振阳痛康丸（浓缩丸）质量标准提升的研究

邱海蕴，魏俊德，袁才琼

邱海蕴，1970.10,女，汉，湖北宜昌，大学本科，医学学士学位，副主任药师，药品检验及分析

魏俊德男，1963.8，主任药师，大学本科，学士学位，中药学

摘要目的：对振阳痛康丸（浓缩丸）质量标准进行提升，以更好地控制药品质量。方法：增加蛇床子的TLC鉴别方法；增加淫羊藿中淫羊藿苷的HPLC含量测定方法，采用DiamonsilC18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）,乙腈—0.05%磷酸溶液（25：75），流速1.0mL·min-1,检测波长为270nm。结果：薄层色谱斑点清晰，阴性对照无干扰；淫羊藿苷进样量在0.0626～1.879μg范围内线性关系良好(r=1.0000)，平均回收率为98.0%，其RSD为0.4%（n=6）。结论：所建方法简便、准确、重现性好，能更好地控制该制剂的质量。

关键词振阳痛康丸（浓缩丸）；薄层色谱法；高效液相色谱法；质量控制

【中图分类号】R286【文献标识码】A【文章编号】1001-5213(2016)08-0278-01

振阳痛康丸（浓缩丸）是狗肾、淫羊藿、白芷、黄精、穿山龙、蛇床子、阳起石、威灵仙、鸡矢藤、延胡索、冰片、甘草等12味中药组成的中药复方制剂。用于肾精不足所致的疲困乏力，性功能减退及劳累过度引起的周体疼痛等[1]。为提升制剂质量标准，保证临床疗效，本文建立了蛇床子的薄层色谱鉴别方法，并采用高效液相色谱法对振阳痛康丸（浓缩丸）主要药味淫羊藿的主要成分淫羊藿苷进行测定，方法准确、可靠。

1仪器和试药

Watrese2695高效液相色谱仪；METTER-AE240电子分析天平；CAMAG紫外观测箱蛇床子素对照品（中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用，编号为110822-200406）；淫羊藿苷对照品（中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用，编号为110737-200415）；乙腈为色谱纯；水为超纯水；其它试剂均为分析纯。振阳痛康丸（浓缩丸）3批（湖北民族学院附属医院制剂室批号：140109、140308、140809）

方法与结果

2.1鉴别[2]

取本品6g，研细，加乙醇30ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，用乙醚振摇提取2次，每次10ml，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取蛇床子素对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯（17:3）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。见图1。

2.2淫羊藿苷含量测定[2,3,4]

2.2.1色谱条件

色谱柱：DiamonsilC18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈-0.05%磷酸溶液（25：75）；流速1.0mL·min-1；检测波长为270nm；柱温：25℃

2.2．2溶液的制备

2.2.2.1对照品溶液精密称取60℃减压干燥14小时后的淫羊藿苷对照品19.57mg，置25ml容量瓶中，超声处理（功率300w，频率50kHz）15分钟，用甲醇溶解并稀释至刻度，作为储备液。精密量取储备液2ml，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。作为对照品溶液。

2.2.2.2样品溶液取本品，研细，取约1g，精密称定，加70％甲醇溶液20ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，用70％甲醇分次洗涤容器，滤液和洗液合并，水浴蒸干。残渣用甲醇洗入10ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

2.2.2.3阴性对照溶液取除淫羊藿外按处方量配置的样品按样品溶液制备方法制备阴性对照溶液。

2.2.3系统适用性试验

分别取对照品溶液、样品溶液、阴性对照溶液20μl注入色谱仪，记录色谱图，见图2。淫羊藿苷保留时间约为32.4分钟。阴性对照色谱图在淫羊藿苷峰位置无干扰峰，即本实验条件下淫羊藿苷峰与其它组分分离完全，对测定无干扰。理论塔板数以淫羊藿苷峰计算为12500。

2.2.4标准曲线绘制

精密量取按“2.2.2.1”项下方法配置的对照品溶液1，5，10，20，30μl注入色谱仪。以色谱峰面积为纵坐标，以进样量（μg）为横坐标进行线形回归，回归方程为：Y=2306468X—37400r=1.0000线形范围为0.0626～1.879μg

2.2.5精密度实验

取按“2.2.2.1”项下方法配置的对照品溶液，重复进样6次，每次进样10μl测得峰面积，平均值为1406601，RSD为0.2%

2.2.6重复性实验取同一厂家，同一批号的样品（批号140109）6份，按“2.2.2.2”项下方法制备，进样20μl依法测定。结果，淫羊藿苷含量值分别为0.173、0.175、0.176、0.174、0.176、0.177，RSD为0.9%，表明本法重复性好。

2.2.7稳定性实验

取同一厂家，同一批号的样品（批号140109），在0，1，4，12，24，48，72h分别进样20μl，依法测定。结果7次测定淫羊藿苷峰面积RSD为1.0%，表明样品溶液在3天内稳定。

2.2.8检测限与定量限

精取对照品溶液，用甲醇逐级稀释，记录图谱，信噪比为3时测得检测限为2.50ng，在信噪比为10时测得定量限为12.52ng，

2.2.9回收率实验

精密称取已知含量的样品6份（批号140109），约1g，分别精密加入前述对照品溶液2ml、3ml、5ml各两份，再按样品测定项下方法配制成供试溶液25ml进样，进样20μl进行测定，计算回收率，结果见表1

3讨论

3.1本文选择流动相时，试验了文献报到的乙腈-水（25：75）、乙腈-水-冰醋酸（30:70:0.5）、甲醇-1%醋酸溶液（52:48）等流动相，发现采用本文流动相效果最好，样品主峰保留时间适中、峰型良好，满足系统适用性要求。

3.2淫羊藿苷的提取方法有超声提取法和加热回流提取法。本文对超声提取法（提取时间分别为10，20,30分钟）、加热回流提取法（回流时间分别为10,20,30分钟）进行了考察，发现加热回流30分钟的提取效果理想，回收率高。

参考文献：

[1]湖北省医疗机构质量标准汇编[S].

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：中国医药科技出版社，2010:974-975；1179-1180

[3]阳建军，黄灿华.HPLC测定补肾康乐胶囊中淫羊藿苷含量[J].现代医药卫生，2008,24（23）

[4]任亚东，施猛.HPLC测定正元胶囊中淫羊藿苷的含量[J].亚太传统医药，2014,10（11）