简介:摘要:建立了大米中黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A同时处理的免疫亲和柱净化-高效液相色谱方法。样品经过甲醇-水(体积比为70:30)提取,通过免疫亲和柱富集和净化,采用依利特 Hypersil ODS2色谱柱(4.6×150mm,5μm),以乙腈:2%冰乙酸溶液为流动相,等度洗脱,采用高效液相色谱结合荧光检测器检测。黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A检出限分别为0.024和0.063μg/kg,标准曲线的线性范围分别为0.10~40.0和1.00~100.0ng/mL,大米样品中,平均加标回收率为79.5.%~88.0%,方法精密度为2.5%~5.3%。
简介:摘要 :目的 :观察益气解毒活络中药组分配伍对高糖高脂环境下人肾小球系膜细胞 PPAR- γmRNA及蛋白表达影响,探讨益气解毒活络中药有效成分防治糖尿病肾病的可能机制。方法 :体外培养人肾小球系膜细胞株 (GMC),分为正常对照组,高糖高脂模型组、中药组 (第 1组、第 2组、第 3组 ), qRT- PCR法检测各组 24、 48hPPAR- γmRNA的表达, WesternBlot法检测各组 24、 48hPPAR- γ蛋白活性的表达。结果 :(1)各组 24、 48hPPAR- γmRNA表达比较 :24h:与正常组比较模型组及中药配伍组均有显著差异 (P< 0.01),与模型组比较各中药配伍组 PPAR- γmRNA表达均明显上升,且有显著差异 (P< 0.01),各中药配伍组组间比较发现第 1组 PPAR- γmRNA表达最高 (P< 0.01)。 48h:与正常组比较除去第 1组未见明显差异 (P> 0.05),模型组及其余各用药组均有显著差异 (P< 0.01);与模型组比较各中药配伍组 PPAR- γmRNA表达均明显上升,且有显著差异 (P< 0.01);各中药配伍组组间比较发现第 1组 PPAR- γmRNA表达最高 (P< 0.01)。正常组 24、 48h两时间点 PPAR- γmRNA表达未见显著差异 (P> 0.05),模型组及第 1、 2、 3组 48hPPAR- γmRNA表达显著高于 24hPPAR- γmRNA表达 (P< 0.01)。 (2)各组 24、 48hPPAR- γ蛋白表达比较 :GMC细胞 24hPPAR- γ蛋白表达比较 :模型对照组 PPAR- γ蛋白低表达,各中药配伍组均能够调高 PPAR- γ的表达,各中药配伍组组间比较发现第 1组调高 PPAR- γ作用最显著。 GMC细胞 48hPPAR- γ蛋白表达比较 :模型对照组 PPAR- γ蛋白低表达,各中药配伍组均能够调高 PPAR- γ的表达,各中药配伍组组间比较发现第 1组调高 PPAR- γ作用最显著。结论 :益气解毒活络中药有效成分可能是通过上调 PPAR- γ表达水平的作用来保护受损的 GMC,从而起到减缓糖尿病肾病病程进展,保护受损肾脏的作用。