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  • 简介:目的:建立并改良磁珠提取基因DNA的方法,以应用于HLA常规测序分型。方法:使用磁珠自动提取系统从全血中提取基因组DNA,利用DNA定量仪测定DNA浓度与纯度,利用测序仪对PCR扩增产物进行测序及相关的分析软件进行HLA分型结果分析。比较改良前后DNA浓度与纯度、HLA分型结果成功率、信噪比及测序胶图的反应格局。结果:改良后96份DNA浓度的均一性、纯度均优于改良前;32份HLA分型结果中HLA-A、B位点成功率改良后高于改良前,差异有统计学意义(P〈0.01);改良后32人份HLA-B第二外显子信噪比(N/S)合格率均高于改良前,差异有统计学意义(P〈0.01);改良后32份分型胶图反应格局均优于改良前。结论:改良磁珠提取DNA能稳定、可靠地应用于HLA测序分型,具有快速、高通量化的特点和广泛的应用前景。

  • 标签: 脱氧核糖核酸 标本 基因分型 测序分型
  • 简介:手术中或急救病人时经常需要使用12~16号粗针为病人进行静脉穿刺,以输入粘稠度较高的血液,保证病人充足的循环血量。因此,快速成功的静脉穿刺是手术顺利进行的基本保证。但临床上若遇到老年人或长期经静脉给药治疗的病人,其血管弹性较差或脆性增加,

  • 标签: 静脉穿刺 改良法
  • 简介:目的通过白色念珠菌改良热酸性酚RNA提取方法与玻璃珠、超声破碎和液氮研磨的比较,确定一种有效提取白色念珠菌早期生物膜RNA的方法。方法将培养3h和6h白色念珠菌生物膜分为2组,每组分别采用热酸性酚、玻璃珠、超声破碎和液氮研磨提取酵母相白色念珠菌的RNA,用分光光度计及甲醛变性凝胶电泳检测RNA的浓度、纯度以及完整性。结果1~8号样本RNA总量依次为:9.96、12.72、2.88、4.56、2.76、4.92、7.32、10.68μg。结论热酸性酚提取白色念珠菌早期生物膜RNA的理想方法。

  • 标签: 生物膜 白色念珠菌 RNA提取
  • 简介:用修改了的异硫氰酸胍从两种森林昆虫Closteraanastomosis和Saperdapopulnea的不同组织中快速提取RNA.电泳检测和cDNA合成分析结果表明,RNA未降解.经紫外分光光度计检测,A260/A280在1.8到2.0之间,表明RNA的纯度很高.用RT-PCR合成的双链cDNA的长度大于2kb,表明mRNA的完整性.用PCR的方法克隆了C.anastomosisβ肌动蛋白和几丁质酶的基因片段,表明RNA可用于其它分子操作.使用这个方法,在4个小时内可至少从8个样品中提取RNA并进行电泳分析.这些结果表明用这个修改后的一步提取昆虫RNA是省时,省钱和有效的.

  • 标签: RNA提取 β肌动蛋白基因 分月扇舟蛾 青杨天牛
  • 简介:作为一个模式植物,烟草在植物分子生物学研究中发挥着重要的作用。RNA提取质量,对于基因表达、基因克隆、cDNA文库建立、RNA原位杂交以及转基因材料鉴定等分子生物学基础研究至关重要。尤其在进行基因克隆及cDNA文库时,只有高质量的RNA,才能保证cDNA第一链合成的完整性。由于烟草中糖类、蛋白质及次生代谢物的含量较高,因此,在应用TRIzolRNA提取试剂盒进行烟草RNA提取时,所提取RNA产物中的蛋白质及多糖等杂质含量偏高。因此,针对这一问题,我们对TRIzol进行了改进,并获得了高质量的烟草RNA。经琼脂糖电泳检测,利用该方法提取的烟草RNA,条带清晰、无拖尾现象,28S与18S的比例约为2:1。紫外吸收值的测定表明,所提取的烟草RNA的A260/A280的值基本达到了1.9以上,说明所提取RNA的质量较高,可广泛应用于基因的克隆及基因的表达研究。

  • 标签: 烟草 RNA 提取方法
  • 简介:目的:建立从红花组织中快速分离RNA的方法,为进行反转录PCR(RT—PCR)、快速扩增cDNA末端(RACE)、蛋白质印迹及其他分子生物学实验奠定基础。方法:采用改良Trizol提取红花苞叶RNA时,加入DNaseⅠ消化残留DNA,并加入RNase抑制剂,利用琼脂糖凝胶电泳及紫外分光光度进行纯度和浓度检测。RT—PCR后,进行cDNA-序列相关扩增多态性(SRAP)分析。结果:抽提的RNA经电泳检测,可见28S、18S、5SRNA三条带,带的亮度强,且28S的宽度是18S的2倍左右。紫外吸光度D260/D280为1.8~2.0,D260/D230为2.0~2.3。RNA产物进行cDNA-SRAP扩增,出现清晰的条带。结论:改良Trizol提取RNA纯度高,质量好,完整性好,可成功进行cDNA-SRAP扩增。

  • 标签: 红花 RNA 提取法 TRIZOL法 逆转录聚合酶链反应
  • 简介:检测胰腺组织mRNA的表达已经成为研究胰腺疾病的重要手段,但由于胰腺组织富含RNase,抽提胰腺RNA是分子生物学实验的难点之一。为此,本实验旨在探讨提取胰腺RNA的理想方法。

  • 标签: 胰腺组织 总RNA 提取 分子生物学实验 大鼠 RNASE
  • 简介:目的:通过对TRIzol一步进行改进,建立一种从富含胶原蛋白、多糖及色素的仿刺参体壁提取RNA的有效方法。方法:样品在液氮中研磨并用TRIzol匀浆后再进行抽提;对TRIzol一步提取RNA进行DNaseⅠ消化和酚氯仿抽提,用2.5mol/L的醋酸钾沉淀,并加入适量糖原(10mg/mL)与RNA共沉淀。结果:琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度以及RT-PCR检测结果表明,改进的方法能够有效去除基因组DNA、蛋白、多糖及色素的污染,RNA的产率提高。结论:制备的RNA纯度高,完整性好,能够满足mRNA差异显示RT-PCR等分子生物学研究的要求,是一种提取仿刺参体壁及其他富含黏多糖、胶原蛋白和色素的动物组织RNA的有效方法。

  • 标签: 仿刺参 体壁 总RNA提取
  • 简介:摘要目的探讨应用改良对口腔颌面手术切口进行冲洗的临床效果。方法选取我处于2016年11月~2017年11月期间收治的80例颌面手术患者作为研究对象,随机将收治的80例患者分为对照组与观察组两组,对照组40例患者术后采用传统口腔涂擦,观察组40例患者术后采用改良进行口腔冲洗,对比观察两组患者的效果。结果观察组患者术后7d后的创口愈合率95.0%高于对照组77.5%(P<0.05),观察组的口腔炎发生率7.5%与口腔溃疡发生率2.5%均低于对照组25.0%与20.0%(P<0.05),两组间数据比较均存在统计学意义。结论口腔冲洗改良操作简单、对于医务人员的操作要求较低,可在临床普及推广。

  • 标签: 口腔冲洗 改良法 口腔颌面手术 观察
  • 简介:【摘要】目的:综合分析中心静脉导管固定改良的临床应用效果。方法:本次研究的主要对象为:留置中心静脉导管的患者(共63例,病例选取时间开始于2021年10月,截止时间为2023年3月)。按照数字随机表分为两组,一组为对照组(应用常规中心静脉导管固定方法,31例患者入组),另一组为实验组(应用中心静脉导管固定改良,32例患者入组)。采用统计学分析两组留置中心静脉导管的患者的非计划拔管发生率、局部感染发生率、导管管腔变形发生率以及导管使用情况(患者自述皮肤无瘙痒不适、患者不担心胶布松动)。结果:实验组留置中心静脉导管的患者的非计划拔管发生率、局部感染发生率、导管管腔变形发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);实验组留置中心静脉导管的患者的导管使用情况高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:中心静脉导管固定改良的临床应用效果显著。

  • 标签: 中心静脉导管 固定改良法 临床应用效果
  • 简介:摘要目的探讨拔甲术后换药方法的改进。方法将81例拔甲术后患者分为两组,对照组38例按传统方法操作,研究组43例以改良操作,比较两组疼痛程度及伤口愈合时间等。结果术后第一次换药,研究组中度、重度疼痛为10、0例,对照组为26、6例;愈合时间研究组7±2.36天,对照组为10±2.08。结论改良换药方法较之传统方法明显减轻患者疼痛,缩短愈合时间。

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  • 简介:摘要目的探讨颌面手术口腔冲洗改良的临床应用效果。方法选取2014年3月~2015年3月于我院接受颌面手术的患者共90例,将患者按照入院的先后顺序分为观察组和对照组,每组患者各45例,对照组患者采用一般常规性口腔冲洗方法进行冲洗,观察组患者给予其口腔冲洗改良进行冲洗,分析对比两组患者的冲洗舒适程度及并发症情况。结果观察组患者在接受冲洗改良冲洗后,患者的舒适率达到了97.78%;对照组患者的舒适率为75.56%。观察组患者的非常舒适人数及舒适率均显著优于对照组患者,组间治疗效果比较具有明显差异,P<0.05具有统计学意义。结论临床上在对于颌面手术患者进行口腔冲洗时,可以采用冲洗改良进行冲洗,能够显著提升患者的冲洗舒适度以及减少相关并发症的发生率,在临床实际应用当中效果明显,应当大力推广。

  • 标签: 颌面手术 口腔冲洗 改良法 临床应用
  • 简介:以卷丹、麝香百合品种富田和离体鲜切花的花蕾为材料,比较Trizol、异硫氰酸胍、CTAB改进和SDS改进提取RNA的效果,结果表明,SDS改进能有效去除多糖,提取RNA中28SrRNA亮度约为18SrRNA的两倍,OD260/OD280值介于1.7-2.2之间,卷丹RNA得率为132.52μg/g,富田RNA得率为186.88μg/g。进一步用SDS改进分别提取富田外轮花瓣、内轮花瓣、雄蕊、雌蕊、叶和茎的RNA,同样可以获得完整的纯度高的RNA,其中28SrRNA亮度约为18SrRNA的两倍,OD260/0D280值介于1.7~2.2之间,说明此方法适用于百合各个组织RNA提取。经RT—PCR获得了花发育基因的特异性条带,说明用SDS改进从百合中提取RNA质量好、产率高、完整性强,完全适合于百合进一步的分子生物学研究。

  • 标签: 百合 RNA SDS改进法 多糖
  • 简介:针对沙棘组织中多糖、多酚、粗蛋白等次生代谢产物含量高的特点,采用RNAplantPlusRNA提取试剂改良,成功地提取了沙棘叶片RNA。所提取的沙棘叶片RNA凝胶电泳显示28s和18s条带清晰完整,A260/A280和A260/A230比值分别为1.79和2.07,且平均得率为298.1μg/g(鲜叶)。试验结果表明,RNAplantPlusRNA提取试剂改良具有方便快捷、提取RNA纯度高、有效排除多种次生代谢产物影响的特点,用该方法提取的沙棘叶片RNA可以用于后续的分子生物学研究中。

  • 标签: 沙棘叶片 总RNA提取 总RNA提取试剂改良法
  • 简介:摘要目的探讨颌面手术口腔冲洗改良的临床应用效果分析。方法选取在2011年4月—2014年5月到我院救治的88例颌面手术患者进行研究,随机将这88例就诊患者分成对照组和观察组各44例。其中观察组患者使用口腔冲洗改良进行冲洗,对照组患者给予常规口腔冲洗法进行冲洗,并对两组患者口腔冲洗操作时间以及患者的舒适度进行对比分析,同时对两组患者的并发症发生率进行对比。结果观察组冲洗操作时间均为(18.01±1.3),对照组冲洗时间为(30.1±1.9),两组间在冲洗时间相比差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者中感觉舒适的患者共43例,占97.7%;对照组患者感觉舒适患者共34例,占77.3%,两组间相比较差异有统计学意义(P<0.05)。其中观察组发病率为6.8%,对照组发病率为29.5%,两组间相比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在临床上对患者使用颌面手术口腔冲洗改良能够有效降低患者口腔溃疡的发生率以及口腔感染率,口腔冲洗改良能够更好地对颌面手术患者进行口腔清洁,进一步提升护理质量,可以帮助患者伤口尽早愈合,在临床应用上效果显著,值得广泛使用。

  • 标签: 颌面手术 口腔冲洗改良 临床 应用
  • 简介:探讨Millikan改良疝修补术在马鞍疝中的应用.分析我院应用Millikan改良治疗的121例马鞍疝患者的临床资料.平均手术时间为45.7min,术后出现尿潴留4例,阴囊水肿5例.术后3~6d出院.对101例患者随访1~3年,无1例复发.Millikan改良治疗马鞍疝具有操作简便、并发症及复发率低下等优点.

  • 标签: 马鞍疝 无张力疝修补术 Millikan改良法
  • 简介:摘要:路基是公路工程重要构成部分,其承载力直接影响工程质量及使用年限。膨胀土路基压缩量较高,强度低,不利于公路工程稳定性,必须结合公路工程实际情况,选取相应施工技术,切实提升路基施工质量。石灰改良膨胀土技术能够对膨胀土路基进行有效处理,提高路基承载力。为此,本文在充分了解膨胀土特性的基础上,结合某具体工程案例,对石灰改良膨胀土路基施工准备、施工工艺进行了分析与探究。

  • 标签: 公路工程 膨胀土路基 改良措施
  • 简介:目的探讨单层培养细胞RNA提取过程中先行细胞消化或离心富集对所提RNA质量是否产生影响。方法培养NGF诱导的PCI2细胞,采用Trizol试剂提取RNA:离心组(A)先将贴壁生长细胞经胰酶消化、离心获得细胞沉淀,加入1mlTrizol进行RNA提取;直接组(B)将培养液弃尽后直接加入Trizol试剂(1ml/10cm2瓶壁)进行RNA提取;均采用琼脂糖凝胶电泳分析RNA完整性,紫外分光光度仪测定RNA浓度和OD260/OD280比值。结果凝胶电泳结果显示,直接组出现3条清晰的条带(28S、18S和5s条带),离心组在电泳末端5S区出现粗大的条带。两组OD260/OD28比值相似,约为1.6。直接组组间样品间RNA浓度相差较大。结论采用离心法和直接法提取贴壁细胞RNA,先行细胞离心富集增加了RNA降解机会,直接法提取RNA质量较高,考虑对后续实验的影响,直接法更优于离心法。

  • 标签: 单层培养细胞 RNA提取 离心法 直接法
  • 简介:摘要目的探讨颞浅动脉旁皮下注射改良的应用。方法纳入我院2017年1月-2019年4月缺血性视神经疾病、视神经萎缩等患者100例,随机分组,传统组缺血性视神经疾病、视神经萎缩等患者实施传统的颞浅动脉旁皮下注射治疗,改良组缺血性视神经疾病、视神经萎缩等患者实施改良的颞浅动脉旁皮下注射治疗。比较两组缺血性视神经疾病、视神经萎缩等疗效;患者的疼痛评分;治疗前后患者生活质量;恐惧感。结果改良组缺血性视神经疾病、视神经萎缩等疗效、患者的疼痛评分、生活质量相比较传统组更好,P<0.05。改良组恐惧感低于传统组,P<0.05。结论改良的颞浅动脉旁皮下注射治疗缺血性视神经疾病、视神经萎缩等效果确切,可获得理想效果。

  • 标签: 颞浅动脉旁皮下注射 改良法 应用效果