简介:在仙客来"紫色火焰"的体细胞胚胎发生方面,相对于愈伤组织培养,悬浮培养既能减少保持培养所需的劳动力,又能为培养物提供快速的生长条件,因而具很大的优势。当悬浮系转移到生物发生器上时,胚胎的生长和分化都能得到控制,从而使自动化培养成为可能。无论是来自于同一植物的未受粉胚珠体细胞的非胚胎发生还是胚胎发生的愈伤组织,都用来作为长期悬浮培养的接种物,悬浮系可稳定地在此条件下生长一年以上。影响悬浮培养的关键因素有:初始培养密度、愈伤组织的发育阶段,继代次数及继代时稀释的倍数等。胚胎发生和非胚胎发生的悬浮培养生长曲线已从该实验获得。第一次试验中两种悬浮系在生物发生器中都成功地产生了胚细胞,将200-500um悬浮液涂在无激素的培养基上后,可观察到高频率的球形体细胞胚出现在培养基上,同时,这些胚可大量培养成为正常的植株,因为在由愈伤组织和悬浮培养获得的体细胞胚上,可观察到大量的根产生,现在,11个悬浮培养系可培养出大约9万个植株,这也仅仅是发挥了胚胎发生悬浮培养潜能的很小一部分。
简介:摘要目的研究胚胎停止发育(embryonicarrest,简称胚停)孕妇外周血中T淋巴细胞亚群的变化。方法选取60例胚停孕妇和40例健康孕妇,分别作为研究组和对照组。采用间接免疫荧光法对两组孕妇外周血中T淋巴细胞亚群水平进行检查,统计两组孕妇妊娠2周、4周、6周CD3、CD4、CD8、CD4/CD8结果,比较组间差异。结果妊娠6周以内,CD3和CD4组内和组间比较均无明显差异,P>0.05。2周时,CD8和CD4/CD8组间比较无明显差异;4周和6周时,研究组CD8显著低于对照组,CD4/CD8明显高于对照组,组间比较差异显著,P<0.05。结论胚停孕妇妊娠约6周以内CD3、CD4基本无明显变化,但CD8数量增加,CD4/CD8升高,可能与胚停发病有一定联系。
简介:摘要目的比较不同胚胎培养试剂对胚胎发育时间动力学参数、胚胎发育潜能及临床妊娠结局影响。方法回顾性分析2016年9月至2018年5月期间于郑州大学第一附属医院生殖医学中心行体外受精/卵胞质内单精子注射(IVF/ICSI)助孕患者资料,按照胚胎培养试剂不同,分为Vitrolife组和Cook组,比较符合入选标准的470个新鲜移植周期患者的胚胎时间动力学参数、胚胎发育潜能及临床妊娠结局。结果与Cook组比较,Vitrolife组原核出现时间、消失时间、发育到3-细胞和8-细胞时间更快[tPNa:(7.12±2.71) h比(7.40±2.61) h,tPNf:(23.83±4.33) h比(24.21±4.74) h,t3:(35.75±6.03) h比(36.64±6.16)h,t4:(38.30±6.25)h比(38.92±6.06)h, t5:(47.59±7.85)h比(49.01±7.86)h, t6:(50.77±7.17) h比(52.12±6.99) h,t7:(53.05±6.31) h比(54.33±6.37) h,t8:(55.35±6.89) h比(56.31±6.41) h],差异均有统计学意义(P均<0.05);细胞周期s2差异无统计学意义,在细胞周期同步性比较中,cc2 [(9.71±4.60) h比(10.33±4.28) h]差异有统计学意义,Cook组具有更长的细胞周期,细胞发育时间间隔t5-t4 [(10.60±5.65) h比(11.20±5.90) h]、t8-t4 [(18.45±5.76) h比(19.28±5.18) h],差异均有统计学意义(P均<0.05),然而t2、t4-t2差异无统计学意义。两种胚胎培养试剂胚胎发育潜能比较显示,Cook组胚胎利用率(59.9%)、第3日(D3)优质胚胎率(65.4%)高于Vitrolife组(63.9%,P=0.017;69.5%,P=0.011);两组种植率、胚胎种植率、囊胚种植率、受精率、卵裂率差异均无统计学意义(P均>0.05);临床妊娠率、持续妊娠率、流产率、分娩率、活产率、胎儿畸形率、活产男女比例、胚胎妊娠率、囊胚妊娠率组间比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论各中心应根据本中心的实际情况,摸索出适合本中心的胚胎培养试剂的胚胎时间动力学参数,制定符合最佳胚胎培养试剂选择标准,提高本中心患者临床妊娠率及活产率。
简介:采用活体观察和固定观察两种方法,系统观察和详述了黑斑狗鱼Esoxreichrti的胚胎发育过程及各时期的特点。结果表明:黑斑狗鱼成熟卵为圆球形,呈淡黄色,略透明,沉粘性,卵膜较薄,略有弹性,卵径为2.49±0.09mm;在水温6~10℃下,受精卵历经529h孵出,整个发育期间所需的积温为4511.5℃·h,约合188℃·d。黑斑狗鱼胚胎发育过程可分为6个阶段,即受精卵、卵裂、囊胚、原肠胚、神经胚,和器官形成阶段,各阶段发育所需积温分别为60.5℃·h、125℃·h、572℃·h、180℃·h、477℃·h,和3097℃·h。在胚胎期间,许多器官分化形成,至孵出时,胚胎已具有较完善的内部器官,各鳍亦已形成。
简介:摘要目的初步探讨体外受精(in vitro fertilization,IVF)治疗中影响嵌合体胚胎发生的相关因素。方法采用病例对照研究回顾性分析了郑州大学第三附属医院生殖医学中心2017年1月至2020年12月期间的579个胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing,PGT)周期的2252个囊胚移植患者的临床资料。使用二代测序(next generation sequencing,NGS)技术进行活检细胞的分析,根据分析结果将所有的胚胎分为嵌合体组及非嵌合体组。嵌合类型包括整倍体-非整倍体嵌合,非整倍体-非整倍体嵌合和复杂嵌合。比较两组胚胎来源的人群特征及实验室相关参数,对嵌合体发生率做单因素及多因素分析以评价影响嵌合体胚胎发生的相关因素。结果905个胚胎为整倍体(40.2%),923个为非整倍体(41.0%),424个为嵌合体(18.8%)。共有228个胚胎为整倍体-非整倍体嵌合(10.1%),59个(2.6%)为非整倍体-非整倍体嵌合,137个(6.1%)为复杂嵌合。共有4个遗传检测机构进行NGS技术的测序,嵌合体率波动在7.6%~26.2%。调整男女方年龄、男方精子质量、促排卵方案、试剂类型、PGT的适应证、不同的活检操作者及囊胚发育时期后显示,囊胚滋养外胚层细胞评分(C级比A级,P=0.014)及遗传检测机构(机构2比机构1前期,P<0.001;机构1后期比机构1前期,P<0.001)对嵌合体的发生有显著影响。与滋养层细胞(trophectoderm,TE)评分为A级相比,C级发生嵌合体的概率升高66%(aOR=1.66,95% CI=1.11~2.50,P=0.014),与机构1前期相比,机构2的嵌合体发生率是前者的2.28倍(aOR=2.28,95% CI=1.71~3.04,P<0.001),机构1后期是机构1前期的2.17倍(aOR=2.17,95% CI=1.41~3.34,P<0.001)。结论IVF技术中的嵌合体胚胎的发生率与NGS检测机构及滋养外胚层细胞质量相关。
简介:目的探讨胚胎干细胞(embryonicstemcell,ESC)来源的神经前体细胞(Neuralprecursorcell)移植治疗帕金森病的可能性。方法将胚胎干细胞诱导分化到神经前体细胞阶段后移植到大鼠帕金森病模型纹状体中,并设生理盐水组做对照研究,观察两组移植后行为学改变及检查纹状体内DA、DOPAC的含量。结果移植组在2~4周后与对照组相比行为学上有明显改善(P〈0.01),纹状体内DA、DOPAC的含量显著提高(P〈0.01)。结论胚胎干细胞经诱导分化成神经前体细胞可用于帕金森病的修复治疗,胚胎干细胞是良好的干细胞移植治疗用细胞来源。
简介:目的:细胞极性是肾小管上皮细胞发挥生理功能的结构基础。本研究的目的是明确成体大鼠肾小管坏死后修复过程中与胚胎大鼠肾小管发育过程中细胞极性形成过程的一致性。方法:通过皮下注射硫酸庆大霉素制作出生后8周雄性Wistar大鼠急性肾小管坏死后自然修复的动物模型,分别在注射庆大霉素后第7天(用药5d,停药2d)、第14天和第28天采集肾脏标本;另外采集妊娠20d大鼠的胚胎肾脏标本。观察成体大鼠肾小管坏死后修复再生过程中与胚胎大鼠肾小管发育过程中肾小管的形态学变化;以Na^+-K^+-ATP酶作为细胞极性的标志物,采用免疫荧光染色技术对比观察成体大鼠肾小管坏死后修复再生过程中与胚胎大鼠肾小管发育过程中细胞极性形成的过程。结果:(1)成体大鼠注射庆大霉素后第7天,肾小管上皮细胞坏死、脱落,肾小管基底膜裸露,管腔内有大量脱落的上皮细胞碎片;第14天,肾小管基底膜出现新再生的肾小管上皮细胞;第28天,大多数肾小管结构基本恢复正常。(2)成体大鼠注射庆大霉素后第7天,裸露的肾小管基底膜没有Na^+-K^+-ATP酶的表达;第14天,新再生的肾小管上皮细胞有Na^+-K^+-ATP酶的表达,但此时Na^+-K^+-ATP酶没有明显的极性分布,胞膜和胞浆均有表达;第28天,Na^+-K^+-ATP酶呈极性分布,主要表达在肾小管上皮细胞的侧基底膜。(3)胚胎大鼠肾小管发育过程是从S形体发育成为不成熟的肾小管,再发育成为成熟的肾小管。(4)胚胎大鼠肾小管发育过程中,Na^+-K^+-ATP酶的表达从没有极性到有极性分布,即Na^+-K^+-ATP酶从肾小管上皮细胞的胞膜和胞浆均有表达到只局限在侧基底膜表达。结论:成体大鼠肾小管坏死后修复过程中细胞极性形成的过程与胚胎大鼠肾小管发育过程中细胞极性形成的过程是一致的,提示大鼠肾小管坏死后修复再
简介:摘要 目的:探讨受精早期脱颗粒细胞对胚胎发育的影响。方法:回顾性分析2015年1月至2021年5月在本中心行体外受精并进行早期脱颗粒细胞助孕的患者311例,将同一患者的卵母细胞分成早期脱颗粒细胞组和过夜受精组,比较两组的受精及胚胎发育结局。其中,早期脱颗粒细胞组共2889枚卵母细胞,过夜受精组共3220枚卵母细胞。结果:早脱颗粒细胞组的多精受精率、0PN率、空透明带出现率显著高于过夜受精组(10.35% VS 8.85%;3.63 %VS 2.54%;1.1% VS 0.56%),但2PN率和1PN率差异不显著;两组的卵裂期发育各项指标无显著性差异;过夜受精组在D5可用囊胚率上显著高于早脱颗粒细胞组(24.96% VS 20.84%),D6优质囊胚率则显著低于早脱颗粒细胞组(4.66% VS6.47%),两者的D5优质囊胚率和D6可用囊胚率差异不显著。结论:受精早期脱颗粒细胞在受精结局及胚胎发育中并未体现优势。因此,不宜将患者全部卵母细胞行受精早期脱颗粒。
简介:摘要:为了实现蛇鮈的资源保护与增殖,2022年3~5月进行了蛇鮈的人工繁殖试验,探索了蛇鮈的繁殖时期、人工繁殖、胚胎发育等关键技术,结果显示催产蛇鮈亲鱼三批,共获得1.24万粒受精卵,获得5516尾鱼苗。其中第一批的受精率较低,只有22%。第三批的受精率和出苗率都比较低分别为3%和38%。采用第一针: LHRH-A3 2 μg/kg(或不注射)第二针:LHRH-A3 10 μg/kg + HCG 1200 IU/kg + PG 8 mg/kg 能有效促进蛇鮈产卵。受精卵在水温 17~19 ℃条件下孵化78 h 38 min后出膜,出膜仔鱼全长4.42± 0. 26 mm,这个过程可划分为受精卵、胚盘隆起期、卵裂期、囊胚期、原肠胚期、神经胚期、器官发生期和出膜期等8个连续的阶段和25个时期。
简介:摘要目的探讨年龄、体质指数(BMI)对胚胎发育时间动力学参数、胚胎发育潜能及临床妊娠结局的影响。方法回顾性分析2016年9月至2018年11月在郑州大学第一附属医院生殖医学中心行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的832例患者共6 294枚胚胎的资料,根据年龄分为2组:<35岁组(655例、5 076枚胚胎)、≥35岁组(177例、1 218枚胚胎);根据BMI分为3组:低体重组(BMI<18.5 kg/m2,47例、355枚胚胎)、正常体重组(18.5~23.9 kg/m2,517例、3 813枚胚胎)、超重组(BMI>23.9 kg/m2,268例、2 126枚胚胎),比较各组胚胎发育时间动力学参数、胚胎发育潜能及临床妊娠结局。结果<35岁组患者的胚胎发育到3个细胞、4个细胞速度更快;两个年龄组患者囊胚形成率、优质囊胚形成率、妊娠率、种植率、分娩率、活产率、流产率差异均有统计学意义(均P<0.05)。低体重组、正常体重组、超重组患者的正常受精率、卵裂率、胚胎利用率、优质胚胎率、妊娠率、种植率、流产率、分娩率、活产率等差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论年龄对部分胚胎发育时间动力学参数有影响,而BMI对其影响较小。
简介:摘要目的探查TORCH感染与胚胎停止发育的关系。方法收集38例胚胎停止发育的稽留流产妇女(实验组)和38例正常早孕人工流产妇女(对照组)静脉血3ML进行TORCH的检测,比较两组妇女TORCH检测的阳性率,观察TORCH与胚胎停止发育次数之间的相关性。结果①实验组TORCH感染阳性26例,阳性率达68.4%,其中弓形虫感染15例,风疹病毒感染10例,巨细胞病毒感染10例,单纯疱疹病毒感染8例。对照组TORCH感染阳性率26.3%,其中弓形虫感染9例,风疹病毒感染5例,巨细胞病毒感染4例,单纯疱疹病毒感染2例。对照组TORCH感染10例,阳性率达26.3%。两组阳性率比较差异显著(P<0.05)。②TORCH感染与胚胎停止发育次数之间无正相关关系(P>0.05)。结论TORCH感染与胚胎停止发育有关,是导致胚胎停止发育的原因之一。
简介:摘要目的分析隐性梅毒患者进行ART治疗时获卵情况以及胚胎发育情况,为其知情选择提供帮助。方法回顾分析2015年6月到2017年10月在我中心进行ART治疗的女方隐性梅毒患者和非梅毒患者两组,比较其获卵情况、受精情况以及胚胎发育情况。结果女方隐性梅毒组,获卵数为13.87±6.24,获卵率为92.35%,显著低于非梅毒组(14±9.09;96.11%)P<0.05,具有统计学差异。然而两组的卵子成熟率、2PN率、卵裂率、2PN卵裂率和可利用胚胎数均没有显著差(90.17%vs.90.51%)P>0.05;(64.29%vs.70.07%)P>0.05;(89.85%vs.91.67%)P>0.05;(99.65%vs.99.24%)P>0.05;(5.73±3.85vs.5.9±3.24)P>0.05。结论隐性梅毒患者在进行ART治疗时,虽然获卵数和获卵率低,但是卵子成熟率、2PN率、卵裂率、2PN卵裂率和可利用胚胎数与非梅毒患者无显著差异,不影响ART治疗结局,在ART咨询告知时减少患者的心理压力。