甲状旁腺激素1-34通过Wnt/β-catenin信号通路阻断晚期糖基化终末产物对骨髓间充质干细胞负性成骨作用

(整期优先)网络出版时间:2020-08-10
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摘要目的观察甲状旁腺激素(PTH)1-34是否可以阻断晚期糖基化终末产物(AGEs)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的负性成骨作用及其可能信号通路。方法采用全骨髓法分离培养4周龄SD大鼠的BMSCs,分别给予成骨诱导液、牛血清血蛋白(BSA)、AGEs、AGEs联合PTH1-34预处理,7 d后行实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原酶(COL-Ⅰ)mRNA表达水平,Western印迹法检测β-catenin、osterix(OSX)、核心结合蛋白因子2(RUNX2)、终末期氨基糖基化受体蛋白表达水平。21 d后采用茜素红染色检测矿化结节并定量;在10-8 mmol/L的PTH1-34中加入Wnt通路特异性阻断剂Dickkopf-1(DKK1)1 μg/ml后,Western印迹法再次检测β-catenin、OSX、RUNX2蛋白表达水平。结果AGEs抑制ALP、COL-Ⅰ mRNA及β-catenin、OSX、RUNX2蛋白表达(P<0.05),而PTH1-34预处理后逆转AGEs的作用,ALP、COL-Ⅰ mRNA及β-catenin、OSX、RUNX2蛋白表达较AGEs组增加(P<0.05),茜素红染色矿化结节呈红棕色且增多,定量检测OD值,PTH1-34预处理组高于AGEs组(P<0.05)。DKK1(1 μg/ml)作用后,β-catenin、OSX蛋白表达均较BSA组减少(P<0.05)。结论PTH1-34可通过Wnt/β-catenin信号通路阻断AGEs对BMSCs的负性成骨作用。