简易胸水细胞石蜡制作法

俞娇

【中图分类号】R228【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）05-0394-01

细胞石蜡包埋法已应用很久,目前国外普遍采用自动化制作细胞蜡块,但该方法设备成本较高且技术较为复杂。我院在实践中摸索出一种简易胸水细胞石蜡制片法,主要用于胸水恶性肿瘤细胞的诊断,不但能做常规检查,还能做免疫组化及特殊染色,实用效良好,现将此法介绍如下。

1材料与方法

1.1材料临床送检可疑肿瘤患者的胸水18例,其中6例胸水离心后因细胞含量过少而未用。

1.2方法取送检胸水瓶底部分的液体放入4支10ml塑料离心管中,每支约加8ml,2000rpm离心10min,弃上清液,2支作为对照涂片,另外2支离心管中加入95%酒精约8ml,2000rpm离心10min,静置2h后弃酒精,此时沉淀物形成类圆形固体。将沉淀物取出直接放入包埋盒内,再经10%福尔马林固体后按常规脱水、包埋、切片、染色。

2结果

光镜下细胞集中,密度高,增生间皮细胞及癌细胞多集中在切片的中心及周边。背景为多少不等的红染和均质的纤维蛋白样物质,以及中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞等炎症细胞。因胸水用95%酒精和10%福尔马林双重固定,细胞略有收缩,但基本形态不变。

3讨论

3.1经本法做成的胸水石蜡切片与胸水涂片相比有如下优点;①所有的细胞都能收集起来,提高了细胞的阳性检测率,并且可以长期保存标本;②有些细胞的特殊排列结构在切片中要比涂片更清楚、多见;③需要时可做免疫组化及特殊染色进一步明确诊断;④由于细胞经95%酒精固体结合,切片免疫组化染色效果比涂片效果好,着色清晰;⑤由于石蜡包埋增加了肿瘤细胞的阳性检出率,再加上石蜡切片做免疫组化不易而飞片,所以经本法制作后做免疫组化染色假阴性率底于胸水涂片。

3.2与其他细胞石蜡包埋方法相比有如下特点:①不需要添加琼脂等辅料,胸水内的蛋白性物质经离心固定形成自然支撑物;②胸水离心沉淀物再经酒精离心、静置固定呈块状,可不用滤纸包,制片时不易飞片且切片视野集中。本方法操作简单、成本低、制片效果良好,有较好的实用价值。

3.3注意事项:①包埋时注意将沉淀物近离心管底侧包埋在石蜡块切面侧;②酒精离心后放置时间不易过长,最好为1.5～2h,时间过短不易形成固体,包埋较困难,时间过长则组织变硬,切片质量差;③个别高度怀疑肿瘤的病例,如果用10ml离心管离心沉淀物过少不能做活检,可改用2个50ml大离心管分别加约40ml胸水重做。

另外,我们还尝试做过临床怀疑肿瘤患者的尿液1例、腹水3例。尿液因离心沉淀物过少未能做石蜡包埋。3例送检腹水的石蜡切片中细胞数均较少,只有－例找到癌细胞。