微柱凝胶免疫检测技术在临床交叉配血中应用

姜淑杰

（吉林省柳河县医院血库135300）

【关键词】微柱凝胶交叉配血

【中图分类号】R446【文献标识码】B【文章编号】2095-1752（2014）03-0347-02

在临床输血中，输血前交叉配血是防止输血差错一道安全岗。因此交叉配血操作方法必须准确、可靠。才能保证输血安全。我院2011年引进微柱凝胶免疫检测技术应用临床交叉配血工作。配血结果准确、无误。均无差错事故发生。总结如下：

微柱凝胶免疫检测技术原理：将分子排阻层析原理应用于血型血清学检测，即在充有凝胶的微柱腔中，加入红细胞和血清。如果血清中有该红细胞特异性抗体，则形成红细胞免疫复合物，在一定离心力下，该复合物不能通过凝胶间隙而浮于胶表面或悬于胶中；如果血清中无该红细胞特异性抗体，则不能形成红细胞免疫复合物，在一定的离心力下，分散的红细胞可以通过凝胶间隙沉于微柱腔尖底部。微柱凝胶免疫反应的本质，就是红细胞凝集试验。

一、准备工作

1标本采集：用抗凝管采集被检对象静脉血，将该同一人血液分别制备成红细胞标本和血浆标本。

血浆标本的制备：将抗凝血2000—3000离心1-2min，取上清。该上清不得有絮状物或颗粒。

红细胞标本的制备：用红细胞稀释液或生理盐水配制成0.8%红细胞悬液。

微柱凝胶卡的准备:首先观察外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，然后将卡平衡至室温（18—25℃），平衡后用离心机离心2—3min。

二、配血卡操作步骤

1.将准备好的试剂卡做好标记，姓名、床号；撕开卡的封膜；

2.将受血者与献血者的红细胞和血清分离，分别将受血者与献血者的红细胞配成0.8%悬液；

3.将献血者血细胞悬液50ul与受血者血清50ul先后加入主测管中；

4.将受血者血细胞悬液50ul与献血者血清50ul先后加入次测管中；

5.将配血卡用孵育器37℃孵育15min；

6.将卡用离心机离心5min（900rpm2min,1500rpm3min）；

7.肉眼观察结果。

三、结果判定

1阴性结果：红细胞完全沉降于凝胶管尖底部，表明受血者与献血者的血型相合。

2阳性结果：红细胞凝集快位于凝胶表面或凝胶中，表明受血者与献血者的血型不相合

四、使用中的注意事项

1凝胶卡有断裂、气泡、干胶时，都会阻碍红细胞的通过。该卡不能使用。

2必须使用专用离心机，以确保结果的准确。

3每日实验前，先取出试剂和凝胶卡、放置一段时间至室温，以防冷凝集

4必须在有效期内使用，标注卡号。

5加样器具禁止接触微柱腔内壁，操作时向反应腔内先加入红细胞后加入血清。

6严禁使用非抗凝血标本配制的红细胞悬液，以避免出现假阳性结果

7被测定的血清中，蛋白含量异常时会出现假阳性结果，红细胞凝集团会被误认为是阳性结果

8不准确加样均可干预结果

9实验温度过低，因凝胶颗粒活动性减少，单个红细胞穿过时困难，容易出现假阳性结果

10由于抗原有效期问题，与新鲜红细胞相比，存放久的红细胞抗原反应会相应的减弱，破碎的红细胞膜浮于胶中或胶面

11血浆或血清中含有颗粒状的物质，可能会阻碍红细胞通过凝胶颗粒间隙，应对这样标本进行离心处理

12加样红细胞亦不应含有颗粒状物质，此种物质同样会阻碍红细胞通过凝胶颗粒间隙，建议红细胞稀释液。

13禁用严重溶血的标本，它会对结果的判读产生强烈的干扰。

14多种药物的使用与直抗实验的阳性结果有关。

15禁止使用被污染的标本和材料

16不同抗原性红细胞的混合标本、多凝集红细胞如（T/Tn）或亚型红细胞等可能出现混合反应

17被酶过度处理的红细胞将会产生非特异性凝集

18血清和血浆标本必须充分去纤维蛋白，否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，阻碍阴性红细胞沉降，呈假阳性反应

19如在微柱凝胶中出现溶血现象，强烈表示为红细胞抗原抗体反应阳性，应对此标本一定认真分析，报告上级领导并组织讨论

20若结果为1+需进一步分析。

21离心力过大，使弱阳性成为阴性格局

22应放在18-25℃储存。如长期放在4℃冰箱储存、建议每周1-2月取出用专用离心机离心一次、以防止干胶或产生气泡。

总之：在2011-2012年我院有3210例输血患者使用微柱凝胶免疫检测技术方法交叉配血、有2例主测和次测反应不合、是因为患者血浆中含有不完全抗体造成。由于我们使用微柱凝胶免疫检测技术，不但提高工作效率、而且提高输血患者安全，此方法操作简单，标本用量少、定量操作、机器敏感性强，工作程序和结果判定都规范化。达到安全用血目的。

参考文献

[1].郭齐祥；邓继业；吉林省医疗机构输血科管理指南.

[2].长春博讯公司生物技术有限公司;微柱凝胶免疫检测技术操作手册.