中草药公丁香提取液与醋酸氯已定体外杀精子实验对比研究

王磊光贾颐舫杨丹彤张爱东邱毅

王磊光贾颐舫杨丹彤张爱东邱毅

（山东省计划生育科学技术研究所优生技术重点实验室山东济南250002）

【中图分类号】R285.5【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2009)05-0013-02

【摘要】中草药公丁香提取液比醋酸氯已定溶液具有更快的体外杀灭精子作用，可能作为瞬间杀灭精子的中草药制剂。

【关键词】中草药公丁香醋酸氯已定体外杀精子效果

目前国内外使用的体外杀精子剂有的副作用较大且体外杀精子效果不确切[1]。为尽快研制出高效、无毒副作用、安全价廉的新型杀精子制剂，我们从200多种传统中草药中筛选出杀精子效果好的公丁香，并与西药醋酸氯已定的体外杀精子效果进行比较。报告如下。

1材料和方法

1.1实验仪器

倒置显微镜（日本，OLYMPUS，带有恒温保温装置），观察精子活动情况。ThermoCell恒温金属浴（杭州博日科技有限公司），中草药有效成分提取。恒温水浴箱（37℃），保存精液标本及实验标本。梅特勒-托莱多DELTA320型pH计。

1.2实验动物

实验用成年雄性昆明小鼠32只，体重32-46g。脊椎脱臼法

处死后立即收集输精管和附睾尾部精液，将附睾尾和输精管剪碎，放入含有1ml0.9%生理盐水溶液中，37℃条件下保温10min，将精子稀释至60×106/ml，备用。

1.3实验药材

中草药公丁香、川楝子及五味子，干药材，粉碎。称取公丁香、川楝子及五味子粉碎干药材各1000mg，分别加入10ml0.9%生理盐水,置于ThermoCell恒温金属浴中100℃40min-60min，过滤，制成提取液，测定提取液pH值。提取液（过滤液）与精液的比例为1∶1，倒置显微镜观察结果，从药液加入到精液时即开始计时。

1.4西药醋酸氯已定配置

称取醋酸氯已定干粉100mg，分别加入100ml蒸馏水中及100ml0.9%生理盐水中。醋酸氯已定溶液与精液按1∶1或2∶1

的比例分别进行体外杀精子实验。

1.5精液标本

实验用精液标本选自25-35岁健康男性38例，禁欲3-5d，手法取精液于干净灭菌的25ml小烧杯内，精液量2-4ml，pH7.0-8.0，液化时间<30min，精子活动率70-92%，活动力a+b级50%-80%，精子密度>60×106/ml，畸形精子率<20%。

1.6体外杀精子试验

按世界卫生组织（WHO）推荐的Sander-Cramer方法和标准略加修改。

本次实验规定的体外杀精子效果分级：从精子接触药物起至0.5min内全部失活为具有瞬间杀精子作用；0.5min-3min之间为具有较强杀精子作用；3min-5min为微弱杀精子作用。

1.7统计学处理

所有数据均录入SPSS系统（12.0版）进行分析，采用t检验，P<0.05作为有显著性差异的标准。

2结果

2.1公丁香、川楝子、五味子提取液及醋酸氯已定溶液以及与精液混合后pH值见表1。

表1中草药提取液、醋酸氯已定溶液及与精液混合后pH值

公丁香川楝子五味子醋酸氯已定

提取液pH值6.014.013.527.10

混合后pH值7.185.715.237.21

2.2公丁香、川楝子、五味子提取液及醋酸氯已定溶液对小鼠体外杀精子情况

公丁香体外杀小鼠精子效果最好，而且调整提取液pH值前后的体外杀精子效果相同，川楝子和五味子提取液调整pH值前后效果有非常显著差异。醋酸氯已定溶液与小鼠精液比例为1∶1时

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及2∶1时的体外杀精子效果无差异。公丁香提取液调整pH值前后与醋酸氯已定溶液的杀精子效果比较有显著差异。

2.3公丁香、川楝子、五味子提取液及醋酸氯已定溶液对人精子体外杀灭情况

公丁香体外杀精子效果最好，且提取液调整pH值前后的体外杀精子效果相同，川楝子和五味子提取液调整pH值前后的体外杀精子效果有非常显著差异。醋酸氯已定溶液与人精液比例为1∶1时及2∶1时的体外杀精子效果有显著性差异。公丁香提取液调整pH值前后与醋酸氯已定溶液的杀精子效果比较有显著差异。

3讨论

3.1结果分析

实验结果显示公丁香提取液对小鼠精子和人精子的体外杀灭最快，平均为0.26min和0.58min，为瞬间杀灭精子的中草药。醋酸氯已定0.9%生理盐水溶液无体外杀精子效果。而用蒸馏水配制的1%醋酸氯已定溶液与精液1∶1混合后体外杀精子效果微弱，2∶1的溶液有较强的杀精子效果，但蒸馏水为低渗液，究竟是醋酸氯已定的杀精子作用还是由于低渗引起的精子死亡，有待进一步探讨。

3.2中草药体外杀精子剂研制前景

本研究中我们应用公丁香等进行体外杀精子实验，取得了较好效果。中草药体外杀精子剂研制具有取材容易、使用方便、价格便宜等优点。中草药作为阴道用避孕药应用的前景将十分广阔。

参考文献

[1]伏晓敏,励千里,金爱华.氯已定醋酸盐的体外杀精效果及抑菌作用的研究.中国现代应用药学,2003，20(2):97-99.