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  • 简介:目的研究从人脂肪组织中提取的血管周干细胞(humanperivascularstemcells,hPSCs)的特点,并探讨其骨、软骨分化的能力。方法采用流式荧光细胞分选技术(FACS)在12例行吸手术患者的脂肪标本中分选出人基质血管成分(humanstromalvascularfraction,hSVF)和由周皮细胞(CD34^-、CD146^+、CD45^-)与外膜细胞(CD34^+、CD146^-、CD45^-)组成的hPSCs进行培养,比较其克隆增殖能力,然后将2种细胞进行骨、软骨诱导,诱导结束后分别进行茜素红染色、油红O染色和阿尔新蓝染色,并检测骨诱导后的骨相关基因mRNA表达。结果hSVF和hPSCs均以纺锤形成纤维样细胞生长,hPSCs呈现出更快的融合趋势,且细胞形态更均一。hPSCs细胞相比于hSVF具有更强的克隆增殖能力(P〈0.05)。hPSCs细胞在骨及软骨方向比hSVF具有更强优势,而hSVF在方向比hPSCs具有更强优势。骨诱导后,hPSCs的骨基因碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)和骨钙素(osteocalcin,OCN)的相对表达量要明显高于hSVF(P〈0.05)。结论hPSCs细胞具有干细胞的多项分化潜能,且其在骨方向具有很强优势,可成为骨组织工程学中理想的种子细胞来源。

  • 标签: 人血管周干细胞 人基质血管成分 成骨分化 成脂分化 成软骨分化
  • 简介:摘要目的探讨长链非编码RNA (lncRNA)-抗分化非编码RNA(DANCR)对人脂肪来源间充质干细胞(hASCs)骨分化能力的影响。方法收集中国医学科学院整形外科医院的3例女性患者腹部脂肪抽吸术后废弃的脂肪组织(年龄25~35岁),分离培养hASCs。构建DANCR敲减与过表达质粒,利用慢病毒感染的方式在hASCs中敲减或过表达DANCR,将实验分为5组:敲减DANCR的实验组(shDANCR1、shDANCR2)、敲减对照组(shScrmble)、过表达DANCR的实验组(pCDH-DANCR)、过表达对照组(pCDH-GFP),每组样本量为3例。RT-PCR检测上述5组细胞中DANCR的表达量。将上述5组慢病毒感染成功后的hASCs进行骨诱导,诱导7 d进行油红O染色鉴定效果,骨诱导14 d进行茜素红染色鉴定骨效果,并应用RT-PCR检测分化关键转录因子PPAR-γ、C/EBPα、FABP4、Adiponectin和类合成酶基因LPL、GPDH、FASN、ACC1和HSL,以及骨分化关键转录因子RUNX2、OCN、OPN、BMP2及ALP的表达。实验数据均采用均值±标准差表示,2组间数据采用t检验(Student’s t-test)进行比较,P < 0.05为差异具有统计学意义。结果设计的2条shRNA敲减序列均可使hASCs中DANCR的表达显著减少,与对照组比较,DANCR表达量分别下降了86%和74%,差异具有统计学意义( t=84.07、P <0.001,t=75.52、P <0.001)。构建的DANCR过表达质粒可以有效增加hASCs中DANCR表达量,与对照组相比,增加了(15.067±1.986)倍,差异具有统计学意义(t=12.24, P<0.001 )。骨诱导实验显示,敲减DANCR会引起hASCs诱导后滴数量显著多于对照组,2组敲减组与对照组相比,差异均具有统计学意义(t=17.24、P <0.001,t= 30.68、P <0.001),分化关键转录因子PPAR-γ、C/EBPα、FABP4、Adiponectin以及类合成酶的关键基因LPL、GPDH、FASN、ACC1、HSL的表达都显著高于对照组;而过表达DANCR后会抑制滴的形成及上述基因的表达。同样在骨诱导中,敲减DANCR后hASCs骨诱导14 d钙结节形成量显著多于对照组,差异具有统计学意义(t=15.25、P <0.001,t=24.61,P <0.001),骨分化关键基因RUNX2、OCN、OPN、BMP2及ALP的表达也显著高于对照组,而过表达DANCR后骨诱导14 d钙结节形成量较对照组显著减少(t=40.81、P<0.001),骨分化关键转录因子表达水平也会降低。结论lncRNA-DANCR能够抑制hASCs的骨分化,DANCR表达量的变化影响hASCs的骨分化效果,可以作为调控hASCs骨定向分化的潜在靶点。

  • 标签: 干细胞 脂肪间充质干细胞 抗分化非编码RNA 成脂分化 成骨分化
  • 简介:目的比较CD204+和CD204-两种人脂肪来源细胞的干细胞特性和体外诱导软骨的能力。方法分离培养人脂肪来源细胞并进行流式细胞分选.分别获得CD204+和CD204-两种细胞。将这两种细胞培养扩增至第2代,观察其形态学特点:骨定向诱导分化,油红O染色、茜素红染色定性;同时将两种细胞进行pellet软骨诱导分化,比较体外诱导软骨的能力.并以HE、SafraninO和Ⅱ型胶原免疫组化染色等进行鉴定。结果经流式细胞分选,脂肪来源细胞中CD204表达15日性串约为10%。分选后的CD204+和CD204-细胞均呈成纤维细胞样贴壁生长.但CD204-细胞具有更强的增殖能力。诱导10d后.曲组细胞油红0染色均可见胞浆内有大量红染滴,但CD204+细胞具有更强的潜能骨诱导2周后.曲组细胞芮素红染色均可见钙结节红染.而CD204-细胞具有更强的潜能。同时,细胞Dellet软骨诱导4周后,人体观可见CD204细胞组pellet形成白色透明样软骨成分.而CD204+细胞组pellet外观微黄。HE和Ⅱ型胶原免疫组化染色均妊示CD204组pellet可见成熟软骨陷窝形成.Safranin0染色显示CD204-组软骨特异性细胞外基质沉积:而CD204+细胞组peliet则呈纤维化改变。结论脂肪组织来源的CD204-细胞具有干细胞的生物学特点.且有良好的软骨潜能,可以成为软骨组织工程良好的种子细胞来源。

  • 标签: CD204(巨噬细胞清道夫受体)脂肪组织来源干细胞 软骨潜能 细胞分选
  • 简介:目的探讨带有绿色荧光蛋白基因的重组杆状病毒修饰后的小鼠羊水干细胞(nlouseamnioticfluidstemcells,mAFSs)是否仍保持骨分化潜能。方法体外原代培养小鼠羊水干细胞,并进行骨诱导分化,鉴定多向分化潜能;体外构建并扩增重组杆状病毒(Baculovirus—CMV—GFP,By—GFP);By—GFP体外转导小鼠羊水干细胞,流式细胞仪检测其转导效率;经Bv—GFP基因修饰后的小鼠羊水干细胞进行骨诱导分化。结果小鼠羊水干细胞体外具有良好的增殖能力,3代后的细胞呈现较均一的梭形、漩涡状生长,且小鼠羊水干细胞体外具有成骨分化潜能。体外成功构建重组杆状病毒,经Sf9细胞扩增后,极度稀释法测定其滴度可达10^9v.g/ml;Bv—GFP体外可较有效转导小鼠羊水干细胞,其转导效率为52.85%,且经Bv—GFP基因修饰后的小鼠羊水干细胞仍保持骨分化潜能。结论小鼠羊水来源干细胞是一种理想的干细胞,杆状病毒是一种新型病毒基因载体,体外能较有效转导小鼠羊水干细胞且不改变其骨分化潜能。经重组杆状病毒基因修饰的羊水干细胞会为今后的骨组织工程提供一种新的治疗模式。

  • 标签: 杆状病毒 羊水细胞 基因修饰 成骨分化
  • 简介:间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSC)的来源非常广泛。由于不同组织来源的影响,MSC之间都会存在一定的差异。本研究分析比较脐带、脂肪及骨髓组织来源的MSC的基本生物学特性。从脐带、脂肪和骨髓分离培养MSC,在显微镜下观察这3种来源的MSC的形态(UC—MSC,AD—MSC和BM—MSC),用流式细胞术诱导分化试验及定量荧光PCR分别检测UC-MSC,AD-MSC和BM-MSC的免疫表型、分化能力和过氧化物酶增殖激活受体-γ(peroxisomeproliferator—activatedreceptor-1,PPAR-1)mRNA的表达水平。结果表明,UC-MSC、AD-MSC和BM—MSC的形态都是成纤维细胞样;经罗丹明和DAPI染色后,用共聚焦显微镜观察发现它们的细胞形态类似;这三种来源Msc的免疫表型符合Msc的鉴定标准,而且表达水平一致;这三种来源MSC的骨分化潜能相似,而成分化潜能存在较明显的差异,其中AD—MSC能力最强,BM-MSC次之,UC-MSC最差。检测脂肪形成早期起重要作用的过氧化物酶增殖激活受体-γ(PPAR-1)mRNA表达水平在三种来源MSC中的基础表达水平,发现PPAR-γmRNA在AD-MSC中最高,在BM—MSC次之,而在UC—MSC中最低,与能力的表现相一致。这表明三种来源MSC能力存在差异可能与它们PPAR-1的基础表达水平有关。结论:UC—MSC,AD—MSC和BM—MSC的形态类似;免疫表型符合MSC鉴定标准,表达水平一致;骨分化能力相似,而成分化能力不同;PPAR-γmRNA表达水平不一。关于差异的相关机制有待进一步研究。

  • 标签: 骨髓间充质干细胞 脐带间充质干细胞 脂肪间充质干细胞 成脂潜能 PPAR-Γ
  • 简介:在不经意或放松的时候.我们甚至能记起很多年前一件r’小事的细节;在考试的时候,一些辛辛苦苦记住的东西却不翼而飞。这些都是记忆在调皮。难道记忆真的是神奇的、令人不可捉摸的吗?经过不懈的努力,科学家们正逐步揭开记忆的神秘面纱。

  • 标签: 记忆 开发 科学家 面纱
  • 简介:只可能在限期的最后几天工作表现才会达到要求,负强化只会使工作成绩渐渐提高,  由于两种强化都能提高工作表现

  • 标签: 员工潜能 挖掘员工
  • 简介:<正>当"潜能"一词一次次被提起的时候,很多人都开始迷惑,"潜能"到底是什么?"潜能"是生命天生所具备的一种能量。这种能量是人类对万物造化的一种反抗。因为天地造人,却没有给人类以意义。人由生入死,从空到空,这个过程不具有意义。而人的潜能,则是帮助人找到和实现自我生命的意义。由于每一个生命的体验是独一无二的,所以每一个生命所拥有的潜能也是独一无二的。如何发现自己生命中珍贵的潜能是每一位熟的人都应该为自己的生命所负起的责任。

  • 标签: 不知道 这个世界 摧毁性 陷人 不等于 中所
  • 简介:拓展英文为OutwardBouna,意为一艘小船驶离平静的港湾,义无反顾地投向未知的旅程,去迎接一次次挑战.去战胜一个个困难。拓展训练起源于二战期间的英国。当时大西洋商务船队屡遭德国人袭击.许多年轻海员葬身海底。人们从生还者身上发现.他们并不一定都是体能最好的人,但却都是求生意志最顽强的人。

  • 标签: 拓展训练 潜能 求生意志 企业 员工培训 素质培训
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  • 简介:一、人类不仅能思考,还能创造音乐艺术著名哲学家帕斯卡尔曾说:"虽然人只不过是一根苇草,是自然界最脆弱的东西,但他是一根能思想的苇草。纵使宇宙毁灭了他,人却仍然要比致他于死命的东西更高贵得多;因为他知道自己要死亡,以及宇宙对他所具有的优势,而宇宙对此却一无所知。"[1]由此我们联想:人不仅是一根能思想的苇草,还是能创造音乐和艺术的苇草。音乐的巨大力量和能量,不仅让人类能够镇定地面对灾难和死亡,还通过音乐,传达出对人们的终极关怀。

  • 标签: 音乐艺术 帕斯卡尔 终极关怀 哲学家 自然界 宇宙
  • 简介:人最宝贵的是什么呢?是充满活力的健康生命。有些50岁、60岁、70岁左右的成功人士,业绩辉煌,身体却过早地累垮了。这不仅是个人的悲哀,也是人类社会的悲哀!鉴于此,我把中国传统性保健方法——性命术介绍给大家。什么叫性命术呢?性,指心性和性交;命,指肉体;术,指性交技术方法。狭义地说,性命术就是通过自控、愉悦的性交合,达到享乐、优生、健康、长寿的性保健技术。这项技术批判地吸取了中国古代“性养生”的精华,从理论认识和实际操作的根本上,转换人体内部能量产生、控制、运化的机制,转无奈为自控,转顺行为逆行,转耗泄为聚敛和补益。

  • 标签: 开发性 潜能 成功人士 人类社会 保健方法 中国传统
  • 简介:新课程改革下的创新思考——让学生的个性得以张扬,更好的激发孩子们的潜能.小学生正是发展中的个体,他们具有惊人的创造潜能,其想象力往往是我们成年人无法比及的.为此,我们的教育要保护孩子们的天性,更好地塑造孩子独立的个性,使他们形成健全的人格,激活他们的思维,最大限度地发挥他们的潜能,以培养出未来社会需要的建设人才.

  • 标签: 激情 引路 互动 个性
  • 简介:人的大脑左半球负责完成语言、阅读、书写、计算等工作,被称为“语言脑”;大脑的右半球负责完成音乐、情感等工作,被称为“音乐脑”。由于人类生活离不开语言,因而“语言脑”的利用率特别高;而一般人“音乐脑”的利用率就比较低,从而容易造成左右脑的功能失调。但是,“音乐脑”能使人产生创造力、联想力、直观力、想象力及灵感,所以如果能够设法开发利用“音乐脑”,那将会提高人类的智能。

  • 标签: 开发利用 音乐 右脑潜能 人类生活 功能失调 利用率
  • 简介:1998年5月,我们上海伟业培训中心接受上海市劳动和社会保障局的委托,设计和承办首期“企业创办者”培训班。127名失业下岗人员报名参加。经过一年培训,91名学员相继开办了67个非正规劳动组织和24个私营企业,成功率达85%。2001年底,我们对首期创业培训班进行跟踪调查,发现3年内学员开办企业的成功率高达87%以上。这个事实充分显示了“创业培训”对开发创业者的潜能、提高个人素质、促进就业的重要作用。

  • 标签: 上海 伟业培训中心 劳动力 就业 培训模式 教育思想