简介:摘要:本文主要目的是建立一种猪潜能扩展干细胞(pEPSC)的培育方法。方法:收集D3.5天的猪体内受精胚胎,将获取的猪8-细胞胚胎在定植在STO饲养层上,用含 20%血清替代物, 1×MEM NEAA, 0.1 mM β-巯基乙醇, 103 U human LIF,1.0 μM PD0325901, 3.0 μM CHIR99021, 4.0 μM JNK Inhibitor VIII, 10.0 μM SB203580,5.0 μM XAV939以及100 U/ mL青 链霉素及 2. 5 μg / mL 两性霉素 B 的DMEM/F-12培养基培养,倒置相差显微镜下观察细胞形态及增殖状,免疫荧光技术检测标志物OCT4、SOX2、NANOG的表达水平。结果:成功获得可长期传代pEPSC细胞系,克隆呈现大而扁平圆形,边缘光滑,细胞群落密集,pEPSC中OCT4、SOX2、NANOG均高表达。
简介:摘要:目的:探讨人脐带间充质干细胞来源外泌体进行提取鉴定和蛋白组学。方法:培养人脐带间充质干细胞并采用超滤序贯超离法提取外泌体,通过透射电镜、纳米颗粒跟踪分析、蛋白质定量、蛋白质印迹法及蛋白组学分析等技术鉴定。结果①所抽取的外泌体分散度比较好,而且均匀。②,外泌体粒径分布的高峰为(129.5+8.7) nm,它的膜表面是带有负电荷的,其浓度为8.375>109颗粒/ml,平均 zeta电位为(-28.1+3.6) mV。③ 外泌体中存在着一类特殊的膜蛋白,即CD9,CD63等。④蛋白质组学研究发现外泌体中的大部分蛋白都具有较高的活性,它们涉及到 RNA剪接、 mRNA加工、蛋白质折叠等生物学过程,涉及到 RNA/DNA等基因材料的合成、加工、降解等过程。结论:经研究发现,人脐带间充质干细胞外泌体与其母系细胞存在某种“同质”、“差别”,且这些“差别”的蛋白质功能与其自身的免疫学特性都不相关,从而证实人脐带间充质干细胞外泌体具有较小的免疫学活性及较高的安全性。
简介:摘要:采煤工作是煤矿井下生产最基本和最重要的环节。采煤方法的选择是否合理,直接影响整个矿井的安全和各项技术经济指标,选择采煤方法应当结合具体的矿山地质和技术条件,所选择的采煤方法必须符合安全、经济、煤炭回收率高的基本原则。
简介:摘要: 公司已经向实质性“2.0”新时代进发,势必会引入许多自动化设备。自动化设备就是由各种工装和机构有机结合,用动力驱动,用传感器感知的一套机器,其中工装主要是起承载、装配、检验等关键作用。这就对工装材料的选择有着很高的要求,本文就工装材料的选择作了简单介绍,并以某端子合件组装设备进行引例说明。