简介：目的：构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒并检测其在人胚胎肾293T细胞中的表达。方法：应用RT-PCR方法从大鼠肾脏组织总RNA中扩增出编码Uqcrfs1的cDNA,克隆至pUM-T载体并测序,然后亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,酶切鉴定及测序正确后以磷酸钙共沉淀法瞬时转染HEK293T细胞,使用RT-PCR、WesternBlot方法检测重组质粒在转录及蛋白水平的表达。结果：测序结果证实PCR扩增得到编码Uqcrfs1的cDNA序列正确;磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞后,在基因转录与蛋白表达水平,结果达到预期。结论：成功构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒,该重组质粒可在HEK293T中过表达。

简介：男性不育的评估和手术治疗领域经过数次演变和扩展后，目前已经有了更精确的诊断和适应个人的治疗方法，死亡率逐渐降低，成功率逐渐提高．男性不育手术目前被分为四个主要的大类：1）诊断手术；2）改善精子生成的手术；3）提高精子运输的手术；4）提取精子用于IVF—ICSI的手术．尽管现在的男性不育治疗效果比以前有了显著的提高，但还是有些达不到妊娠的要求，这可能是由一些我们还不知道的因素造成的。医生在治疗不育时应提倡“夫妻双方共同治疗”的准则，要求在实施具体的治疗方案之前，夫妻双方都进行彻底的评估，并进行广泛讨论决定方案。

简介：多年来，男性不育的治疗和管理一直是以经验为基础的，而不是证据。尽管不是循证的，但是人类辅助生殖技术还是一直被广泛地运用于临床实践中。如果没有其它具体明确的治疗方法或者治疗失败了，那么辅助生殖技术就成为普遍的辅助治疗手段。根据一些有限的证据，一对女性生育力正常的夫妇，如果男方的前进性精子活力至少能够恢复到1×106的话，那么宫内人工授精就被视作最佳治疗方案。然而，如果3到6个周期的宫内人工授精后女方仍未怀孕，那么应该采取优化的体外受精技术。如果通过精液处理抑或从睾丸和附睾中手术获取精子后，前进性精子活力仍不足0．5×106的话，应该采用卵胞浆内单精子注射技术。尽管已仔细地研究了当前的辅助生殖技术疗效，但是在采用卵胞浆内单精子注射技术以来，大型的“宏观问题”还从未被研究过。而且，在接受体外受精技术或者卯胞浆内单精子注射技术之前，待受精者应该通过严格的筛选，而且他们应该被清楚地告知我们在男性不育的遗传性以及辅助生殖技术的安全性方面的知识的局限所在。