简介:为制备可视化的转移消失蛋白(MIM)的I-BAR结构域重组体,克隆了顺联绿色荧光蛋白(GFP)探针编码序列的MIM-I-BAR基因.在6xHis标签原核表达质粒上成功构建了DNA序列.同时,实现了未标记荧光探针基因的MIM-I-BAR质粒的构建以作实验对照.成功转染至BL21(DE3)大肠杆菌细胞后,GFP偶联的MIM-I-BAR(MIM-I-BAR-GFP)蛋白表现出很强的可视荧光,该表达产物可方便的通过目测、荧光显微镜、免疫印迹和紫外可见分光光度计等多种手段进行检测.此外,在考察不同条件下的蛋白表达效率过程中发现,带有GFP探针的MIM-I-BAR重组蛋白在温度为10℃时产率最高,而并非37℃.这一特征与非荧光标记的MIM-I-BAR明显不同.研究证实该最佳表达温度条件适用于重组蛋白产品中量制备.所开发的带有荧光探针的MIM-I-BAR蛋白产品及其制备工艺在科学研究、生物医学应用以及药物开发过程中均有较高的应用价值。
简介:文章对青年毛泽东政治经济思想的研究思路归纳为“贯穿明暗两条线,有三个外在维度,推动三次递变过程”。明线即青年毛泽东政治经济思想递变的顺序与中国近代社会思潮演进的过程基本一致;暗线即青年毛泽东政治经济思想递变的动力,来自探索实现中华民族伟大复兴的科学道路。三个外在维度分别是交友、阅读与实践。三次递变过程是中国传统经济思想、西方近代经济思想与马克思主义政治经济思想在青年毛泽东政治经济思想中依次递变。青年毛泽东最终选择社会主义道路,初衷在于寻找实现中华民族伟大复兴的科学道路。回顾青年毛泽东政治经济思想,有助于科学安排马克思主义政治经济学、西方经济学与中国传统经济思想在构建中国特色社会主义政治经济学中的理论地位。