简介：摘要目的探讨血清线粒体ATP合酶C亚基水平在脓毒症患者心功能状态及预后评估中的价值。方法前瞻性纳入2017年1月1日至2018年12月31日在温州医科大学附属第一医院急诊重症监护室（EICU）收住的165例脓毒症患者，男103例（62.4%），女62例（37.6%），年龄（63±14）岁。使用人ATP合成酶脂质结合蛋白（ATP5G1）ELISA试剂盒检测患者入EICU后24 h内的血清ATP合酶C亚基水平。对照组为健康体检者，共45例。收集患者临床资料，根据左室射血分数（LVEF）及临床结局不同进行分组，比较各组之间临床指标的差异，评价血清ATP合酶C亚基水平对脓毒症患者心功能状态及预后评估的价值，分析脓毒症患者心功能状态及预后的独立危险因素。结果脓毒症组血清ATP合酶C亚基水平高于对照组［（116±62） μg/L比（77±34） μg/L，P<0.001］。脓毒症心功能障碍组血清ATP合酶C亚基水平高于心功能正常组（P<0.001），死亡组血清ATP合酶C亚基水平高于存活组（P<0.05）。绘制ATP合酶C亚基、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、B型钠尿肽（BNP）、肌钙蛋白I（cTnI）、左房舒张末期内径、左室收缩末期内径、左室舒张末期容量、左室收缩末期容量受试者工作曲线（ROC）来评估脓毒症患者心功能障碍，曲线下面积（AUC）分别为0.928、0.661、0.837、0.814、0.703、0.831、0.794、0.765，其中ATP合酶C亚基截断值、灵敏度、特异度分别为139.44 ng/L、100%、75.2%。logistic回归分析得出ATP合酶C亚基、BNP、左房舒张末期内径是脓毒症患者心功能障碍的独立危险因素（均P<0.05）。绘制年龄、尿素氮（BUN）、ATP合酶C亚基、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ评分（APACHEⅡ）、简化急性生理评分（SAPSⅡ）ROC曲线来评估脓毒症患者预后，其AUC分别为0.719、0.772、0.656、0.868、0.884，其中ATP合酶C亚基的截断值、灵敏度、特异度分别为131.24 ng/L、61.9%、68.7%。logistic回归分析得出年龄、BUN、ATP合酶C亚基、发生心功能障碍、APACHEⅡ评分及SAPSⅡ评分是脓毒症患者预后的独立危险因素（均P<0.05）。结论血清ATP合酶C亚基水平与脓毒症患者心功能障碍密切相关，并能有效预测患者预后。

简介：摘要目的探讨Orai1介导钙池操纵的钙内流（SOCE）在脓毒症小鼠CD4+ T细胞免疫功能损害中的作用。方法采用清洁级雄性Balb/c小鼠建立盲肠结扎穿孔（CLP）脓毒症模型，分别于术后1、3、5 d 处死小鼠，无菌留取脾脏，免疫磁珠法分选CD4+ T细胞，Western印迹法检测各组脾脏CD4+ T细胞Orai1蛋白表达，流式细胞术检测SOCE，流式细胞术检测CD4+ T细胞凋亡，CCK-8细胞计数试剂盒检测CD4+ T细胞增殖，酶联免疫吸附法（ELISA）检测干扰素（IFN）-γ和白细胞介素（IL）-4水平。然后调节Orai1蛋白的表达，实验分为4组，sham组、CLP3组、Orai1下调组（Orai1-down组）、Orai1上调组（Orai1-up组），进一步检测小鼠脾脏CD4+ T细胞SOCE和免疫功能。结果sham组脾脏CD4+ T细胞Orai1蛋白的相对表达量为1.03±0.16，与sham组相比，CLP组的Orai1蛋白水平明显降低（F=19.64，P=0.000 5）。与sham组相比，CLP组SOCE水平明显降低（F=30.01，P=0.001）。sham组的CD4+ T细胞早期和晚期凋亡比率为8.7%±1.5%，与sham组相比，CLP组明显升高（F=32.29，P=0.000 1）。与sham组相比，CLP组小鼠脾脏CD4+ T细胞增殖能力明显降低，差异有统计学意义（F=7.26，P=0.001 8）。与sham组相比，CLP组小鼠脾脏CD4+ T细胞分泌IFN-γ和IL-4的能力均明显降低，差异均有统计学意义（F=19.690、6.183，均P<0.05）。与sham组相比，CLP组IFN-γ/IL-4比值变小（F=11.23，P=0.003 1）。与CLP3组相比，Orai1-down组CD4+ T细胞SOCE的水平明显下降，早期和晚期凋亡比率明显升高，脾脏CD4+ T细胞增殖能力显著下降，分泌IFN-γ和IL-4下降，IFN-γ/IL-4值下降，差异均有统计学意义（t=4.819、7.952、2.988、28.760、3.140、7.670，均P<0.05）；而Orai1-up组则均获得相反的结果，差异亦均有统计学意义（t=2.983、6.796、9.390、19.670、3.692、15.870，均P<0.05）。结论Orai1介导SOCE减轻脓毒症小鼠CD4+ T细胞免疫功能障碍。