自然流产患者封闭抗体状态的观察

贺育兰

【摘要】目的：分析自然流产患者的封闭抗体状态。方法：选择湖南省娄底市中心医院生殖中心在2013年11月至2016年10月期间接诊的自然流产的患者390例，所有入选病例都接受封闭抗体检测，综合分析患者检测的结果。结果：原发性RSA组的封闭抗体阴性率为81.88%，继发性RSA组为70.37%，原发性偶发性自然流产组为56.96%，继发性偶发性自然流产组为43.10%，组间比较差异显著（P＜0.05）；原发性RSA组的封闭抗体阴性率与继发性RSA组比较差异显著（P＜0.05）；但继发性RSA组的封闭抗体阴性率和原发性偶发性自然流产组比较则无显著差异（P＞0.05）；并且，原发性偶发性自然流产组的封闭抗体阴性率和继发性偶发性自然流产组比较也无显著差异（P＞0.05）。结论：对于自然流产病患来说，其封闭抗体水平多呈现出阴性，且原发性RSA患者封闭抗体阴性率更高。

【关键词】自然流产；状态观察；封闭抗体；检测

自然流产多为早期流产，病因繁杂。其中封闭抗体（APLA）与自然流产的关系是近来研究的热点。封闭抗体是妊娠后母体为保护胎儿、胎盘等组织免受免疫攻击而产生的保护性抗体，封闭抗体产生障碍可以导致早期妊娠的丢失。本文通过观察不同类型自然流产患者封闭抗体的状态以进一步阐明封闭抗体与自然流产的关系。

1资料与方法

1.1病例来源2013年11月至2016年10月在湖南省娄底市中心医院生殖中心就诊的自然流产的患者390例，其中原发性复发性自然流病患有138例，继发性复发性自然流产病患有108例，原发性偶发性自然流产病患有86例，继发性偶发性自然流产病患有58例。

1.2病例纳入标准

390例入选病例均为发生在12周以前的早期自然流产病患，且就诊时未孕，距离最后一次妊娠9个月以内。其中，原发性自然流产即：患者从未有一次妊娠孕周超过22w[2]；继发性自然流产即：自然流产发生之前至少有一次活产史[2]；偶发性自然流产即：既往仅自然流产过1次；复发性自然流产（recurrentspontaneousabor-tion，RSA）即：连续发生≧2次的自然流产。根据以上诊断标准，将390例入选病例分成4组，详细如下：

1.2.1原发性复发性自然流产组（n=138）患者平均年龄为（28.6±3.7）岁；平均流产次数为（3.1±0.6）次。

1.2.2继发性复发性自然流产组（n=108）患者平均年龄为（28.3±3.6）岁；平均流产次数为（3.0±0.5）次。

1.2.3原发性偶发性自然流产组（n=86）患者平均年龄为（28.1±3.2）岁。

1.2.4继发性偶发性自然流产组（n=58）患者平均年龄为（27.9±3.4）岁。

1.3检测方法

1.3.1所用试剂HLA特异性IgG抗体检测试剂盒（ELISA，100测试），由“美国OneLambda公司”提供。

1.3.2操作步骤1、在对照孔和测试孔中分别加入稀释的对照品和待测血清10ul；2、37℃孵育45分钟；3、洗版、用力扣干后对照孔和测试孔每孔加入稀释的酶标抗体10ul；4、37℃孵育30分钟；5、洗板、用力扣干，将底物A、B混匀后加入各孔10ul；6、37℃避光孵育10分钟后每孔加入5ul终止液；7、立即记录结果：蓝色为阳性，无色为阴性。

所有患者在进行封闭抗体检查的同时均须检查双方染色体、宫颈分泌物的沙眼衣原体及解脲支原体、抗心磷脂抗体、抗子宫内膜抗体、抗精子抗体、ANA、性激素、甲状腺功能、TORCH及男方精液等。

1.4临床观察指标

综合分析各组封闭抗体检测的结果，比较封闭抗体阴性率。

1.5统计方法应用SPSS17.0软件进行卡方检验，以P＜0.05判断各组百分率是否具有统计学意义，两两比较，P值的判定标准校正为＜0.008。

2结果

*与其他3组比较，P＜0.001；a与原发性偶发性自然流产组比较，P＞0.05；b与继发性偶发性自然流产组比较，P＞0.05

各组封闭抗体的阴性率分别为81.88%、72.04%、56.98%、43.10%，各组阴性率的差异有统计学意义（χ2=33.463，P＜0.001）。原发性RSA组与继发性RSA组比较，APLA阴性率的差异具有统计学意义（χ2=4.512，P=0.034）；继发性RSA组与原发性偶发性自然流产组比较差异无统计学意义（χ2=3.748，P=0.053），原发性偶发性自然流产组与继发性偶发性自然流产组比较差异无统计学意义（χ2=2.669，P=0.102）。

3讨论

自然流产对母亲及家庭造成较大心理及生理创伤。早期自然流产病因包括：胚胎染色体异常、母体全身性疾病、生殖器官异常、内分泌异常、强烈应激与不良习惯、免疫功能异常、父亲因素、环境因素等[3]。与流产相关的免疫因素主要分为自身免疫因素和同种免疫功因素，其中同种免疫性RSA约占免疫性RSA的70%[4]，主要是因为父母的HLA位点相同频率过高，导致母体无法针对胎儿的父系抗原产生足够的封闭抗体，即父系抗淋巴细胞抗体（Antipaternallymphocyteantibody，APLA）[4]，从而导致母体对孕囊的种植和胎盘的生长产生免疫排斥，导致早期自然流产[5]。APLA在妊娠初期开始产生，于妊娠12周左右达到高峰，正常分娩史的妇女77%为封闭抗体阳性[6]，黄永富、王冲报道，原发性RSA组封闭抗体的阳性率仅为7.47%，继发性RSA组封闭抗体阳性率为14.06%[4]。本研究中原发性RSA组、继发性RSA组、原发性偶发性自然流产组、继发性偶发性自然流产组4组的封闭抗体阴性率的差异具有统计学意义。其中原发性RSA组封闭抗体的阴性率为81.88%，与文献报道的73.2%-92.53%相符合[4，5]，原发性RSA组封闭抗体的阴性率大于继发性RSA组。

参考文献：

［1］谷春会，梁文君，付璐璐综述；郑连文审校复发性自然流产危险因素的研究进展中华男科学杂志NationalJournalofAndrologyZhonghuaNanKeXueZaZhi2013，19（8）：758－762.

[2]李晓梅，许燕雪，江森.同型半胱氨酸代谢异常与不明原因反复性自然流产相关性研究[J].生殖医学杂志，2003，12（4）；2016-210.

[3]BerryCW，BrambatiB，EskesTKAB，etal.TheEu-ro-teamearlypregnancy（ETEP）protocolforrecur-rentmiscarriage[J].HumReprod，1995，10（6）：1516-1520.

[4]黄永富，王冲.封闭抗体检测在复发性自然流产患者淋巴细胞主动免疫治疗中的应用[J].黑龙江医学，2014，4（38）；364-368.

[5]张劲丰，苏荣，庄健海，吴英，安宏亮，庞俏茹，吴丹，何娴，简少珍，杨延斌；封闭抗体在不同孕育状态妇女中的分布规律[J].中国妇幼保健，2013，28（2）：298-300.

[6]余江，张进，何晓宇。封闭抗体在反复自然流产中的作用[J].中华妇产科杂志，2000，35（4）：248