简介：本文阐述了CD20的分予结构、CD20单克隆抗体的免疫抑制机制、在肾移植中的应用以及存在的问题与展望。

简介：目的比较不同厂家单克隆抗体检测封闭抗体的结果差异。方法使用BD公司及贝克曼-库尔特（BC）公司的复合CD4/CD8/CD3三色荧光抗体,对30例反复自然流产（Recurrentspontaneousabortion,RSA）患者进行流式细胞术封闭抗体（Blockingantibody,BA）检测,用kappa系数评价两种抗体检测结果的一致性,用McNemar检验比较两种抗体的差异及其对临床决策的影响。结果经McNemar检验,当以BA单项阴性为需要接受主动免疫治疗的标准,则两组差异有统计学意义（P〈0.05）;若以BA双项阴性为需要治疗的标准,则两组差异无统计学意义（P〉0.05）;两种抗体检测结果一致性较差,kappa系数=0.2。结论两种单克隆抗体检测封闭抗体的结果存在差异,实验室应明确使用抗体的厂家,尤其是对同一患者治疗前后检测封闭抗体变化时应使用相同厂家的抗体。

简介：摘要：现阶段，国内企业（含外企）单克隆抗体（以下简称“单抗”）药物生产设备主要有传统型生产设备和一次性抛弃型生产设备两种。通过项目设计实例，结合中国GMP（2010修订版）的要求，就一次性抛弃型生产设备的车间布局设计进行探讨与分析。

简介：摘要:

简介：【目的】原核表达纯化人锌指蛋白（zincfingerprotein580,ZNF580）并制备抗人ZNF580单克隆抗体。【方法】将构建的重组质粒pET30a-ZNF580转化大肠杆菌BL21（DE3）,由异丙基-β-D-半乳糖苷（Isopropylbeta-D-galactosidase,IPTG）诱导表达并纯化目的蛋白。将纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠,制备针对ZNF580的特异性单克隆抗体并通过ELISA和Westernblotting方法鉴定。【结果】含有该质粒的大肠杆菌BL21（DE3）经IPTG诱导表达后,产物蛋白分子量约为19kDa,通过将Sp2/0细胞与免疫鼠的脾细胞融合获得了1株能稳定表达ZNF580抗体的杂交瘤细胞株（H4E4C5）,其分泌的单克隆抗体的IgG亚类IgG2b,ELISA检测腹水抗体效价为1：1.28×10~5,Westernblotting结果显示抗ZNF580单克隆抗体具有良好的特异性。【结论】本实验成功表达并纯化了ZNF580蛋白并制备了抗ZNF580蛋白的单克隆抗体,为进一步研究锌指蛋白ZNF580的功能奠定了基础。

简介：

简介：OKT3是一种鼠源性抗CD3单克隆抗体的强效免疫抑制剂，其临床主要适应症是肾移植术后难治性排斥反应，其他适应症包括：①抗急性排斥反应的初始治疗；②术后预防排斥反应的诱导治疗，尤其是术后早期肾功能延迟性恢复；⑧选择性用于多克隆抗体治疗期间产生抗马或者抗兔抗体患者的急性排斥反应。但是OKT3在临床使用中可能出现诸多的副作用。

简介：本研究探讨抗CD25单克隆抗体在单倍体相合骨髓移植术（hiBMT）后耐激素的急性移植物抗宿主病（aGVHD）治疗中的作用。对15例单倍体相合BMT后出现耐激素的Ⅱ-Ⅳ度aGVHD的患者给予巴利昔单克隆抗体20mg，第1、4天静脉点滴，未达到疗效的病人间隔1周后重复本治疗。结果显示：完全有效8例（53．33％），其中4例无病生存，2例生存伴局限性cGVHD，2例死于肺部感染；3例部分有效（20％），其中1例无病生存，1例死于aGVHD及感染，1例死于肺部感染；4例无效（26．67％）死亡，死亡原因有GVHD、肺部感染、心力衰竭。总有效率73．33％，总生存率46．67％。该药应用安全，未发现输注相关的毒副作用。结论：抗CD25单克隆抗体对单倍体相合BMT后耐激素的Ⅱ-Ⅳ度aGVHD具有较好的疗效，但总的生存率仍然较低，感染仍然是导致该类患者死亡的主要原因，因此加强环境保护，预防感染极为重要。

简介：目的研究新型NRG1依赖性HER3单克隆抗体对HER2过表达N87胃癌细胞Lapatinib耐药的逆转作用。方法HER2过度表达N87细胞接受不同浓度Lapatinib和/或NRG1依赖HER3单克隆抗体（3D4B3）处理后,利用CellTiter96Aqueous单溶液细胞增殖检测试剂盒检测细胞活力,利用BrdU掺入法检测细胞的增殖与凋亡。结果无NRG1刺激,Lapatinib对HER2过表达N87细胞增殖有显著抑制作用,而3D4B3几乎无抑制作用,联合应用无叠加效应。随着NRG1刺激和HER3的激活,Lapatinib的增殖抑制效应明显减弱或消失,Lapatinib联合3D4B3再次有效抑制N87细胞的增殖。结论3D4B3可能通过抑制HER2过表达N87胃癌细胞增殖部分逆转Lapatinib的耐药。

简介：慢性淋巴细胞白血病（CLL）是一种恶性淋巴细胞增生性疾病，老年人多发。目前CLL治疗的主要问题是：①治疗完全缓解率低；②CLL伴随免疫系统功能紊乱和治疗药物的骨髓抑制、感染等副作用，高龄患者难以耐受。本研究报告我科成功治疗1例74岁高龄B细胞性慢性淋巴细胞白血病患者。在治疗中采用核苷酸还原酶抑制剂即氟达拉滨，联合抗CD20单克隆抗体方案，按标准治疗剂量给药，并根据患者个体情况调整给药时间，运用泛细胞保护剂氨磷汀进行辅助治疗。结果表明：1个疗程治疗后患者达到完全缓解，外周血的细胞计数和分类恢复正常；继续应用氨磷汀辅助治疗20天，患者贫血得到纠正，血红蛋白量稳定在120g／L以上，化疗药物的副作用和并发症均得到了有效的控制。结论：老年CLL患者化疗过程中，采用氟哒拉滨联合抗CD20单克隆抗体方案，按标准剂量给药，同时根据患者自身情况调整给药次序和给药时间，体现个性化治疗，获得满意疗效；氨磷汀可以有效减轻或克服CLL伴随的免疫系统功能紊乱，以及氟哒拉滨、抗CD20单克隆抗体引起的骨髓抑制、感染、发热等副反应。

简介：目的:构建并鉴定血管血友病因子裂解酶(ADAMTS13)单克隆抗体,并研究其生物学功能。方法:利用真核表达的重组血浆金属蛋白酶ADAMTS13截断型蛋白(ADAMTS13-T7)纯品免疫BALB/c小鼠,经标准单克隆抗体技术制备单克隆抗体。用ELISA方法鉴定单克隆抗体的特异性;应用免疫印迹技术确定单克隆抗体与全长ADAMTS13的识别能力;观察单克隆抗体对ADAMTS13水解vWF的影响。结果:最终获得6株抗ADAMTS13的单克隆抗体,克隆号分别为1G11、2F11、6G3、9E1、10A8、10B4。经ELISA鉴定,纯化后的单克隆抗体1G11和2F11的效价最高,与截断型ADAMTS13-T7蛋白结合能力比较,明显高于全长ADAMTS13蛋白。Westernblotting结果显示,6个单克隆抗体都能与全长ADAMTS13结合,其中1G11和2F11条带最亮。功能实验表明,在变性条件下1G11和2F11能够明显抑制ADAMTS13水解vWF,并随着单克隆抗体浓度的增加而抑制作用增强。结论:成功获得针对ADAMTS13的单克隆抗体,其中两株为抑制性功能抗体。

简介：目的探讨克隆氏病的手术适应证和影响术后复发的因素.方法对17例病理确诊为克隆氏病患者的诊断及外科治疗进行回顾性分析.结果本组术后随访15例,其中1例术后死于腹腔严重感染及中毒性休克,其余14例随访1个月～10年,其中10例术后坚持配合内科治疗,有8例临床症状基本消失或症状轻微;而术后未配合内科治疗者,4例中有3例症状同前,仅1例症状轻微.结论本病当并发肠梗阻、消化道大出血、肠穿孔、腹膜炎等是外科治疗的适应证.对于病变局限于某一肠段,症状反复发作,且正规内科治疗效果不显著者亦应考虑外科手术治疗.术后能配合积极的内科治疗是降低术后复发率的重要措施.

简介：克隆氏病（Crohn’Sdisease）是一种消化系统炎症性疾病。此病无法治愈，但患者在缓解期内可以免受疼痛和腹泻的折磨。一篇新的Cochrane系统评价提示，肠内营养可能成为延长缓解期的途径之一。

简介：摘要目的高温依赖蛋白HtrA的克隆表达，为进一步研究其结构与功能奠定基础。方法构建重组质粒pGEX-6P-1/HtrA，经PCR、测序鉴定后将其转化至表达宿主菌E.coliBL21中。结果构建了重组质粒pGEX-6P-1/HtrA，并在E.coliBL21菌中高效表达出相应分子量的GST-HtrA目的蛋白，表达了相对分子量（Mr）与预测分子量相近的可溶性蛋白。重组蛋白经GST树脂成功纯化。结论成功克隆表达了HtrA蛋白，为进一步研究其结构与功能奠定了基础。

简介：摘要目的通过分子生物学技术对结核分枝杆菌Rv0350基因克隆、表达与纯化。方法以结核分枝杆菌标准菌株H37Rv为模板，经聚合酶链式反应(PCR)扩增，克隆Rv0350基因，与质粒pET-28a连接构建重组质粒，转入大肠杆菌BL21(DE3)，经异丙基半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过镍亲和层析获得纯化的重组蛋白。结果对扩增后的基因进行电泳试验，证实成功重组目的基因，对重组纯化后的蛋白进行考马斯亮染、Weston-blot验证已成功重组Rv0350。结论通过分子生物学技术可成功获得大量结核分枝杆菌Rv0350抗原，为后续功能与机理研究奠定基础。

简介：

简介：慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）的免疫治疗是清除白血病微小残留病并最终根治ＣＭＬ的方向之一，包含ＢＣＲ－ＡＢＬ融合区的多肽具有良好的免疫原性，在体内、外可诱发ＢＣＲ－ＡＢＬ特异的Ｔ细胞克隆。以ＢＣＲ－ＡＢＬ融合肽瘤苗激发特异性Ｔ细胞应答ＣＭＬ免疫治疗有希望成为根治ＣＭＬ残留白血病的有效手段。本实验通过基因工程技术，设计一个２８０ｂｐ的融合抗原基因片段，包含ＨＬＡ－Ａ２，ＨＬＡ－Ａ３，ＨＬＡ－ＤＲ１１等３

简介：摘要目的CPSIT_0420蛋白的克隆表达，为进一步研究其结构与功能奠定基础。方法构建重组质粒pGEX-6P-1/CPSIT_0420，经PCR、测序鉴定后将其转化至表达宿主菌E.coliBL21中。结果构建了重组质粒pGEX-6P-1/CPSIT_0420，并在E.coliBL21菌中高效表达出Mr约为28kDa的GST-CPSIT_0420目的蛋白，表达了相对分子量（Mr）与预测分子量相近的可溶性蛋白。重组蛋白经GST树脂成功纯化。结论成功克隆表达了CPSIT_0420蛋白，为进一步研究其结构与功能奠定了基础。

简介：载脂蛋白（APO）B主要分布在人体血液中的的低密度脂蛋白（LDL）和极低密度脂蛋白（VLDL）中，约占LDL蛋白质的95％～99％，其主要功能是参与脂质转运和被细胞膜上的LDL受体识别。研究证明，apoB与动脉粥样硬化（AS）的发生有着密切的关系。近年来，多数医院已开展了测定人体血液中apoB含量来判定AS的危险程度。而国内所用的试剂盒均为多克隆抗体，这给临床测定结果的准确性和特异性带来了一定的差异。为此国内许多研究单位拟想通过基因重组技术，将apoB单抗细胞株通过逆转录、构建使其表达apoB单链抗体。

简介：目的制备胃动素受体多克隆抗体和研究该受体在人胃中的组织定位.方法通过合成肽耦联钥孔戚血蓝蛋白(keyholelimpethemocyanin,KLH)制备抗体,以ELISA方法测定效价.用含有GPR38基因(胃动素受体)的质粒转染293细胞株,以RT-PCR方法鉴定.Westernblot和免疫组织化学法检测转染的293细胞和组织中胃动素受体的表达.结果制备的兔抗人的多抗效价达1∶500000,有较好的特异性.成功转染293细胞,该细胞能够瞬时表达胃动素受体,而该受体在人胃窦胃体的黏膜腺上皮中表达.结论应用合成肽-KLH成功地制备了胃动素受体的兔抗人多克隆抗体,用该抗体检测到人胃窦胃体黏膜上皮细胞存在胃动素受体的表达.