三原县疾控中心微生物实验室考核质控报告

王晓梅

【中图分类号】R37【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）28-0294-01

【摘要】为了保证各实验室间的微生物检验质量，及微生物检验工作的准确性，提高微生物实验室的检验水平，咸阳市疾控中心对其下属的各县发放盲样未知菌，进行质控考核。质控考核的结果报告如下：

【关键词】细菌鉴定质控考核

1材料与方法

1.1质控菌种

半固体琼脂菌种一份，为食源性致病菌混合物，有致病菌1-2种，由咸阳市疾控中心发放。编号为W-007，要求检验人员一周内报告菌株鉴定结果

1.2试剂

本次检测中所采用的成品培养基和细菌微量生化鉴定管，由北京陆桥技术有限公司提供。诊断血清是由卫生部兰州生物制品研究所提供，均在有效期内使用，自配试剂依据，GB4789-2003《食品卫生微生物学检验》等资料完成。

1.3检验鉴定

主要是依据GB4789-2003《食品卫生微生物学检验》《卫生防疫细菌检验》（何晓青）。

1.4方法

将质控样先接种到普通的营养琼脂平板上，置37℃培养24小时，观察生长情况，根据菌落特点，判断出有两种不同的菌落。然后将两种菌落分别涂片，革兰氏染色镜检，根据镜检结果，菌落的特点，有针对性的接种三糖铁琼脂、SS、血琼脂平板、高盐甘露醇琼脂平板。置37℃培养24小时。观察菌落特点，观察三糖铁琼脂上的初步生化反应，取菌苔涂片革兰染色镜检，根据镜检结果，生长特点，初步生化反应，选择鉴定方向，取三糖铁琼脂斜面菌苔做生化反应后，对疑似菌进一步做血清凝集试验。

2结果

2.1菌体形态

2.1.1一号菌：革兰氏阳性大小一致的球菌，呈双或葡萄状排列。

2.1.2二号菌：革兰氏阴性的无芽胞短小杆菌

2.2生长特性

一号菌:在普通的营养琼脂上是较小的菌落，呈黄色、浑浊、圆形、突起、血平板上菌落呈金黄色圆形、突起。大小约1.5mm-2.5mm。光滑湿润，在菌落周围有透明的溶血环，在高盐甘露醇琼脂平板上，生成淡橙黄色，圆形突起。细小光滑的菌落

二号菌：在营养琼脂上，无色，半透明，圆形，湿润的菌落，在SS平板上，菌落无色半透明，中等大小，圆整湿润，中心稍隆起，并带黑色。

2.3生化反应

一号菌：血浆凝固酶+发酵葡萄糖产酸

二号菌：三糖反应。分解葡萄糖产酸产气，不分解乳糖和蔗糖。

H2S+动力+赖氨酸脱羧酶+

KCN-尿素-–靛基质-

2.4血清凝集试验

二号菌：该菌与沙门氏菌属A-F多价诊断血清凝集明显+++，盐水对照不凝。

2.5结果判定

2.6根据以上两种菌的革兰氏染色镜检，在分离培养基上的菌落特征，生化反应，血清凝集试验结果判定如下：

一号菌：为金黄色葡萄球菌

二号菌：为沙门氏菌属

3讨论

3.1开展室间细菌鉴定质控考核，可以锻炼微检人员的操作技能，提高对各种致病菌的识别能力。

3.2之所以用普通琼脂平板作为首选平板，是考虑到多数食源性致病菌对营养要求不高，都可以较好地在培养基上面生长。从而达到分离目的。

3.3涂片的好坏对结果有影响，一定要涂成均匀，薄厚适中的菌膜。否则过厚的话，易在染色过程中脱落。

3.4革兰氏染色镜检，在盲样菌检测中起重要作用。通过染色镜检可以观察菌体形态，排列方式和染色性质，初步判断出可能存在哪种细菌，为下一步选择性培养打好基础。

3.5掌握正确的革兰氏染色方法也是非常重要的，尤其是加入第三液95%的乙醇脱色时，一定要脱净。但时间还必须控制在30秒左右。

3.6在平板上划线用以分离细菌。以求获得不同的单个菌落。这在微生物日常工作中显得非常重要。最好采用分段划线法。

3.7对于细菌的生化反应，我们应根据涂片镜检菌落特点，初步生化决定鉴定的方向。选择疑似菌非常典型的生化反应进行试验。缩短了工作时间，提高了工作效率。

3.8在作食源性致病菌时。应严格无菌操作，防止质控样被污染和样品中的病原菌扩散。操作者要做好自身防护，防止实验室感染。

注：+表示阳性，-表示阴性。

参考文献

[1]gB4789-2003食品卫生微生物学检验.S.北京，中国标准出版社，2003.

[2]何小青等卫生防疫细菌检验m.新华出版社.1989年9月.