简介：RNA的完整性分别应用4种方法对甘草的两个组织的RNA进行了提取,RNA的产率和纯度分别应用4种方法对甘草的叶片和根部组织的RNA进行了提取,为从富含多糖的根类组织中提取RNA提供了依据

简介：作为一个模式植物,烟草在植物分子生物学研究中发挥着重要的作用。总RNA的提取质量,对于基因表达、基因克隆、cDNA文库建立、RNA原位杂交以及转基因材料鉴定等分子生物学基础研究至关重要。尤其在进行基因克隆及cDNA文库时,只有高质量的RNA,才能保证cDNA第一链合成的完整性。由于烟草中糖类、蛋白质及次生代谢物的含量较高,因此,在应用TRIzolRNA提取试剂盒进行烟草总RNA提取时,所提取的RNA产物中的蛋白质及多糖等杂质含量偏高。因此,针对这一问题,我们对TRIzol法进行了改进,并获得了高质量的烟草总RNA。经琼脂糖电泳检测,利用该方法提取的烟草总RNA,条带清晰、无拖尾现象,28S与18S的比例约为2:1。紫外吸收值的测定表明,所提取的烟草总RNA的A260/A280的值基本达到了1.9以上,说明所提取的RNA的质量较高,可广泛应用于基因的克隆及基因的表达研究。

简介：目的：建立从红花组织中快速分离总RNA的方法，为进行反转录PCR（RT—PCR）、快速扩增cDNA末端（RACE）、蛋白质印迹法及其他分子生物学实验奠定基础。方法：采用改良Trizol法提取红花苞叶总RNA时，加入DNaseⅠ消化残留DNA，并加入RNase抑制剂，利用琼脂糖凝胶电泳及紫外分光光度法进行纯度和浓度检测。RT—PCR后，进行cDNA-序列相关扩增多态性（SRAP）分析。结果：抽提的RNA经电泳检测，可见28S、18S、5SRNA三条带，带的亮度强，且28S的宽度是18S的2倍左右。紫外吸光度D260／D280为1．8～2．0，D260／D230为2．0～2．3。总RNA产物进行cDNA-SRAP扩增，出现清晰的条带。结论：改良Trizol法所提取的RNA纯度高，质量好，完整性好，可成功进行cDNA-SRAP扩增。

简介：检测胰腺组织mRNA的表达已经成为研究胰腺疾病的重要手段，但由于胰腺组织富含RNase，抽提胰腺总RNA是分子生物学实验的难点之一。为此，本实验旨在探讨提取胰腺总RNA的理想方法。

简介：目的：通过对TRIzol一步法进行改进，建立一种从富含胶原蛋白、多糖及色素的仿刺参体壁提取总RNA的有效方法。方法：样品在液氮中研磨并用TRIzol匀浆后再进行抽提；对TRIzol一步法提取的总RNA进行DNaseⅠ消化和酚氯仿抽提，用2.5mol/L的醋酸钾沉淀，并加入适量糖原（10mg/mL）与RNA共沉淀。结果：琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法以及RT-PCR检测结果表明，改进的方法能够有效去除基因组DNA、蛋白、多糖及色素的污染，RNA的产率提高。结论：制备的总RNA纯度高，完整性好，能够满足mRNA差异显示RT-PCR等分子生物学研究的要求，是一种提取仿刺参体壁及其他富含黏多糖、胶原蛋白和色素的动物组织总RNA的有效方法。

简介：

简介：利用改良的异硫氰酸胍法、改良的SDS法和改良的TRlpure试剂盒法对昆明小鼠心脏、肝脏以及肾脏进行组织总RNA的提取,比较其提取效果,结果显示,试剂盒提取效果普遍明显优于其它方法且适用于肝脏总RNA的提取,传统方法的改良适用于肾脏总RNA的提取,心脏总RNA的提取效果均不理想。

简介：目的探讨1mLTrizol试剂提取大鼠心室肌高质量RNA的最适取样量。方法分别用1mLTrizol提取80,60,40,20mg大鼠心室肌总RNA。结果心室肌取样量小于40mg时,提取的RNA完整性和纯度可满足后续实验要求。

简介：以田间幼嫩叶片为试材,建立枣RNA改良CTAB提取法,改良之处包括利用巯基乙醇和PVP联合去除多酚、CTAB与异硫酸氰胍联合促进RNA释放及加入糖原提高产率等。改良CTAB法提取液组成：2%CTAB,4mol/L异硫酸氰胍,100mmol/LTris-HCl（pH8.0）,20mmol/LEDTA（pH8.0）,2%PVP,4%β-巯基乙醇,250μg/ml糖原。进而采用Trizol试剂法、改良CTAB法、改进SDS-酚法、热硼酸法和异硫氰酸胍法5种方法分别对枣组培苗、幼叶、幼嫩枝皮、根皮和枣果5种器官和组织进行了总RNA提取。结果表明,组培苗RNA提取以Trizol试剂法为最佳,田间幼叶和成熟果实宜采用改良CTAB法,幼嫩枝皮和根皮宜采用改良CTAB法或改进SDS-酚法;本研究建立的改良CTAB法可作为枣不同器官和组织RNA提取的通用方法;根据季节可从不同器官和组织中获得高质量RNA;枣组织RNA含量相差较大,以幼嫩叶片含量最高,其次为组培苗、枝皮、枣果和根皮。

简介：以卷丹、麝香百合品种富田和离体鲜切花的花蕾为材料，比较Trizol法、异硫氰酸胍法、CTAB改进法和SDS改进法提取总RNA的效果，结果表明，SDS改进法能有效去除多糖，提取的RNA中28SrRNA亮度约为18SrRNA的两倍，OD260/OD280值介于1．7-2．2之间，卷丹RNA得率为132．52μg／g，富田RNA得率为186．88μg／g。进一步用SDS改进法分别提取富田外轮花瓣、内轮花瓣、雄蕊、雌蕊、叶和茎的RNA，同样可以获得完整的纯度高的RNA，其中28SrRNA亮度约为18SrRNA的两倍，OD260／0D280值介于1．7～2．2之间，说明此方法适用于百合各个组织RNA的提取。经RT—PCR获得了花发育基因的特异性条带，说明用SDS改进法从百合中提取的RNA质量好、产率高、完整性强，完全适合于百合进一步的分子生物学研究。

简介：针对沙棘组织中多糖、多酚、粗蛋白等次生代谢产物含量高的特点，采用RNAplantPlus总RNA提取试剂改良法，成功地提取了沙棘叶片总RNA。所提取的沙棘叶片总RNA凝胶电泳显示28s和18s条带清晰完整，A260/A280和A260/A230比值分别为1.79和2.07，且平均得率为298.1μg/g（鲜叶）。试验结果表明，RNAplantPlus总RNA提取试剂改良法具有方便快捷、提取RNA纯度高、有效排除多种次生代谢产物影响的特点，用该方法提取的沙棘叶片总RNA可以用于后续的分子生物学研究中。

简介：目的探讨单层培养细胞总RNA提取过程中先行细胞消化或离心富集对所提RNA质量是否产生影响。方法培养NGF诱导的PCI2细胞，采用Trizol试剂提取RNA：离心组（A）先将贴壁生长细胞经胰酶消化、离心获得细胞沉淀，加入1mlTrizol进行RNA提取；直接组（B）将培养液弃尽后直接加入Trizol试剂（1ml／10cm2瓶壁）进行RNA提取；均采用琼脂糖凝胶电泳分析RNA完整性，紫外分光光度仪测定RNA浓度和OD260／OD280比值。结果凝胶电泳结果显示，直接组出现3条清晰的条带（28S、18S和5s条带），离心组在电泳末端5S区出现粗大的条带。两组OD260／OD28比值相似，约为1．6。直接组组间样品间RNA浓度相差较大。结论采用离心法和直接法提取贴壁细胞总RNA，先行细胞离心富集增加了RNA降解机会，直接法提取的RNA质量较高，考虑对后续实验的影响，直接法更优于离心法。

简介：用修改了的异硫氰酸胍法从两种森林昆虫Closteraanastomosis和Saperdapopulnea的不同组织中快速提取总RNA.电泳检测和cDNA合成分析结果表明,RNA未降解.经紫外分光光度计检测,A260/A280在1.8到2.0之间,表明RNA的纯度很高.用RT-PCR合成的双链cDNA的长度大于2kb,表明mRNA的完整性.用PCR的方法克隆了C.anastomosisβ肌动蛋白和几丁质酶的基因片段,表明RNA可用于其它分子操作.使用这个方法,在4个小时内可至少从8个样品中提取RNA并进行电泳分析.这些结果表明用这个修改后的一步法提取昆虫总RNA是省时,省钱和有效的.

简介：从动物组织中提取总RNA是现代分子生物学研究中经常使用的重要实验技术,按常规方法获得的总RNA产品中常伴有大分子量染色体DNA污染.为此,我们摸索出了保证RNA制品纯度、质量和产量的DNA酶消化最佳反应条件.利用改良后的方法提取了小鼠脏器组织总RNA,进行了新基因mPC-1在小鼠脏器中表达的组织分布研究.

简介：念珠菌是最主要的致病性真菌之一。随着医学分子生物学的发展，有关对念珠菌的致病基因及其表达的研究越来越广泛，进行这些研究的一个关键步骤就是RNA的提取。主要由几丁质组成的真菌的细胞壁厚且坚韧，因此破壁是提取念珠菌RNA的关键。

简介：【摘要】目的 探讨不同核酸提取方案对HCV-RNA检验结果影响。方法 60例丙肝患者为样本，时间2020年7月-2021年7月，随机分组，A组固相吸附法提取核酸，B组氯仿-异丙醇法提取核酸，对比检验灵敏度、阳性检出率。结果 A组稀释1X105倍，可完成荧光定量PCR检测，继续稀释无法检测，B组稀释1X104倍，可完成荧光定量PCR检测，继续稀释无法检测；A组阳性检出率较B组高，P＜0.05；血红蛋白浓度5g/L，A组抗干扰能力与B组无差异，P＞0.05；血红蛋白浓度50g/L时，A组抗干扰能力较B组高，P＜0.05。结论 固相吸附法用于HCV-RNA检验中，阳性检出率高、抗干扰能力强，符合临床检验要求，且检测结果可作为丙肝治疗依据。

简介：摘要：目的：分析临床检验标本中病原微生物的 DNA/RNA快速提取技术。方法：采用三种方法进行病原微生物的 DNA/RNA快速提取，主要包括柱式提取法、煮沸法和快速法，对以上三种提取方法的应用效率和提取效果进行分析。结果：柱式提取法、煮沸法和快速法的病原微生物 DNA/RNA快速提取时间分别为 55min、 35min和 4min，快速法的提取时间比较短，与其他两种方法相比应用优势较为明显。对三种提取方法的提取效果对比分析可以了解到，三者无明显差异。结论：使用快速发进行病原微生物 DNA/RNA的提取能够在较短的时间内完成相关操作，提取效率比较快同时也可以保证提取效果，可以加强这种提取方法的应用。

简介：以感染病毒病的辣椒叶片为材料，分别用改进的Trizol试剂提取法、异硫氰酸胍提取法、改进的酚一SDS提取法提取总RNA，经过RT—PCR，利用CMV和TMV的病毒外壳蛋白设计特异引物检测。结果表明：改进的Trizol试剂提取法能获得较高质量和产量的总RNA，可以单人大批次提取，并在辣椒病毒病检测中能稳定而准确地进行规模化RT—PCR检测。

简介：目的：从航天诱变向日葵种子中提取高质量的总RNA。方法：采用改进的SDS法,提取缓冲液与氯仿同时作用液氮研磨材料后,用酸酚-氯仿抽提一次,经LiCl过夜沉淀、DNaseⅠ处理、1/2体积的无水乙醇沉淀多糖,最后加入1/10体积的醋酸钠和2倍体积的无水乙醇沉淀总RNA,用琼脂糖凝胶电泳与紫外分光光度法测定产量与纯度,用PT-PCR鉴定RNA的质量。结果：提取的RNA电泳条带清晰,D260nm/D230nm、D260nm/D280nm值分别为2.09、2.00,其产量为35.30μg/100mg,用PT-PCR能扩增出肌动蛋白基因片段。结论：采用该方法提取的总RNA纯度高、完整性好,适于进一步的分子生物学研究

简介：针对多浆旱生植物霸王富含多酚和多糖类物质的特点，在常规异硫氰酸胍方法的基础上进行改进，摸索出一种霸王叶和根总RNA提取的方法。本方法主要通过在提取缓冲液中加入4％β-巯基乙醇以去除多酚物质的干扰；用2mol／L醋酸钠（pH4．0）、水饱和酚和氯仿：异戊醇（24：1）抽提以去除多糖和蛋白物质。采用该方法提取的霸王总RNA纯度高、完整性好，电泳条带清晰，OD260/OD280值在1．8～2．0之间，其质量完全可以满足进一步分子生物学研究的要求。