.33±0.08)低于对照组(0.88±0.08,t=7.804,P<0.05),差异有统计学意义,ZEB2蛋白表达量(0.37±0.04)低于对照组(0.84±0.07,t=9.436,P<0.05),差异有统计学意义;双荧光素酶报告基因实验结果表明,miR-17模拟物转染组荧光素酶活性(0.39±0.04)低于对照组(1.06±0.06,t=15.023,P<0.05),差异有统计学意义;荧光定量PCR实验结果表明miR-17模拟物组Vimentin基因的表达水平(0.49±0.10)低于对照组(1.02±0.04,t=7.940,P<0.05),差异有统计学意义;miR-17模拟物与Vimentin过表达质粒共转染组侵袭细胞数(243.00±14.17)与对照组(247.66±13.65)比较,差异无统计学意义(t=0.410,P>0.05)。结论miR-17可通过靶向Vimentin抑制前列腺癌细胞上皮-间充质转化进而抑制其侵袭能力。
出处 《中华实验外科杂志》 2021年06期
出版日期 2021年06月25日(中国期刊网平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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