红细胞保存液保存洗涤红细胞质量观察

柳芳梅崔秀段彩红

【摘要】目的：观察红细胞保存液（MAP）保存的洗涤红细胞35天内质量是否符合GB18469-2012《全血及成分血质量要求》。方法：将2U去白悬浮红细胞40袋随机分为A、B两组各20袋，A组洗涤后加生理盐水保存，B组洗涤后添加MAP保存。比较生理盐水和MAP混悬洗涤红细胞指标差异；将B组储存于4℃冰箱，观察35天内的指标变化。结果：MAP和生理盐水混悬洗涤红细胞制备当天检测结果比较差异无统计学意义；MAP混悬洗涤红细胞保存35天内检测指标随时间推移逐渐变化，但检测值均在国家标准范围内。结论：MAP混悬洗涤红细胞35d内的各项指标均符合GB18469-2012《全血及成分血质量要求》。

【关键词】洗涤红细胞；红细胞保存液；生理盐水；保存时间

【中图分类号】R329.2【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2017）32-0069-02

洗涤红细胞去除了几乎所有的血浆蛋白及大部分的白细胞，主要用于减少或避免血浆蛋白所致的过敏反应，也适应于自身免疫性溶血性贫血和阵发性睡眠性血红蛋白尿需输血的患者及对血浆蛋白、白细胞和血小板产生抗体的患者[1]。洗涤红细胞经典的制备方法是洗涤后加入生理盐水悬浮而成，保存期只有24h，很大程度上限制了临床使用[2]。参照全血质量标准及国际相关规定，在密闭系统中用生理盐水洗涤、MAP悬浮的洗涤红细胞，保存至35天质控相关项目仍符合标准[3]。现将MAP混悬的洗涤红细胞和生理盐水悬浮的洗涤红细胞质量做一对比，并对MAP混悬的洗涤红细胞保存期内在部分时间点做质量观察。

1.资料与方法

1.1资料来源

400ml全血制备的2U去白悬浮红细胞为原料血，使用ACP215型全自动细胞洗涤仪制备洗涤红细胞，A组用生理盐水洗涤，最终添加生理盐水作为保存液，B组用生理盐水洗涤，最终添加MAP。

1.2制备方法

将2U的去白悬浮红细胞称重后用无菌接驳机连接235耗材(美国血技生产)，使用ACP215型全自动细胞洗涤仪，选择洗涤程序，A组连接生理盐水，B组连接MAP的洗涤专用盐水袋，输入去白悬浮红细胞重量，按照设定的程序及参数自动处理完成，收集终产品。

1.3样本留取

A组洗涤结束后混匀制品留取样本做检测。

B组洗涤结束后留取样本时间分别为洗涤后24小时内，采血后7d、14d、21d、35d的标本做检测。

留取方法：24小时内的样本直接留取；MAP混悬洗涤红细胞留取当天样本后，在洗涤红细胞袋上通过无菌接驳机连接四联空转移袋，夹闭连接处管路，储存于4℃冰箱，取样时充分混匀后打开管路留取一个所需样本，继续放置在4℃冰箱保存，直至取样完毕。

1.4判断标准

依据GB18469-2012《全血及成分血质量要求》，源于400ml全血的洗涤红细胞血红蛋白含量≥36g，上清蛋白含量≤1.0g，溶血率<红细胞总量的0.8%，无细菌生长。

1.5统计分析

用Excel建立数据库，使用SPSS17.0软件进行数据统计分析，2组资料比较采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2.结果

2.1MAP混悬洗涤红细胞和生理盐水混悬洗涤红细胞检测结果分析（表1）

MAP混悬的洗涤红细胞和生理盐水混悬的洗涤红细胞在制备24小时内血红蛋白含量差异无统计学意义(t=2.791，P＞0.05)，上清蛋白含量差异无统计学意义(t=0.384，P＞0.05)，溶血率比较差异无统计学意义(t=1.429，P＞0.05)。无菌试验均无细菌生长，容量及外观均正常，且两组洗涤红细胞各项检测结果均在国家标准范围内。

2.2MAP混悬洗涤红细胞在保存期内各时间点检测结果分析（表2）

MAP混悬洗涤红细胞在4℃冰箱分别保存7d，14d，21d，35D上清蛋白含量、溶血率呈上升趋势。以21天为界，上清蛋白含量与制备当天比较差异有统计学意义（P<0.05）。21天溶血率与制备当天比较差异有统计学意义（P<0.05），但各项检测值均在国家标准范围内。各时间点上的血红蛋白含量和制备当天比较差异无统计学意义（P＞0.05)，均无细菌生长。各时间点上的洗涤红细胞外观均正常。

3.讨论

传统的洗涤红细胞制备完成后由生理盐水保存，不能为红细胞提供能量物质，因此，最迟24小时内必须输注。使用时由医院提出申请，成分科开始制备，期间患者等待时间较长。MAP保存液中含有枸橼酸、枸橼酸钠、葡萄糖、磷酸二氢钠、、氯化钠、腺嘌呤(ATP)、甘露醇等有效成分能为红细胞代谢提供能量。枸橼酸/枸橼酸钠作为缓冲对起着调节PH值的作用，磷酸二氢钠可以为红细胞代谢提供磷酸盐，减缓2，3-DPG含量的下降速度，又能防止红细胞聚集；适量的氯化钠是维持细胞内外渗透压的重要物质；ATP作为红细胞的供能物质，在维持红细胞内2，3-DPG含量方面起着重要作用；在MAP保存液中加入甘露醇可有效提高保存液的稳定性，保证细胞膜完整，减缓红细胞溶解，为减缓红细胞衰老、防止红细胞损伤提供优质的保存环境[4]。因此，在用生理盐水洗涤后的红细胞中添加MAP，洗涤红细胞的保存期可由原来的24小时延长至采血后35天，血库和成分科可根据平时的供需特点设计一定量的库存计划，成分科可按计划制备相应的洗涤红细胞备用，医院使用时可直接从血库领取，不需等待，大大节省了时间，为救治患者赢取宝贵时间。

从检测结果中可以看出，生理盐水和MAP混悬的洗涤红细胞各项指标均符合国家标准，且两组洗涤红细胞在制备当天血红蛋白含量、上清蛋白含量，溶血率比较均差异无统计学意义。MAP混悬的洗涤红细胞在保存期内7d、14d、21d、35d的血红蛋白含量、上清蛋白含量、溶血率随着时间的推移有所变化，在21天时上清蛋白含量和溶血率与制备当天比较差异有统计学意义(P<0.05)，但检测值仍在国家标准范围内，血红蛋白含量的变化与制备当天比较差异无统计学意义，无菌试验均无细菌生长。因此，MAP保存的洗涤红细胞在保存期35天内各项指标均符合GB18469-2012《全血及成分血质量要求》，可用于临床。

【参考文献】

[1]陈小伍，于新发，田兆嵩，输血治疗学[M].北京:科学出版社，2012:109-109.

[2]曾四海，黄可君，胡文娟，等.洗涤红细胞制备保存工艺的确定[J].中国输血杂志，2012，25（10）:976-977.

[3]段志倩，石洁，郑建勇，等.MAP保存洗涤红细胞质量评价[J].临床血液杂志，2016，29(2)：144-145.

[4]刘鹤，唐小英，石瑞林.红细胞保存技术研究进展[J].医药论坛杂志，2008，29(9):124-127.