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  • 简介:以植物乳杆菌P-8(Lactobacillusplantarumsubsp.plantarumP-8)亚油酸异构酶为研究对象,通过http://swissmodel.expasy.org/,http://smart.embl-heidelberg.de/和vecterNTI等在线工具与软件,对亚油酸异构酶进行生物信息学分析并预测与酶活性相关的位点,预测亚油酸异构酶的3个氨基酸可能为第68位甘氨酸、第107位精氨酸和第172位组氨酸。设计1对含突变的引物,以重组质粒pQE30-LAI为模板,利用PCR介导的定点突变技术构建突变体。经序列比对表明,成功构建了突变体G68A(甘氨酸突变为丙氨酸)、R107L(精氨酸突变为亮氨酸)和H172P(组氨酸突变为脯氨酸),为进一步研究LAI的结构和功能奠定了基础。

  • 标签: 共轭亚油酸 亚油酸异构酶 必需氨基酸 定点突变
  • 简介:人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)是一种高效特异的溶血栓药物,但天然的t-PA存在半衰期短,有潜在的引起颅内出血的危险等缺点,因而限制了它的广泛应用。世界各国的科研人员利用了分子设计和基因工程等技术,构建了一系列的t-PA突变体,旨在提高对纤维蛋白的亲和力,延长半衰期,提高纤溶效率,减少颅内出血的危险。综述了t-PA的结构和功能、对t-PA结构的改造,以及一系列t-PA突变体的研究现状及进展情况。

  • 标签: 溶栓剂 基因工程 t-PA突变体 表达