简介：摘要目的探讨长链非编码RNA（long non-coding RNA，LncRNA）AC000061.1调节CFTR基因表达在非梗阻性无精子症（nonobstructive azoospermia，NOA）发病机制中的作用。方法基因芯片检测梗阻性无精子症（obstructive azoospermia，OA）组（50例）、NOA组（50例）及对照组（50例）患者的睾丸组织中差异表达的LncRNA 并对其对应的靶向mRNA进行生物信息学分析，用qRT-PCR和Western blotting法检测三组患者的睾丸组织凋亡基因Bcl-2表达差异。qRT-PCR验证三组患者睾丸组织、血清、精浆中LncRNA AC000061.1和CFTR mRNA表达水平。酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测血清和精浆中CFTR蛋白浓度。构建LncRNA AC000061.1过表达（H-LncRNA组）、沉默（Si-LncRNA组）及空载对照组载体转染至睾丸癌细胞系（NTERA-2），qRT-PCR验证LncRNA AC000061.1及CFTR mRNA的表达，Western blotting检测CFTR蛋白水平，CCK-8检测细胞增殖能力，流式细胞术及TUNEL凋亡试剂盒检测细胞凋亡率。结果芯片检测和qRT-PCR显示，与对照组相比，NOA组睾丸组织LncRNA AC000061.1和CFTR表达降低（P=0.033，P=0.042），OA组LncRNA AC000061.1表达无差异，CFTR低表达（P=0.039）；OA组和NOA组凋亡基因Bcl-2表达水平依次增高（P=0.031，P=0.008）。三组血清中LncRNA AC000061.1 mRNA和CFTR mRNA及蛋白表达水平差异均无统计学意义（P均>0.05）。在精浆中，与对照组相比，NOA组和OA组LncRNA AC000061.1和CFTR mRNA及蛋白含量依次降低（P=0.002，P=0.038和P=0.006，P=0.026），且LncRNA AC000061.1与CFTR mRNA呈正相关（r=0.169， P=0.039）。质粒转染NTERA-2细胞后，沉默Si-LncRNA组LncRNA AC000061.1 mRNA及CFTR mRNA和蛋白表达均降低（P=0.005，P=0.003），过表达H-LncRNA组LncRNA AC000061.1 mRNA及CFTR mRNA和蛋白表达均显著增高（P=0.002，P=0.009）。沉默Si-LncRNA组细胞增殖能力显著下降（P=0.003），细胞凋亡率明显增高（P=0.001）；过表达H-LncRNA组细胞增殖能力增加（P=0.017），细胞凋亡率降低（P=0.017）。结论NOA睾丸组织中LncRNA AC00006.1通过调控CFTR基因表达引发细胞增殖与凋亡的异常，可能参与NOA的发病机制。