简介:摘要目的观察钛颗粒刺激人血单个核细胞(peripheralbloodmonocytes,PBMC)表达HMGB1、MIF的情况,为临床防治膝关节置换术后无菌松动提供新的思路和方法。方法培养人血单个核细胞,用培养液、钛颗粒及LPS刺激,通过ELISA方法检测HMGB1、NF-?B和MIF表达。结果将分离得到的人血单个核细胞培养后分为3组,分别为空白对照组(PBMC+培养液)、钛颗粒组(0.1%钛颗粒+PBMC+培养液)、阳性对照组(LPS+PBMC+培养液),观察24h后,采用ELISA方法测定HMGB1、NF-?B和MIF表达情况。采用SPSS13.0进行统计学分析,检验水准为?=0.05。结果HMGB1在钛颗粒刺激下表达6.73±0.19ng/ml,空白组表达为1.86±0.24ng/ml,两组对比差异有统计学意义(p=0.000<0.01),阳性组表达为7.51±0.32ng/ml,与钛颗粒组比较差异无统计学意义(p>0.05);MIF在钛颗粒刺激下表达7.74±0.19ng/ml,空白组表达为3.93±0.11ng/ml,两组对比差异有统计学意义(p=0.000<0.01),阳性组表达为9.16±0.55ng/ml,与钛颗粒组比较差异无统计学意义(p>0.05);NF-?B在钛颗粒刺激下表达18.76±1.15,空白组表达为9.57±1.38ng/ml,两组对比差异有统计学意义(p=0.02<0.05),阳性组表达为20.31±1.02ng/ml,与钛颗粒组比较差异无统计学意义(p>0.05);结论钛颗粒刺激人血单个核细胞激活NF-?B通路,且HMGB1、MIF作为免疫炎性因子合成释放增多,参与膝关节置换术后关节无菌松动的发生发展。
简介:目的:探讨高迁移率蛋白B1(highmobilitygroupboxprotein1,HMGB1)与核因子-κB(nuclearfactor-kappaB,NF-κB)在急性白血病患者中的表达及意义。方法:收集急性白血病初治组、复发组和缓解组患者各20例的骨髓及外周血标本,对照组标本取自同期住院非恶性血液病患者。采用酶联接免疫吸附测定法(enzyme-linkedimmunosorbnentassay,ELISA)检测外周血血浆中HMGB1表达水平;反转录-聚合酶链锁反应法(reversetranscriptionpolymerasechainreaction,RT-PCR)检测骨髓单个核细胞中HMGB1、NF-κBmRNA表达水平;蛋白质印迹法(Westernblot)检测骨髓单个核细胞中HMGB1、NF-κB蛋白表达水平;免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)法检测骨髓涂片中HMGB1、NF-κB的表达水平。结果:HMGB1在初治组和复发组中表达明显升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),在缓解组与对照组比较中无明显差异(P>0.05);在初治组与复发组骨髓单个核细胞中HMGB1、NF-κB表达水平较对照组明显升高(P<0.05),而在缓解组未见明显变化(P>0.05);免疫组织化学结果显示,HMGB1、NF-κB表达阳性主要集中在初治组与复发组骨髓涂片。结论:HMGB1在急性白血病中过表达,它可能是通过激活NF-κB信号通路参与急性白血病的发生、发展等过程;HMGB1可能是急性白血病疗效、预后判定及预测复发的一个指标。
简介:摘要目的观察外周血人单个核细胞中MIF、HMGB1、NF-?B的表达,初步探讨关节松动的机制,为临床防治提供新的思路。方法按Ficoll密度梯度分离方法分离静脉血中PBMC,分别用生理盐水(空白对照组)、内固定患者血清(内固定对照组)及关节松动患者血清刺激培养后PBMC,用ELISA和RT-PCR方法检测PBMC中MIF、HMGB1mRNA、NF-?B的表达。应用SPSS13.0软件进行统计学处理数据,P<0.05为差异有统计学意义。MIF的量存在组间明显差异(F=135.633,P=0.000,P<0.05);NF-?B的量同样也存在组间明显差异(F=436.75,P=0.000,P<0.05);HMGB1mRNA在不同组别的表达有明显差异(F=11.935,P=0.006,P<0.05)。MIF与NF-?B表达(r=0.613,P<0.05)具有正相关,NF-?B与HMGB1mRNA表达正相关(r=0.437,P<0.05)。结果MIF、HMGB1、NF-?B在三组表达均存在显著差异,且MIF与NF-?B的表达、HMGB1与NF-?B的表达呈正相关。结论HMGB1通过信号转导通路激活NF-?B的活性,NF-?B可促进单核巨噬细胞合成和分泌MIF,MIF、HMGB1、NF-?B形成细胞炎性因子网络,可能参与关节松动的发生和发展。
简介:目的:探讨肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)通过激活核转录因子-κB(nuclearfactor-κB,NF-κB)信号通路调控其对人牙周膜干细胞(periodontalligamentstemcells,PDLSCs)成骨分化的影响。方法:通过组织块法体外分离培养健康牙周膜来源的PDLSCs;在hPDLSCs的正常培养液、成骨诱导培养液中分别加入10ng/mL的TNF-α,通过碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)和茜素红染色定量检测其成骨分化功能的改变,采用实时定量RT-PCR和Westernbolt检测成骨相关基因的表达和NF-κB信号通路相关因子表达差异。将NF-κB信号通路抑制剂BAY11-7082加入含有TNF-α的hPDLSCs成骨诱导培养液中,检测hPDLSCs生物学特性改变。结果:在一定浓度TNF-α刺激下,hPDLSCs的成骨分化能力减弱;同时,TNF-α能激活NF-κB信号通路,从而抑制hPDLSCs的成骨分化作用,而BAY11-7082能逆转其抑制成骨作用。结论:炎症因子TNF-α能通过调控NF-κB信号通路调节hPDLSCs的成骨分化作用。
简介:摘要目的研究酒精、内毒素、酒精和内毒素共刺激引起RAW264.7(小鼠单核巨噬细胞)细胞活化的信号传导通路.方法不同浓度的酒精、内毒素、酒精联合内毒素刺激RAW264.7细胞24h、48h前后,应用间接免疫荧光法观察NF-κB、IκBα位置.结果经酒精、内毒素、酒精联合内毒素刺激后Caspase3活性较空白组升高(P<0.05);凋亡率随酒精、内毒素浓度的升高而升高(P<0.05).结论RAW264.7细胞经酒精、内毒素、酒精联合内毒素刺激后NF-κB入核,TNF-α分泌升高,细胞凋亡增加.cSN50抑制RAW264.7细胞被刺激后的NF-κB核转位、TNF-α分泌和细胞凋亡.关键词cSN50;RAW264.7;核因子-κB;细胞凋亡cSN50blocksNF-κBtranslocation,inhibitionofendotoxin,alcohol-inducedRAW264.7cellapoptosisAbstractThepurposeofAlcohol,endotoxins,alcoholandco-stimulationofendotoxinRAW264.7(mousemacrophagemonocyte)cellactivationsignaltransductionpathGways.Alcoholconcentrationofdifferentmethods,endotoxins,alcoholcombinedwithendotoxinstimulateRAW264.7cells24h,around48h,indirectimmunofluorescenceobGservedNF-κB,IκBαposition.ResultsAfteralcohol,endotoxin,alcoholcombinedwithinternalLPSCaspase3increasedactivitythanthecontrolgroup(P<0.05);theapoptosisrateincreasedwithalcohol,increasestheconcentrationofendotoxinincreased(P<0.05).ConclusionRAW264.7cellstreatedwithalcohol,endotoxin,alcoholcomGbinedwithinternalafterLPSNF-κBintothenucleus,TNF-αsecretionincreased,increasedapoptosis.cSN50inhibitionRAW264.7cellswerestimulatednucleartranslocaGtionofKNeyFw-oκrBds,TNF-αsecretionandapoptosis.cSN50;RAW264.7;Nuclearfactor-kappaB;Cellapoptosis中图分类号R39文献标识码B文章编号1008-6315(2015)12-0545-02
简介:摘要目的探讨核转录因子NF-κB/P53在不同部位子宫内膜异位病灶中的表达及意义。方法收集子宫内膜异位症组织标本48例,在位内膜22例、正常子宫内膜20例作为对照,采用免疫组化法检测NF-κB/P53的表达情况及与临床分期的关系。结果各组内膜均存在NF-κB/P53的阳性表达,在盆腔外子宫内膜异位症异位病灶、卵巢子宫内膜异位症的异位内膜、在位内膜、正常子宫内膜中表达依次减少,差异有统计学意义(P<0.05),增生期与分泌期的子宫内膜相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论NF-κB/P53参与了子宫内膜异位症的发生发展过程。
简介:目的探讨妊娠期糖尿病(gestationaldiabetesmellitus,GDM)与孕妇血清、脐血和胎盘组织中核转录因子NF-κBp65的相关性。方法收集2011年11月至2013年3月天津市中心妇产科医院157名足月妊娠孕妇及正常未孕女性的临床资料,其中GDM孕妇38例(Ⅰ组)、正常孕妇56名(Ⅱ组)、正常未孕女性63名(Ⅲ组)。采用酶联免疫吸附测定3组研究对象血清、脐血中NF-κBp65的表达,采用免疫组化法检测孕妇胎盘组织中NF-κBp65的表达,并进行比较分析。结果Ⅰ组母体血清和脐血中NF-κBp65水平均高于Ⅱ组(均P〈0.05);Ⅱ组、Ⅲ组母体血清中NF-κBp65水平比较差异无统计学意义(P〉0.05);Ⅰ组胎盘组织中的NF-κBp65表达阳性率100.0%(38/38)高于Ⅱ组的12.5%(7/56)(P〈0.05)。结论NFKBp65可能在GDM的病理生理过程中发挥了一定作用。
简介:目的探讨七氟醚预处理对大鼠肝缺血再灌注后肺细胞凋亡的影响。方法24只Wister大鼠随机分为3组(n=8):假手术组,缺血再灌注组,七氟醚组,阻断肝门30min后建立大鼠70%肝缺血再灌注模型。假手术组(S组)仅游离肝门,但不阻断;肝缺血再灌注组(IR组)采用阻断肝门30min,再灌注1h的方法制备大鼠肝缺血再灌注损伤模型;七氟醚预处理组(SP组)吸入2.1%七氟醚30min,停止吸入10min后制备肝缺血再灌注模型。于再灌注1h时处死动物,留取肺组织,测定湿/干重比(W/D比),采用比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,采用原位末端转移酶法(TUNEL)检测细胞凋亡,计算细胞凋亡指数(AI),采用Westernblot法测定核蛋白NF-κBp65表达,光镜下观察肺组织病理学结果。结果与S组比较,IR组和SP组再灌注各时点肺组织W/D比值、细胞凋亡指数(AI)和NF-κB活性水平及MDA含量均显著增高(均P〈0.05);SOD活性显著降低(P〈0.05);与IR组比较,SP组W/D比值、细胞凋亡指数(AI)、NF-κB表达水平与MDA含量显著降低(均P〈0.05);而SOD活性显著增加(P〈0.05);SP组肺组织损伤较IR组减轻。结论细胞凋亡可能在肝缺血再灌注肺损伤发生过程中具有重要意义;七氟醚对大鼠肝缺血再灌注后肺细胞凋亡具有抑制作用,其作用机制可能通过降低肺组织NF-κB的活性,从而清除自由基、抑制脂质过氧化有关。
简介:目的:对1例血清学血型鉴定困难的患者进行ABO基因分型,分析引起血型鉴定困难的原因及其突变基因。方法:采用微柱凝胶法及全自动血型鉴定系统,对该例患者进行血清学血型鉴定及抗人球蛋白试验和抗体筛查,采用聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)扩增结合Sanger测序及PCR产物克隆的方法,分析该患者及其父母ABO基因的增强子、启动子、第1~7外显子区及其侧翼序列,寻找变异位点。结果:该例患者的血清学正定型为ABweak,ABO基因外显子分型结果为A102/B101,其B等位基因增强子CBF/NF-Y微卫星区比正常的4个43bp串联多了一个串联,B等位基因启动子缺少-35~-18的18bp序列。结论:该患者B等位基因调控区内的变异很可能是引起其B抗原弱表达的原因。
简介:摘要目的探讨腹部B超联合阴道B超在异位妊娠中的诊断价值;方法选择我院2012年1月至2014年1月收治的高度怀疑为异位妊娠患者98例,将其随机分成实验组和对照组各49例,对照组患者给予腹部B超诊断,实验组患者给予腹部B超联合阴道B超诊断。全部患者最后均给予手术切除并给予病理检查,通过对B超诊断结果和手术直视结合病理检查结果进行对比,比较分析两组患者的诊断符合率;结果手术直视结合病理检查发现实验组49例患者中,异位妊娠患者45例,B超诊断出44例(97.8%);对照组患者中共有异位妊娠患者42例,B超诊断出28例(66.7%);实验组患者的诊断符合率显著高于对照组患者,两者比较差异有统计学意义(P>0.05)。结论在对异位妊娠进行诊断时,腹部B超联合阴道B超的诊断符合率高,临床诊断价值高,应该进行临床推广和应用。