简介:摘要目的建立复制型慢病毒(replication competent lentivirus, RCL) VSV-G qPCR检测方法,并进行方法学性能验证及初步应用。方法以慢病毒载体包膜VSV-G基因为目标序列,建立荧光定量PCR检测方法,并对方法的专属性、线性、扩增效率、精密度、准确度、线性范围、检测限、定量限及耐用性进行验证。利用所建立的方法进行CAR-T细胞、慢病毒载体生产终末细胞及慢病毒载体收获液样品的初步应用性研究。结果建立的VSV-G荧光定量PCR法,专属性较好,对293T细胞、PBMC细胞及C8166细胞均无特异性扩增,线性范围为1×102拷贝/test~1×109拷贝/test,R2能够达到0.998以上,扩增效率在93%~98%之间,精密度RSD<12%,准确度回收率为85%~106%,最低检出限和最低定量限分别为5拷贝/test和40拷贝/test。另外,该方法的耐用性较好。各项验证结果均表明该方法能够满足检测的要求。利用该方法对54批样品(包括CAR-T细胞、慢病毒载体及载体生产终末细胞)进行RCL C8166细胞培养法的终点检测,结果显示54批样品均为阴性。结论成功建立了VSV-G实时荧光定量PCR法,各项验证参数均可满足检测要求,该方法的应用将进一步提高慢病毒载体相关产品的安全性。
简介:Itisprovedthatisa(Δ+1)-colorablegraph,soarethegraphsG×PnandC×Cn,wherePnandCnarerespectivelythepathandcyclewithnvertices,andΔthemaximumedgedegreeofthegraph.TheexactchromaticnumbersoftheproductgraphsPr1×Pr2×…×PrnandC3k×C2m1×C2m2×…×C2mnarealsopresented.Thusthetltalcoloringconjectureisprovedtobetrueformanyothergraphs.
简介:群对群(G2G)计算是一种基于G2G网络的分布式计算。G2G计算得益于灵活的分群,相同属性或任务的群内计算。本文提出了一个有门户网站结构,基于G2G计算的搜索服务。G2G搜索服务是一个混合搜索系统,既有分布式的搜索服务,又采用了集中式的搜索服务。采用G2G搜索服务的好处之一是,用户既参与了系统的分布式搜索任务,又能向系统请求搜索服务。采用G2G搜索服务的好处之二是,用部分的集中式结构把分散的局域搜索系统关联起来,扩大了系统的搜索效能。
简介:Inthispaper,wefirstdeterminetherelationsamongthebestboundsAandBoftheg-frame,theg-frameoperatorSandthepre-frameoperatorQandgiveanecessaryandsufficientconditionforag-framewithboundsAandBinacomplexHilbertspace.Wealsointroducethedefinitionofag-framesequenceandobtainanecessaryandsufficientconditionforag-framesequencewithboundsAandBinacomplexHilbertspace.Lastly,weconsiderthestabilityofag-framesequenceforacomplexHilbertspaceunderperturbation.