正柴胡饮颗粒中芍药苷的含量测定

申劲松

【摘要】目的：建立高效液相色谱法测定正柴胡饮颗粒中芍药苷含量的方法，并探讨该方法的特点。方法：本文采用日本岛津LC-10A高效液相色谱仪；Shim-PackCLCODS-3色谱柱（150mmx4.6mm，5μm）；流动相：乙腈-水（15：85）；检测波长：230nm。结果：①线性回归方程为：A=12319C+4666，r=0.9994（n=5）。②在10h内芍药苷的峰面积值基本稳定，其RSD分别为1.90％。③RSD为0.87％，表明其精密度良好。④芍药苷含量为4.29、4.33、4.32、4.40、4.54、4.29mg/g，RSD为1.27％。⑤平均回收率为97.12％，RSD=3.16％。⑥批号090508，090603，090705的含量分别为4.1342、3.7597、4.2746mg/g，RSD分别为1.61％、1.73％、1.50％。结论：高效液相色谱法测定正柴胡饮颗粒中芍药苷含量具有简便、快捷、重现性好的特点，可以作为正柴胡饮颗粒中芍药苷含量的质量控制方法。

【关键词】正柴胡饮颗粒高效液相色谱法芍药苷

【中图分类号】R927.2【文献标识码】B【文章编号】2095-1752（2012）11-0292-01

正柴胡饮为明代张景岳《景岳全书》中的解表平散代表方，由柴胡、陈皮、防风、赤芍、生姜、甘草组成，具有表散风寒，解热止痛之功能，可用于外感风寒初起：发热恶寒、无汗、头痛、鼻塞、喷嚏、咽痒咳嗽、四肢酸痛等症；适用于流行性感冒初起、轻度上呼吸道感染等疾患。赤芍的主要活性成分为芍药苷[1]。芍药苷的测定方法在《中国药典》2005年版一部有多处记载，稳定且成熟，故选芍药苷为正柴胡饮含量测定的质量控制指标之一[2]。本文采用高效液相色谱法测定正柴胡饮颗粒中芍药苷的含量，该方法具有简便、快捷、重现性好的特点，现将测定结果报道如下：

1仪器与试剂

1.1仪器HPLC：日本岛津LC-10A高效液相色谱仪；SPD-10A型紫外检测器（日本岛津公司）；C-R6A数据处理机。AD-2型百万分之一电子天平（美国）；BP210S型电子天平（德国）；AS6150D型超声清洗器（天津）。

1.2试剂芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号110925—200452供含量测定用）；正柴胡饮胶囊（批号：090508，090603，090705）和缺赤芍阴性制剂均由神鹿双鹤药业有限公可提供；乙腈（色谱纯）；水（重蒸水）；其它试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1方法①色谱条件：Shim-PackCLCODS-3色谱柱（150mmx4.6mm，5μm）；流动相：乙腈-水（15：85）；检测波长：230nm。流速：1.0ml/min；进样量：20μl，流动相经0.45μm滤器滤过。在此条件下，芍药苷与其他组份均可达到基线分离，理论板数芍药苷为：5883。②对照品溶液的制备分别精密称取置P205干燥器中真空干燥24h芍药苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含芍药苷0.02mg的溶液，即得[3]。③供试品溶液的制备取本品2g，研细（过三号筛），精密称定，置锥形瓶中，精密加30％乙醇25ml，密塞，称定重量，超声处理1h。用30％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液5ml，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径1.0cm，柱高12cm），用30％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣用稀乙醇溶解，转移10ml量瓶中，并稀释至刻度。取3ml，置25ml量瓶中，稀释至刻度。同法，制得缺赤芍的阴性对照液。进样，记录色谱图。

2.2结果①线性关系的考察精密吸取芍药苷对照品溶液（0.103g/L）2.0，4.0、6.0、8.0、10ml分别置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。分别精密吸取20μl，依次注入液相色谱仪中，按上述色谱条件测定，以芍药苷的浓度为横坐标，相应的峰面积积分值为纵坐标，计算，得线性回归方程为：A=12319C+4666，r=0.9994（n=5）（如图1所示）。②稳定性试验取供试品溶液，按供试品测定方法.每隔2h进样20μl，连续进样5次，结果表明在10h内芍药苷的峰面积值基本稳定，其RSD分别为1.90％。③精密度试验取供试品溶液，连续进样5次，进样量相同，按上述色潜条件测定吸收峰面积值，峰面积值基本稳定，其RSD为0.87％，表明其精密度良好。④重复性试验取同一批号样品（批号：090603）6份，照供试品溶液制备方法制备并测定，结果芍药苷含量为4.29、4.33、4.32、4.40、4.54、4.29mg/g，RSD为1.27％。⑤加样回收试验精密称取已知含量的正柴胡饮颗粒（批号：090705）1g，共6份，分别精密加入芍药苷对照品适量，按上述含量测定方法制备供试品溶液，依法测定，计算回收率，结果平均回收率为97.12％，RSD=3.16％（如表1所示）。⑥样品测定按上述方法测定3批正柴胡饮颗粒样品，结果批号090508，090603，090705的含量分别为4.1342、3.7597、4.2746mg/g，RSD分别为1.61％、1.73％、1.50％。

图1正柴胡饮颗粒的HPLC检测结果

3讨论

正柴胡饮已有数百年的应用历史，其安全性和有效性得到了一致认可，处方的合理性闻名于海内外。该处方通过数百年的临床应用，其效果得到了有效的证实，未发现明显的毒副反应。在该药的质量控制方面，所见论述不多，需深入研究其定性鉴别及定量测定方法，以提高它的质量可控性[4]。本文采用HPLC的方法测定正柴胡饮颗粒中芍药苷的含量，结果发现该方法测定正柴胡饮颗粒中芍药苷含量具有简便、快捷、重现性好的特点，可以作为正柴胡饮颗粒中芍药苷含量的质量控制方法。

参考文献

[1]王笑笑，王也.RP-HPLC法测定正柴胡饮颗粒中橙皮苷的含量[J].海峡药学，2009，21（8）：47-49.

[2]余颖.HPLC法测定正柴胡饮胶囊中橙皮苷的含量[J].安徽医药，2009，13（12）：1485-1486.

[3]程五生，孙军业.HPLC法测定正柴胡饮胶囊中芍药苷的含量[J].安徽医药，2007，11（11）：989-990.

[4]董红红，秦雪梅，郭小青，等.正柴胡饮药理与临床应用研究[J].山西中医，2007，23（2）：56-58.