天舒胶囊对大鼠脑血流量及血管活性物质的影响

刘静1王红月2商立新3

摘要：采用激光多普勒血流仪检测硝酸甘油型偏头疼模型大鼠脑血流量变化及天舒胶囊对其影响，通过研究比较得出天舒胶囊可抑制硝酸甘油诱导的偏头痛大鼠脑血流量增加，抑制血管的过度舒张，调节血管的舒缩平衡，其作用机制可能与调节5-HT、CGRP、PGE2、NO、ET相关血管活性物质表达有关。

关键词：偏头疼；脑血流量；降钙素基因相关肽；内皮素；一氧化氮

偏头疼（migraine）是临床常见的多发性神经内科疾病，发病机制十分复杂，尚无定论，为了解天舒胶囊治疗偏头痛过程中对已扩张血管的影响及其可能机制，故通过本研究旨在探讨天舒胶囊对偏头疼中发作过程中血管舒缩功能异常的调节作用，及其对部分相关血管活性物质表达的影响。

1材料与方法

1.1实验材料

1.1.1实验动物

SD大鼠，SPF级，体重200-220g，由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供，许可证号SCXK（沪）2013-0016。

1.1.2主要试剂

天舒胶囊，400g生药材先水提再醇提，得水提浸膏137g，醇提浸膏59.5g，每粒胶囊约含生药材0.98g。硝酸甘油；西比灵；人工脑脊液；五羟色胺（5-HT）、降钙素基因相关肽（CGRP）放免试剂盒，前列腺素E2（PGE2）、内皮素（ET）酶联免疫试剂盒，一氧化氮（NO）硝酸还原酶法试剂盒。

1.1.3主要仪器与设备

IN191激光多普勒血流仪；MedLab-U/8C生物信号采集处理系统；5804R低温高速离心机；微型手持式颅钻-78001；ZH-ZKL小动物手术显微镜；XH-6020全自动放免计数仪；STAT?FAX?2100全自动酶标仪；7160全自动生化仪。

1.2实验方法

1.2.1分组与给药

取30只大鼠，随机分为五组，每组6只。（1）正常对照组：双蒸水；（2）模型对照组：双蒸水；（3）西比灵组：0.90mg/kg；（4）天舒胶囊低剂量组：1.07g生药/kg；（5）天舒胶囊高剂量组：2.14g生药/kg。以上各组按剂量灌胃给药，给药容积为1ml/100g，连续给药七天。

1.2.2大鼠脑血流量检测

于末次灌胃给药60min后，腹腔麻醉，俯卧位固定，行颅骨开窗术（以矢状缝外侧2mm，冠状缝后侧1.5mm，横沟前侧1.5mm，矢状窦内侧1.5mm，用直径1mm的平头颅骨钻打薄四周至微穿，去除颅骨及硬脑膜，制备成约1cm2?骨窗，打磨过程不断以0.9%冰生理盐水降温，打磨完毕不断滴注预热至37℃的人工脑脊液保持湿润），经激光多普勒血流仪检测大鼠脑血流量，稳定20min后，皮下注射硝酸甘油10mg/kg，正常组皮下注射等量生理盐水，继续监测30min内大鼠脑血流量变化，按下式计算5、10、15、20、25、30min大鼠脑血流量变化百分率：大鼠脑血流量变化百分率=（造模后大鼠脑血流量—造模前大鼠脑血流量）/造模前大鼠脑血流量×100%。

1.2.35-HT、CGRP、PGE2、ET、NO含量测定

检测结束后，立即腹主动脉取血，3000r离心15min取上清，断头取脑组织，采用全自动生化分析仪和ELISA试剂盒测定脑组织中5-HT、CGRP、PGE2和血清中ET、NO含量。

1.3统计学处理

采用SPSS17.0统计软件进行分析。符合正态分布和方差齐性的组间比较采用单因素方差分析组内两两比较采用LSD检验；符合正态分布但不符合方差齐性的组间比较采用单因素方差分析组内两两比较采用Dunnett′sT3检验；不符合正态分布的正态化转换后采用上述方法进行检验，实验结果均以±s表示。

2结果

2.1天舒胶囊对硝酸甘油型偏头疼大鼠脑血流量影响

与正常组比较，除30min外，模型组大鼠其余各时间点脑血流量显著增加（P<0.01）。与模型组比较，西比灵组、天舒胶囊低剂量组、天舒胶囊高剂量组均能不同程度的抑制硝酸甘油诱导的脑血流量增加（P<0.05，P<0.01）。与正常组比较：##P<0.01；与模型组比较：*P<0.05，**P<0.01。

天舒胶囊对硝酸甘油型偏头疼大鼠血清中NO、ET含量的影响。与正常组比较，模型组大鼠血清中NO、ET含量显著升高（P<0.01）。与模型组比较，西比灵组、天舒胶囊低剂量组、天舒胶囊高剂量组均能显著降低大鼠血清中NO、ET含量（P<0.01）。与正常组比较：##P<0.01；与模型组比较：*P<0.05，**P<0.01

天舒胶囊对硝酸甘油型偏头疼大鼠脑组织中5-HT、CGRP、PGE2含量的影响与正常组比较，模型组大鼠脑组织中5-HT、CGRP、PGE2含量均显著升高（P<0.01。

3结论

本实验通过复制硝酸甘油型大鼠偏头疼模型，观察天舒胶囊的干预作用。结果表明西比灵及天舒胶囊均能显著抑制硝酸甘油诱导的大鼠脑血流量增加，下调血清中NO、ET浓度，降低脑组织中5-HT、CGRP、PGE2含量，推测天舒胶囊天麻和川芎配伍可协同调节硝酸甘油型偏头疼大鼠脑血管舒缩功能障碍，作用机制可能与其调节相关血管活性物质表达有关，但具体机制仍需进一步研究。

参考文献：

[1]李佳川，头风愈滴丸对偏头痛防治作用及其机制研究[D]：[硕士学位论文].成都：成都中医药大学，2008.

[2]伍孟军，魏安宁，续平，等.血管内皮功能与偏头疼的研究进展[J].中国动脉硬化杂志，2006，14（10）：919-20.