简介：摘要目的对2例中国汉族成骨不全症（osteogenesis imperfecta，OI）患者进行突变检测，对其候选剪接变异进行致病性鉴定。方法采用常规酚-氯仿法从2例中国汉族OI先证者的外周血中提取基因组DNA，通过全外显子组测序（WES）进行致病突变筛查；针对检出的可能引起RNA剪接异常的疑似致病变异，构建Minigene分析变异对于剪接的影响，进而确定其致病性。结果在先证者1中发现可能影响剪接的杂合变异：COL1A1：c.858+1_858+5delGTAAG；先证者2同时存在COL1A2的两个变异，一个为可能引起异常剪接的杂合变异c.1405-7C>T，另一个为杂合错义变异c.2972G>T（p.G991V）。Minigene实验分析证实家系1的变异导致COL1A1基因第12外显子发生跳跃，家系2变异位点c.1405-7C>T对COL1A2的转录后剪接没有影响。先证者2的COL1A2基因的G991为一个高度保守的氨基酸，经生物信息学分析c.2972G>T（p.G991V）可能为真正的OI致病变异。结论先证者1的COL1A1剪接位点变异c.858+1_858+5delGTAAG是导致OI的致病性变异；排除先证者2中COL1A2变异c.1405-7C>T的致病性，确定COL1A2基因变异c.2972G>T（p.G991V）为先证者2的致病原因。针对WES提示的剪接变异进行Minigene分析，不仅实现了突变致病性鉴定，丰富了OI的突变谱，而且为患者产前诊断和后续机制研究奠定了基础。

简介：摘要目的探讨早产儿先天性甲状腺功能减退症（congenital hypothyroidism，CH）的特点及暂时性CH（transient congenital hypothyroidism，TCH）和永久性CH（permanent congenital hypothyroidism，PCH）的预测因素。方法选择2008年1月至2018年6月在北京市出生并经北京市新生儿疾病筛查中心筛查、确诊并治疗的早产CH患儿进行回顾性研究，按临床转归分为TCH组和PCH组，采用单因素和多因素Logistic回归模型分析早产CH患儿转归为PCH的预测因素，绘制受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线确定最佳切点。结果研究期间共筛查新生儿2 216 892名，初筛阳性15 382例，筛查时间为生后4（4，10）d，复查时间为生后30（22，42）d，复查14 576例，复查率94.8%；确诊早产CH患儿92例，其中60例诊断为TCH，占65.2%；28例诊断为PCH，占30.4%；4例失访，占4.3%。单因素分析显示，PCH组甲状腺B超异常率（包括位置、大小和回声结构异常）、1岁时左旋甲状腺素（levothyroxine，LT4）药量、2岁时促甲状腺素（thyroid-stimulating hormone，TSH）水平、2岁时LT4药量、3岁时LT4药量和3岁时游离甲状腺素水平均高于TCH组（P<0.05）；Logistic回归分析显示，B超异常（OR=12.184，95%CI 2.270~65.403），2岁时TSH水平高（OR=2.033，95%CI 1.280~3.228）和3岁时药量大（OR=21.435，95%CI 3.439~133.584）是发生PCH的危险因素。3岁时药量的ROC曲线下面积最大，为0.798（95%CI 0.680~0.916），最佳切点为1.3 μg/（kg·d）；其次为2岁时TSH水平，为0.683（95%CI 0.548~0.817），最佳切点为4.51 μIU/ml。结论早产CH中TCH占比多；随访中3岁时药量大和2岁时TSH水平高是PCH的早期预测因素。