简介：基金项目国家自然科学青年基金（项目编号81102482）摘要目的构建人钙联蛋白S100A8的原核表达载体并进行蛋白表达及纯化，以便进一步研究。方法从人单核巨噬细胞THP-1中提取总RNA，逆转录后进行PCR，得到目的基因，与TA克隆载体pMD-T进行连接，得到pMD-S100A8质粒，经BamHⅠ和XhoI双酶切产物或者PCR产物双酶切后，与大肠杆菌pGEX-6P-1表达载体进行连接，得到pGEX-S100A8重组质粒。重组质粒转入E.coliBL21(DE3)表达菌进行蛋白表达。融合GST蛋白用GST柱纯化，冷冻干燥，进行下一步研究。结果成功构建了TA克隆质粒pMD-S100A8及阳性pGEX-S100A8重组质粒，成功诱导蛋白的原核表达。结论纯化得到的蛋白为进一步研究S100A8钙联蛋白的结构和功能提供了参考。
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