简介:AIM:Todeterminetheproliferativepotentialandthemaintenanceofstemcellactivityinstoredhumanlimbaltissues,andcorrelatethiswiththepreservationtime,cellviabilityandtheexpressionofstemcellmarkers.METHODS:Thirtylimbalrimsweresplitinto4partsandstoredincornealpreservationmediumat4℃for0,1,4,or7days.ThelimbalstemcellandmitoticmarkersP63,CK19,proliferatingcellnuclearantigen(PCNA),andKi67weredeterminedbyimmunohistochemicalstaining.Theproliferativepotentialoflimbalepithelialcellswasassessedbycellviability,theabilityofgeneratingstratifiedepithelium,andcolonyformingassay.RESULTS:Thestoredtissuesmaintainedlimbalstratifiedstructureto7daysandexhibitedcomparableexpressionlevelofstemcellandmitoticmarkers.Theproportionofviablecellsdecreasedwiththeprolongedpreservationtime,whilecolonyformingefficiencydecreasedfromthe1stdayanddisappearedatthe4thday.Wheninoculatedonamnioticmembrane,thecellspreservedfor1dayformedastratifiedepithelium,whilethecellsfrom4days’preservationformedadiscontinuouslayer.CONCLUSION:Thecolonyformingefficiencyoflimbalepithelialstem/progenitorcellsdecreasedrapidlywiththeincreasingpreservationtime,whiletheexpressionlevelofmarkersandcapacityofformingepithelialmonolayeronamnioticmembranedecreasedgradually.Thelimbalepithelialstemcellslosttheirfunctionearlierthanthelostexpressionlevelofstemcellmarkers.Thismayhelpustobetterchoosetheappropriatepreservationgraftsforfuturelimbalstemcelltransplantation.
简介:·AIM:Toinvestigatechangesinimmunogenicityofcryopreservedlimbalstemcells.·METHODS:Cryopreservedlimbalstemcells,freshprimarylimbalstemcellsandblankcontrolswereinoculatedsubcutaneouslyinC57BL-6miceandthepercentageofCD25cellsinlimbalexplantswasdeterminedbyflowcytometryatday21postinoculation.Morphologicalstudieswereperformedbylightandelectronmicroscopyoflimbalexplantsections.·RESULTS:Thenumberofregionalandsystemiclymphocytesderivedfromcryopreservedlimbalstemcellswaslowerthanthatfromfreshprimarylimbalstemcells.·CONCLUSION:Lymphocytesderivedfromcryopreservedlimbalstemcellsshowedchangesinimmunogenicity,butthesignificanceisunknown.Thecryopreservationandthawingmethodsawaitfurtherstudy.·
简介:目的:观察角膜缘干细胞培养液对血管内皮细胞增殖的影响。方法:分别培养角膜缘干细胞及球结膜上皮细胞,并通过免疫组化检测AE-5蛋白鉴别角膜缘干细胞。搜集两组培养细胞的上清液加入培养的人脐静脉血管内皮细胞中,并设立对照组。培养24h后通过MTT法检测细胞增殖情况并进行统计学分析。结果:角膜缘干细胞AE-5染色呈阴性,而球结膜上皮细胞为阳性。加入角膜缘干细球结膜上皮细胞和对照组培养液的血管内皮细胞MTT值分别为2.097±0.079,1.981±0.034和1.990±0.044。三组间有显著性差异(F=9.169,P=0.000)。加入角膜缘干细胞培养上清液的血管内皮细胞增殖活性明显高于其他两组(P=0.005和P=0.007)。结论:角膜缘干细胞培养液能够促进血管内皮细胞的增殖,这可能是角膜缘干细胞的特征。本研究从功能学角度为角膜缘干细胞理论提供更多的依据。
简介:目的观察和分析自体角膜缘干细胞移植术治疗翼状胬肉的临床效果.方法对58例65眼翼状胬肉患者进行翼状胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植术治疗,观察手术后炎症反应和翼状胬肉复发情况.结果对翼状胬肉切除联合角膜缘干细胞移植术后58例65眼病例观察和随访3-12个月,63眼无复发,治愈率96.92%,2眼复发,复发率3.08%.结论翼状胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植术式取材方便、操作简单,手术后没有排斥反应,可以重建和修复角膜缘上皮组织,增加角膜缘干细胞数量和功能,起到重建和修复眼表完整性的作用,阻滞结膜上皮纤维组织异常增生和新生血管生长,达到了治愈翼状胬肉,减少复发的良好效果.
简介:目的评估角膜缘干细胞移植在治疗翼状胬肉及防止胬肉复发的疗效.方法对57例68只眼初发和复发胬肉进行治疗,随机分成2组进行病例对照研究,其中一组行胬肉单纯切除27例33眼,另一组行胬肉切除联合自体角膜缘组30例35眼.观察术后并发症及复发情况.采用x2检验进行统计学分析.结果术后随访6-24个月,平均随访14个月.失访6例7只眼(其中单纯胬肉切除组3眼,联合自体角膜缘干细胞移植组4只眼).在随访眼中,单纯胬肉切除组30眼中11眼复发,复发率36.7%,其中复发胬肉7眼4眼复发,复发率57.1%.联合自体角膜缘干细胞移植组31眼中3眼复发,复发率9.7%,其中复发胬肉11眼2眼复发,复发率18.2%,两组复发率差异有统计学意义(x2=6.386,P<0.05).术后并发症联合自体角膜缘干细胞移植组与单纯胬肉切除组相比,术后角膜上皮愈合更快,术后刺激症状明显减轻.结论采用自体角膜缘干细胞移植治疗胬肉,术后恢复快、刺激症状轻,而且能有效地防止胬肉切除后复发.联合自体角膜缘干细胞移植治疗翼状胬肉值得临床推广应用.
简介:目的:观察自体干细胞移植术后糖尿病视网膜病变变化情况。方法:自体干细胞移植术后糖尿病患者58例116眼经直接或间接检眼镜及眼底荧光血管造影(FFA)确定为无糖尿病视网膜病变者18眼,轻度非增殖期糖尿病视网膜病变(轻度NPDR)41眼,中度非增殖期糖尿病视网膜病变(中度NPDR)51眼,重度非增殖期糖尿病视网膜病变(重度NPDR)6眼,随访6~12mo,观察视网膜病变变化情况。结果:患者视力、视网膜病变治疗的总有效率为84.4%、76.7%,其中重度非增殖期糖尿病视网膜病变组视力及视网膜病变治疗的有效率均显著低于轻、中度非增殖期糖尿病视网膜病变组及无视网膜病变组,差异有显著统计学意义(P〈0.05)。结论:自体干细胞移植术后稳定的血糖水平及胰岛功能的改善可能有助于稳定或延缓视网膜病变进展,其长期效果有待进一步深入研究。
简介:目的探讨翼状胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植治疗复发性翼状胬肉的护理要点。方法回顾性分析总结我科对收治的25例(31眼)复发性翼状胬肉患者采用显微手术行翼状胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植术,术前、术中、术后与患者充分交流沟通并给予及时有效的护理措施。结果患者术后有轻度刺激症状,如异物感不适、流泪、轻度疼痛可忍受,仅有2例患者疼痛难忍,口服止痛药后缓解。全部病例随访6个月~2年,平均15个月。30眼痊愈,1眼术后8个月再复发,未出现植片移位、脱落,角膜感染等并发症,治愈率97%。结论翼状胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植治疗复发性翼状胬肉,配合恰当有效的围术期护理,可有效减少并发症,减低再复发率,是手术成功、患者康复的重要保证。
简介:目的:观察翼状胬肉切除联合角膜缘干细胞移植及术后药物治疗翼状胬肉的临床疗效。方法:共行翼状胬肉切除联合角膜缘干细胞移植术治疗的翼状胬肉患者760例980眼。选取亚复发期的162例162眼进行观察,随机分为A,B两组,A组滴1g/L丝裂霉素C+诺氟沙星滴眼液1~3mo;B组交替滴地塞米松滴眼液、双氯芬酸钠滴眼液1~3mo。结果:A组痊愈67眼(81.7%),亚复发12眼(14.6%),复发3眼(3.7%)。B组痊愈35眼(43.8%),亚复发29眼(36.3%),复发16眼(20.0%)。A组复发率明显低于B组(P〈0.01)。结论:翼状胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植术,无排斥反应、安全有效、术后复发率低,术后给予滴眼液后续治疗尤为重要,更能有效地抑制和降低翼状胬肉术后的复发率,能明显提高治疗效果。
简介:目的比较自体角膜缘干细胞移植与单纯球结膜瓣移植治疗翼状胬肉的疗效.方法对125例(133眼)患者随机行翼状胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植63例(67眼)或翼状胬肉切除联合单纯球结膜瓣移植62例(66眼)治疗翼状胬肉,随访8-12月,观察手术效果.结果自体角膜缘干细胞移植组有4眼复发,复发率5.97%,单纯球结膜瓣移植组有5眼复发,复发率7.57%,两组相比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论自体角膜缘干细胞移植与单纯球结膜瓣移植均能有效的治疗翼状胬肉,复发率相差不明显,但自体角膜缘干细胞移植组患者术后相对角膜上皮修复时间短,恢复快,异物感轻.
简介:目的探讨榄香烯对人喉癌Hep-2细胞生长的影响和作用机制.方法用四甲基偶氮唑盐法(methylthiazolyltetrazoliumassay,MTT)测定榄香烯对喉癌细胞的抑制作用;以透射电镜来观察其形态学变化;采用DNA末端标记法(terminaldeoxynucleotidy1transferasemediateddeoxyuridinetriphosphatenickendlabelingmethod,TUNEL)研究细胞凋亡数;用免疫组化分析bcl-2蛋白在Hep-2细胞中的表达.结果榄香烯明显抑制Hep-2细胞的生长;透射电镜观察到染色质浓缩,沿着核膜排列,形成不同形状和大小的块状;DNA末端标记法说明,凋亡细胞数随药物浓度的提高逐渐增高;免疫组化结果提示榄香烯能使Hep-2细胞bcl-2蛋白表达降低.结论榄香烯能够抑制喉癌细胞的生长,其抑制作用与细胞凋亡有关,作用机制可能与bcl-2表达降低有关.
简介:目的:探讨老年翼状胬肉切除与自体角膜缘干细胞移植术后硬性角膜接触镜的干预效果。方法:选取2015-03/2016-03经我院诊断为单侧翼胬肉老年患者90例90眼进行分组对比研究。观察组45例45眼采用自体角膜缘干细跑移植术后硬性角膜接触镜,对照组45例45眼行单纯自体角膜缘干细胞移植术。两组患者观察指标包括:角膜愈合时间和术后1、3、5、7d时两组患者疼痛程度(VAS评分)、胬肉复发几率。结果:观察组和对照组的角膜刺激症状评分存在统计学差异,观察组评分显著低于对照组患者(P〈0.05)。对照组患者角膜愈合时间高于观察组患者,差异具有统计学意义(P〈0.05);VAS评分显示,术后1、2d时对照组患者高于观察组,两组比较差异具有统计学意义(P〈0.05);两组患者胬肉愈合复发几率对比,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:自体角膜干细胞移植术后结合硬性角膜接触镜对老年翼状胬肉效果明显,患者愈合较快,还可减轻患者术后疼痛感,同时不会增加胬肉复发率。
简介:目的:探讨miR-181在白内障晶状体组织中的表达情况,及其对人晶状体上皮细胞凋亡的调控机制。方法:利用Realtimeq-PCR方法,检测年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜和人晶状体上皮细胞凋亡模型中miR-181的表达情况;利用Lipofectamine2000瞬时转染miR-181mimic和inhibitor调节人晶状体上皮细胞中miR-181的表达,利用Realtimeq-PCR方法验证转染效率,利用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化。结果:与对照组相比,年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜组和人晶状体上皮细胞凋亡模型组,miR-181的表达显著升高;miR-181mimic转染组,miR-181的表达显著升高,细胞凋亡率显著升高;miR-181inhibitor转染组,miR-181的表达显著降低,细胞凋亡率显著降低,差异均有统计学意义(P〈0.01)。结论:miR-181在年龄相关性白内障晶状体组织中呈高表达,miR-181能够促进人晶状体上皮细胞凋亡,从而可能在年龄相关性白内障的发病过程中发挥一定作用,miR-181可能成为白内障非手术治疗的一种新途径,但具体机制有待进一步研究。