LncRNA DLEU1靶向miR-624-3p介导甲状腺癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的机制研究

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摘要 摘要目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)淋巴细胞白血病缺失基因1(deleted in lymphocytic leukemia1,DLEU1)对甲状腺癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡等过程的影响,以及其作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1与甲状腺癌细胞SW579、TPC-1、C64中DLEU1、微小RNA-624-3p(miR-624-3p)的表达水平。分别将si-con(si-con组)、si-DLEU1(si-DLEU1组)、miR-con(miR-con组)、miR-624-3p mimics(miR-624-3p组)、si-DLEU1与anti-miR-con(si-DLEU1+anti-miR-con组)、si-DLEU1与anti -miR-624-3p(si-DLEU1+anti -miR-624-3p组)转染至TPC-1细胞,将未经转染的细胞作为NC组;检测各组细胞活力、细胞凋亡率以及细胞迁移及侵袭能力;双荧光素酶验证DLEU1与miR-624-3p的靶向关系;Western blot检测Ki-67、基质金属蛋白酶2((matrix metalloproteinase-2,MMP2)、Cleaved caspase-3、Wnt、β-catenin表达量。结果与Nthy-ori 3-1组DLEU1相比,甲状腺癌细胞SW579、C643、TPC-1中DLEU1表达水平明显升高,miR-624-3p表达水平明显降低,差异具有统计学意义(F值分别为207.87和68.45,P值均<0.05);与NC组、si-con组相比,si-DLEU1组细胞活力显著下降,迁移细胞数与侵袭细胞数显著下降,Ki-67、MMP-2、Wnt、β-catenin蛋白相对表达量显著降低,细胞凋亡率显著升高,Cleaved caspase-3蛋白相对表达量显著升高,差异具有统计学意义(F值分别为52.93、354.43、193.75、101.74、86.80、141.66、122.14、307.83、78.49,P值均<0.05);与NC组、miR-con组相比,miR-624-3p组细胞活力显著下降,迁移细胞数与侵袭细胞数显著下降,Ki-67、MMP-2、Wnt、β-catenin蛋白相对表达量显著降低,细胞凋亡率显著升高,Cleaved caspase-3蛋白相对表达量显著升高,差异具有统计学意义(F值分别为49.63、296.45、220.53、220.82、215.75、65.23、251.20、302.58、348.28,P值均<0.05);miR-624-3p过表达能显著降低DLEU1野生型质粒的荧光素酶活性(t=9.55,P<0.05);与si-DLEU1+anti-miR-con组相比,si-DLEU1+anti-miR-624-3p组细胞活力显著升高,迁移细胞数与侵袭细胞数显著增多,Ki-67、MMP-2、Wnt、β-catenin蛋白相对表达量显著升高,细胞凋亡率显著降低,Cleaved caspase-3蛋白相对表达量显著降低,差异具有统计学意义(t值分别为9.93,15.29、20.18、6.79、4.23、8.02、9.57、11.34、8.67,P值均<0.05)。结论LncRNA DLEU1靶向miR-624-3p促进甲状腺癌细胞增殖、迁移及侵袭,抑制细胞凋亡,其作用机制可能与信号通路Wnt/β-catenin的活化有关。
出处 《国际免疫学杂志》 2022年03期
出版日期 2022年12月13日(中国期刊网平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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