冻干粉针剂无菌灌装验证中应注意的问题分析

贾林茹   ,刘海鹂  ,张尚师

摘要：采用真空的冷冻干燥工艺进行药物制剂的生产，既能保证药品的质量，又能延长药品的使用寿命，节省成本。该技术在医药制剂生产中得到了广泛的应用。对于冻干粉针剂，除了对其各个体系的验证之外，还要对无菌生产工艺进行相应的验证，以验证整体无菌生产工艺的可靠性。

关键词：冻干粉针剂；无菌灌装；问题分析

现代医学科技的发展，能够为人类的整体发展提供有力的支撑，促进人们的生活质量的提高。科学用药是医学发展的必然要求。药品的制造质量直接影响到药品的疗效。在药品生产中，由于其对药品性质的稳定和对药品的贮藏作用，已被广泛采用。在制造冻干粉针剂时，必须保证工艺的无菌。要对工艺手段的无菌性进行检验，就必须对其进行科学的检验。针对SWC，为保证其有效的无菌化生产，必须同时进行无菌化与公用化两个环节的无菌化检验。依据有关资料，将培养基装入玻璃瓶内，经隧道炉内消毒后，再置入冰冻干燥器内，进行冰冻干燥器的模拟冰冻干燥作业。在采用以上方法进行试验验证时，为防止冻干粉针剂生产过程中微生物的死亡或破坏，将冻干粉针剂的温度控制在常温。为使试验过程更接近实际情况，同时保证试验结果的正确性，将玻璃瓶盖及橡皮塞子清洗、灭菌后，将灭菌液注入冰冻干燥器，使其处于半真空状态。

1冻干粉针剂无菌灌装验证

目前，国内有关部门对此项技术的检验，主要采用的是将培养基置于无菌玻璃瓶内，再置于冰冻干燥器内，以模拟冰冻干燥。这个方式是用来避免在生产过程中无意中引进的微生物，这些微生物会因为温度过低而造成人员的伤亡和损害。在仿真时，动态温度应该在3℃以下。在此确认方式下，并不能模拟真实的生产工艺。本文在前期研究的基础上，通过多项试验，拟采用胰酶型豆豉（TSB）为研究对象，对其制备全过程进行仿真，并对其进行验证。在清洁和消毒后，将冰柜上的无菌液加入冰柜中，封口。对冻干粉针剂的无菌性进行检验。

2冻干粉针剂无菌灌装验证方法

为了得到精确的试验结果，对冻干粉针剂的无菌灌装进行验证操作。需要依赖试验器材，围绕一些特定的药物开展试验应限于标准条件，并应选用合适的试验方法。因此，有必要对冻干粉你针剂的质量检验方法进行深入的分析与研究以确保实际验证结果的准确性。

2.1培养基的可靠性试验

按照有关消毒规程，在121℃温度下消毒30分钟。另有8根管子被用来分别装入12毫升TSB介质。将枯草芽孢杆菌与白假丝酵母各接种2管，以空白试管为对照。在适宜的培养温度下，进行3天的菌体培养，每日对菌体进行检测，并做好菌体生长的记录。根据以上操作程序及结果，可判断该介质的可靠性。

2.2培养基的相关无菌性试验

从全部介质中随机抽取20份，置于30℃的环境中一星期，然后做相应的介质检验，看有无微生物在这些介质中生长。

2.3灭菌后的玻璃瓶以及相关的胶塞的无菌性试验

从各玻璃瓶及对应的橡皮塞中，随机选取20个已清洗、干燥、灭菌的橡皮塞做试验。用TSB溶液浸渍，于30-35℃条件下培养48小时.对相应细菌在玻璃器皿及橡皮塞上的生长进行观察。

2.4进行冷冻干燥之后的玻璃瓶的无菌验证

用管道烘干炉烘干并消毒过的玻璃瓶子，放进冰箱烘干器，并将其平铺于各隔间上。根据标准步骤对冻干过程进行仿真。在冻干结束后，从隔离物中任意选取5个玻璃瓶进行无菌培养。

 2.5培养基的无菌灌装

在进行冻干和模拟冻干后，将玻璃瓶用作进行灌装的容器。在不断添加介质的过程中，每一瓶5ml的容量应该和标准的产品容量大致相同。在包装过程中，产品及产品容器的暴露时间应该类似于一般产品的包装过程。并设定手动停机，延长物料接触到液体的时间，在充填时，对每个试样做好编号。在填好培养液后，要用塞子将药剂倒过来，充分摇匀，再做相应的培养。

3无菌灌装验证的注意事项

在医药临床中，由于其使用范围较广，若不能确保其无菌性的充填，同样会影响药物的使用。采用该方法，可较好地控制HCC注射液的无菌性。但在实际操作过程中，应注意下列问题：

3.1验证人员问题

无菌性充填认证的执行与运作，需要有较高的专业技能，并且需要经过系统性的培训与训练，并以无菌性替换来确定。当执行无菌充填确认时，在充填期间，最大限度地保证充填过程中重要部位的工作人员，并对工作人员流量的大小和频率加以控制。

3.2培养基微生物生长性能

在开始使用之前，必须先确定微生物的生长状况，以保证无菌充填试验的效果，同时也要保证培养基的效果。

3.3无菌灌装

在进行无菌灌装验证的时候，灌装数量应该与实际的生产数量相近，并且要对生产人员的行为和设备运行的时间进行仿真，比如生产线的最大允许运行时间、轮班时间、生产线的运行速度、数量、类型，以及生产过程中可能出现的干扰的复杂性进行仿真。

3.4判断验证结果

按照《无菌制剂GMP实施指南》的要求，为了保证评估结果的正确性，需要有充足的培养基充填容器。如果是小量生产，那么所需的菌种数量应该与所需生产的菌种数量相等。介质仿真试验的目的是避免细菌的滋生，它必须遵守下列几个条件：①在5000个试管中，不能检出被污染的制品；②灌装量为5000—10000时：只需对1种污染进行研究，并可考虑反复灌装培养基试验。有两个来源需要被研究，它们可以被看作是再次确认的理由。所有的微生物污染都要进行调查。

4结果验证

第一，对培养基的敏感性进行研究，结果显示：培养基在培养后的生长趋向良好，而在空白对照组中则没有任何一种培养基，说明培养基的敏感性达到了规范的要求。第二，是对培养基的无菌性检验。在20-25℃、30-35℃条件下，连续7天均未见有细菌出现，说明该培养基为无菌性，达到了标准。第三，确认胶塞的无菌性：胶塞在灌装前和灌装后，均要根据《中国药典》《无菌检验方法》检验胶塞的无菌性。第四，确认瓶子的无菌性：瓶子在灌装前和灌装后，要根据《中国药典》的“无菌试验法”对瓶子进行无菌试验，并通过观察瓶子的无菌生长情况来确认瓶子的无菌性。第五，无菌填充试验结果：在进行无菌填充时，填充速率与正常填充速率一致。在充填作业期间，模拟人工停机2次，维修30分钟。5个人负责清洗填充区域，9个人负责检验作业。在充填作业中，记录充填时间及充填次数。分别于20-25℃、30-35℃培养7天，均无菌生长。第六，基体微生物促生长性能（阳性）测试：基体微生物促生长性能（阴性）测试表明，在每一种接种的基体中，都有明显的菌体生长，这说明该基体是有效的。

5结语

冻干粉针剂是无菌型制剂，要想保证其安全有效性必须在生产工艺中进行严格的无菌控制。药品配制要科学，灌装过程要在全A级环境下进行，参与无菌灌装验证的人员经过培训，设备经过验证，菌种有质量保证，无菌灌装模拟要对所有出现的故障或操作做到时限最长的干预，人员轮换和单位时间人数要做到最大限度的模拟，这样才能确保冻干粉针剂灌装过程的无菌性。

参考文献：

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[2]魏冬冬,高勇强,张丽丽,武晓梦.冻干粉针剂设备选择及技术细节问题的研究[J].科技风,2020(08):173.