简介:摘要目的探讨微小RNA-940(miR-940)对迁移和侵袭增强因子1(MIEN1)的作用,对人骨肉瘤细胞MG63的迁移和侵袭等能力的影响。方法根据对MG63(武汉大学中南医院医学科学研究中心)的转染处理,将其分为miR-940模拟物(mimics)组、控制(control)对照组、miR-940抑制剂(inhibitor)组和空白(Blank)对照组。分析武汉大学中南医院骨科通过手术切除的12例骨肉瘤病理组织,采用世界卫生组织(WHO)病理分级标准进行良恶性分级,Ⅰ级5例,Ⅱ级3例,Ⅲ级4例。采用免疫组织化学分析MIEN1与肿瘤恶性程度的相关性。体外培养人骨肉瘤细胞MG63及正常成骨细胞hFOB1.19,实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-940及MIEN1表达水平,蛋白质印迹法(Western blot)检验MIEN1蛋白表达。对MG63细胞分组转染miR-940模拟物(mimics)、控制(control)对照、抑制剂(inhibitor)和空白对照,48 h后采用实时荧光定量PCR检验miR-940,Western blot检验MIEN1蛋白表达。划痕实验评估转染后细胞的迁移能力。Transwell侵袭实验评价转染后细胞的侵袭能力。采用两样本t检验,多样本方差分析,Pearson相关性分析。结果MIEN1在不同恶性程度的骨肉瘤中的表达水平,与恶性程度呈正相关(r=0.832,P<0.05)。骨肉瘤细胞MG63比正常成骨细胞的miR-940表达水平更低(4.37±0.61比12.41±1.05),差异有统计学意义(t=11.464,P<0.01),而MIEN1表达水平更高(21.01±1.01比5.49±0.38),差异有统计学意义(t=-24.954,P<0.01),Western blot结果显示miR-940与MIEN1的表达水平呈负相关(r=-0.914,P<0.01)。转染后,模拟物组miR-940水平高于控制对照及空白对照组,而抑制剂组则低于对照组(51.16±4.27比4.19±0.47比4.36±0.29比1.18±0.15),差异有统计学意义(F=372.327,P<0.01),Western blot结果表明MIEN1的蛋白表达水平为模拟物组比对照组表达降低77.89%(t=3.174,P<0.05),而抑制剂组比对照组表达增高141.78%(t=-4.318,P<0.05)。划痕实验证实迁移能力miR-940模拟物组低于控制对照和空白对照组,而抑制剂组则高于对照组(27.48±0.28比51.05±2.65比50.86±0.88比74.58±1.00),差异有统计学意义(F=1252.615,P<0.01)。在MG63细胞侵袭能力方面,miR-940模拟物组能力相较于控制对照和空白对照组降低,而抑制剂组高于对照组(58.20±5.26比79.40±6.19比79.80±5.36比101.40±6.07),差异有统计学意义(F=47.313,P<0.05)。结论MIEN1与骨肉瘤的恶性程度呈现正相关,miR-940在转录后,调控MIEN1表达水平,抑制骨肉瘤细胞MG63的迁移和侵袭。
简介:摘要目的将α-半水硫酸钙(α-CSH)、磷酸八钙(OCP)与RGD多肽(RGD)复合,探究该复合材料的生物相容性。方法制备材料浸提液备用并作为实验组,α-CSH组、α-CSH/OCP组、α-CSH/OCP/RGD组。CCK-8实验将材料浸提液与前期实验保存的第3代新西兰大白兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)共培养,以完全培养液、0.64%苯酚溶液作为阴性及阳性对照,使用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖状态,评估材料的细胞毒性。急性毒性实验:将材料浸提液注入购自武汉万千佳兴生物科技有限公司的MK小鼠(6个月龄,18~22 g)腹腔内,以生理盐水作为阴性对照,通过观察小鼠的生物学行为及死亡情况评估材料的急性毒性作用。皮内刺激实验将材料浸提液注入新西兰大白兔(3个月龄,2.0~2.5 kg)背部脊柱两侧皮肤,以生理盐水为阴性对照,通过观察注射部位皮肤出现红斑、水肿的情况评估材料的皮内刺激反应。以P<0.05为差异有统计学意义。结果CCK-8实验中α-CSH组1、3、5、7 d时BMSCs的相对增殖率(RGR)分别为85.87%、91.49%、91.30%、91.20%;α-CSH/OCP组分别为86.99%、92.53%、94.11%、89.98%;α-CSH/OCP/RGD组分别为91.45%、97.40%、97.66%、95.10%,3种材料浸提液共培养的BMSCs的RGR均>80%,按照细胞毒性分级其为0~1级,说明材料无细胞毒性。急性毒性实验中各组实验小鼠术后一般情况、行为活动、神经反应方面均未见异常,说明材料无急性毒性作用。皮内刺激实验中α-CSH组、α-CSH/OCP组、α-CSH/OCP/RGD组材料的原发刺激指数(PII)分别为0.125、0.250、0,均在0.0~0.4范围内,其反应类型为极轻微型。结论α-CSH/OCP/RGD多肽复合材料具有良好的生物相容性。
简介:摘要目的探讨基于团队学习(team-based learning,TBL)教学方法在显微外科住院医师规范化培训中的应用效果。方法将2019年至2020年在武汉大学第二临床学院进行住院医师规范化培训的64名学员以随机数字表法平均分为试验组和对照组,分别采用TBL教学方法和传统教学方法进行显微外科规范化培训,并分别于培训后针对各组学员进行小血管吻合操作评分,同时进行匿名问卷调查并评分。结果小血管吻合操作评分方面,试验组和对照组学员的操作熟练度[(2.28 ±0.58)分比(1.47±0.51)分]、吻合质量[(2.28 ±0.52)分比(1.53±0.51)分]等评分和总分[(11.25 ±1.83)分比(7.63±1.64)分]的差异均具有统计学意义(均P<0.05)。问卷调查结果显示,试验组和对照组学员对小血管吻合培训感兴趣[(4.16±0.72)分比(3.09±0.89)分]、对教学课程安排满意度[(4.10±0.69)分比(2.93±0.80)分]等评分和总分[(19.38 ±1.58)分比(14.53±1.39)分]的差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论应用TBL教学对学员进行显微外科规范化培训,有助于学员充分发挥其主观能动性,增强其学习兴趣,提高其操作技能。
简介:摘要目的探讨达芬奇机器人系统辅助保留幽门及迷走神经的胃部分切除术(PPG)治疗胃癌的安全性与可行性。方法采用描述性病例系列研究方法,回顾性分析2020年12月至2021年2月期间,大连医科大学附属第一医院实施的3例达芬奇机器人手术系统辅助的PPG胃癌患者的病例资料。戳卡设置采用"一"字布局,共轴方向为脐与脾门连线。幽门下动、静脉需要保留。以胃网膜右血管与幽门下血管分叉处为中心,从上、下、右、左四个方向及腹侧和背侧两个面进行游离和显露,完成幽门下区淋巴结的清扫。胰腺上缘的处理采用右侧膈肌脚入路法、左侧后腹膜腔入路法以及食管入路法相结合的策略来确定迷走神经后干及其属支分布,并判断与胃左血管的解剖关系。保留迷走神经腹腔支和胃左血管贲门支离断胃左血管。淋巴结清扫的操作层面在血管周围神经纤维外侧。结果3例患者均顺利完成机器人手术,无转腹腔镜或开腹手术。手术时间(340.0±26.4)(300~390)min,术中出血量(13.3±3.3)(10~20)ml,清扫淋巴结(26.7±3.9)(19~32)枚,保留幽门管长度(3.3±0.3)(3~4)cm,远端切缘(2.3±0.3)(2~3)cm,近端切缘(3.0±0.6)(2~4)cm。3例患者均无术后并发症发生。患者首次排气为术后2~3 d,术后住院天数均为术后6~7 d。本组3例患者手术费用为(4.0±0.7)(3.3~5.3)万元。结论达芬奇机器人系统辅助PPG安全可行。