简介:摘要目的评价菊苣酸对脓毒症大鼠心肌损伤时氧化应激的影响及其与核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的关系。方法健康雄性SD大鼠40只,8~12周龄,体重220~250 g,采用随机数字表法分为5组(n=8):对照组(C组)、LPS组、LPS+菊苣酸组(LPS+CA组)、LPS+Nrf2抑制剂ML385组(LPS+ML组)和LPS+菊苣酸+ML385组(LPS+CA+ML组)。腹腔注射LPS 15 mg/kg制备大鼠脓毒症心肌损伤模型。腹腔注射LPS即刻,LPS+CA组和LPS+ML组分别腹腔注射菊苣酸10 mg/kg或ML385 15 mg/kg(均用DMSO溶解),LPS+CA+ML组腹腔注射ML385 15 mg/kg和菊苣酸10 mg/kg,C组腹腔注射等容量DMSO。造模后48 h时,取主动脉血样,采用ELISA法测定血清IL-6浓度、LDH和CK-MB活性。然后处死大鼠,取心肌组织,HE染色后光镜下观察病理学结果,采用化学比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和SOD活性、ROS和铁含量,计算NAD+/NADH比值,采用Western blot法测定Nrf2、醌氧化还原酶1(NOQ1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)的表达水平。结果与C组相比,其余4组血清LDH、CK-MB活性和IL-6浓度升高,心肌组织ROS和铁含量及NAD+/NADH比值升高,GSH-Px和SOD活性降低,Nrf2、NQO1和GPX4表达下调,NOX1表达上调(P<0.05);与LPS组相比,LPS+CA组血清LDH、CK-MB含量和IL-6浓度降低,心肌组织ROS和铁含量及NAD+/NADH比值降低,GSH-Px和SOD活性升高,Nrf2、NQO1和GPX4表达上调,NOX1表达下调(P<0.05),心肌细胞病理学损伤明显减轻,LPS+ML组血清LDH、CK-MB含量和IL-6浓度升高,心肌组织NAD+/NADH比值升高,GSH-Px和SOD活性降低,NQO1和GPX4表达下调,NOX1表达上调(P<0.05),心肌细胞病理学损伤进一步加重;与LPS+CA组相比,LPS+CA+ML组血清LDH、CK-MB活性和IL-6浓度升高,心肌组织ROS和铁含量及NAD+/NADH比值升高,GSH-Px和SOD活性降低,Nrf2、GPX4和NQO1表达下调,NOX1表达上调(P<0.05),心肌细胞病理学损伤明显加重。结论菊苣酸减轻脓毒症大鼠心肌损伤的机制可能与激活Nrf2信号通路,抑制氧化应激有关。
简介:摘要目的评价富氢液对人肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤时丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)/核因子-E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响。方法体外培养的人肾小管上皮细胞系,以1.5×104个/ml的密度接种于96孔培养板(200 μl/孔)或以2×105个/ml密度接种于6孔培养板(2 ml/孔),采用随机数字表法分为5组(n=30):对照组(C组)置于常氧恒温培养箱(37 ℃、5%CO2-21%O2-74%N2)中培养28 h;富氢液组(H组)加入含0.6 mmol/L富氢液的培养基,置于常氧恒温培养箱中孵育28 h;缺氧复氧组(H/R组)置于厌氧恒温培养箱(37 ℃、5%CO2-1%O2-94 %N2)中缺氧24 h,取出后置于常氧恒温培养箱复氧4 h;缺氧复氧+富氢液组(H/R+ H组)置于厌氧恒温培养箱中缺氧24 h,取出后加入含0.6 mmol/L富氢液的培养基,置于常氧恒温培养箱中复氧4 h;缺氧复氧+富氢液+Akt抑制剂Uprosertib组(H/R+ H+U组)加入终浓度为10 μmol/L的Uprosertib孵育1 h,其余处理同H/R+ H组。各组细胞处理结束后,采用MTT法测定细胞活力,流式细胞术测定细胞凋亡率,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,硫代巴比妥酸法测定MDA含量,Western blot法检测Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、总Nrf2、核Nrf2和活化的caspase-3表达,RT-PCR法检测Nrf2 mRNA表达。结果与C组比较,H/R组和H/R+H组细胞活力和SOD活性下降,细胞凋亡率和MDA含量升高,p-Akt、核Nrf2、总Nrf2、活化的caspase-3和Nrf2 mRNA表达上调(P<0.05);与H/R组比较,H/R+H组细胞活力和SOD活性升高,细胞凋亡率和MDA含量降低,p-Akt、核Nrf2、总Nrf2和Nrf2 mRNA表达上调,活化的caspase-3表达下调(P<0.05);与H/R+H组比较,H/R+ H+U组细胞活力和SOD活性下降,细胞凋亡率和MDA含量升高,p-Akt、核Nrf2、总Nrf2和Nrf2 mRNA表达下调,活化的caspase-3表达上调(P<0.05)。结论富氢液减轻人肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤的机制与促进Akt/Nrf2信号通路激活,降低氧化应激水平,抑制细胞凋亡有关。
简介:近几年,随着国民经济的发展,我国的铁路事业也有了长足的发展,并对原有的线路进行了改造;并开辟了许多新的线路,使铁路在技术上取得了重大的成绩。在信号系统的控制上,它已与发达国家的先进技术相结合,并在国际上取得了显著的成就。与此同时,我国的城市轨道交通也在不断地发展,并被越来越多的城市所采用。