药品微生物限度检查的误差因素及控制措施

李莹莹张默涵

摘要：目的对药品微生物限度检查的主要误差因素进行分析，以期有效控制，提高检验结果的准确性。方法根据工作经验及资料文献，分析药品微生物限度检查中的误差因素，提出控制措施。结果人员、设备、培养基等因素会造成误差，应予以控制。结论明确影响因素，有效规避，可以提高检验结果的准确性。

关键词：微生物限度；误差；控制措施

药品作为特殊商品，直接关乎人的身体健康与生命安全，而微生物限度检查法通过测定药品的微生物污染程度，为药品质量评价提供了依据[1]。但微生物限度检查周期长、操作繁琐，如操作不当，常因产生误差而影响结果的准确性。现就操作中常见的几种误差因素及其控制方法分析如下：

1实验环境

药品微生物限度检查在无菌室或洁净室内进行，其洁净度及消毒灭菌状况，对实验结果有直接影响。

1.1实验室布局不合理

微生物实验室应分为洁净区与活菌操作区，有效分隔不相容的操作活动，活菌操作区需配有生活安全柜。微生物检验的各项工作均应在专属区域进行，防止交叉污染，防止出现假阳性或假阴性结果。

1.2洁净度不达标

药品微生物限度检查的操作室洁净度不得低于D级，操作区域需为单向流空气，并且局部洁净度保证在B级。实验室应制定清洁消毒的操作规程，在实验前后均应仔细清洁，不得留有死角，保证清洁卫生良好，并定期监测消毒剂的消毒效果，确保实验室洁净度达到要求。

1.3未定期环境监测

有的药品洁净室常年使用而不进行环境监测，导致空调过滤器损坏都未觉察。根据受控区域的洁净级别，药品洁净实验室应定期进行环境监测。物理参数包括过滤完整性、气流组织、温度、相对湿度等的监测，微生物参数包括沉降菌、浮游菌、表面微生物等的监测。一旦监测结果出现偏离，洁净区有被污染的风险，应对洁净区进行彻底清洁灭菌，之后重新进行监测评估。

2实验人员

2.1取样随意

某些实验操作人员认为，微生物限度范围较宽，结果多点少点都没有大影响，因而操作粗犷，取样随意，导致检验结果无法反映供试品的真实情况。

2.2无菌操作不规范

人员是洁净室最关键的污染源，一定要规范操作，避免污染供试品和实验区。但目前药厂存在微生物检验人员离职突然，后续人员无人培训就上岗的现象。实验操作人员专业水平参差不齐，无菌操作不规范，无法保证结果准确[2]。实验人员应经培训上岗，实验时着无菌隔离服，佩戴无菌口罩及手套，在近火焰区操作，使用的工具应清洁无菌，操作后需对洁净区进行清扫灭菌，并及时处理实验室带菌废弃物。

2.3计数不准确

2.3.1培养基多天不计数

中国药典规定，需氧菌培养3-5天、霉菌和酵母菌培养5-7天，观察菌落情况[3]。有些实验室按最长时间培养后，计数时发现菌落已密集生长、接连在一起，导致无法准确点数。为防止该情况，一般需氧菌培养24小时、霉菌和酵母菌培养48小时后，应每天进行计数并记录[4]。

2.3.2计数不仔细

当菌落较小时，很容易因不细心判断而造成误差，尤其对于生长在平皿边缘或密集在一起的菌落，切不可马虎大意，要留意判断，必要时可使用菌落计数器。

2.3.3细小颗粒与菌落混淆

有些供试品含有不溶性成分，制备的稀释液倾注培养基后有细小沉淀，因与菌落相似，造成计数误差。为了排除颗粒的干扰，可选择适宜稀释液，多倾注2个皿，放在冰箱中冷藏，待菌落计数时，取出作为对照[5]。

3实验设备

有些实验室没有引进必要的仪器设备，或仪器设备长期使用不进行检定校准，因设备误差导致结果偏差。实验室应配备工作需要的仪器设备，注意日常维护保养，定期进行检定校准，并及时更新使用检定校准仪器的修正因子。对于培养箱、冰箱等温度直接影响检验结果的设备，应监控运行温度。

4培养基

培养基为微生物提供丰富的营养物质，其质量对检验结果有着重要影响。

4.1未进行质量验收

现在微生物检验多使用商品化的培养基，购买时应向生产厂家索要产品质量报告，并进行质量验收。培养基应按照说明书进行存放，开封时在瓶体注明开封日期，一旦受潮结块或性状改变不得使用，超过效期不得使用。

4.2未按要求灭菌贮藏

培养基配制时应根据产品说明进行加热煮沸灭菌或高压灭菌，不得随意改变灭菌条件。对于实验室有时存在的，下班时高压灭菌器压力未归零，从而关闭电源，第二天早上上班再取出的现象，一定要杜绝。培养基经高压灭菌后应及时取出，不得储存在高压灭菌器内，以防过度受热破坏营养成分。

琼脂培养基灭菌后只允许再融化一次，融化后应置于45-50℃，不可超过8小时，再融化后如未用完，剩余培养基不得再用。琼脂培养基因琼脂成分的特殊性，存放温度应≥0℃，以防破坏其凝固力导致性状改变。

4.3使用温度不当

微生物限度实验中，有时存在实验人员赶时间，不待培养基降至合适温度就着急倾注培养基的现象，影响了检验结果的准确性。倾注的培养基温度应以45℃左右为宜，温度太高微生物易受损死亡，温度太低培养基易凝固，导致平板无法均匀摊布。

5结语

药品微生物限度检查是保障药品质量的重要方法，但因操作步骤多、检验周期长、干扰因素多，常造成最终检验结果不准确。保持空调系统良好运行，定期进行环境监测，提高操作人员专业技能，规范其无菌操作，定期检定校准仪器设备，正确贮存使用培养基，均可有效消除误差，提高药品微生物限度检查的准确性。

参考文献：

[1]李雪.药品在微生物限度检验中的误差影响因素[J].中国药物经济学,2016(3):12-14.

[2]王志远.探讨药品微生物控制现状及其趋势[J].民营科技,2018(1):12.

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典2015年版.四部[M].北京:中国医药科技出版社,2015:144.

[4]杨立,张催.药品在微生物限度检验中的误差影响因素[J].养生保健指南,2016(33).

[5]黄英.药品微生物限度检验误差分析[J].中国药师,2005,8(2):173.