海南省三亚地区孕晚期妇女胃肠道和生殖道GBS定植对妊娠结局和新生儿GBS疾病影响

麦燕 赵梅 钱沁佳 麦燕婷 郑通喜

【摘要】 目的 探究海南省三亚地区孕晚期妇女胃肠道和生殖道GBS定植对妊娠结局和新生儿GBS疾病的影响。方法 选择2019年1月～2020年12月在本院、三亚市人民医院、三亚市妇幼保健院进行常规产前检查的560例孕妇作为研究对象，采用细菌培养法对其进行GBS检测，根据检测结果将其分为两组，阳性组58例，阴性组502例。分析孕妇GBS带菌相关因素、两组孕妇妊娠结局、新生儿结局及新生儿GBS早发和晚发型疾病的发生率。结果 阳性组的初产妇、GBS感染史、甲状腺功能异常发生率高于阴性组，其差异显著，有统计学意义(P<0.05)。两组在高龄、流产史、阴道感染史、妊娠期糖尿病方面差异不明显，无统计学意义(P>0.05)。阳性组孕妇的胎膜早破及宫内感染发生率明显高于阴性组，其差异显著，有统计学意义(P<0.05)。两组孕妇的产后出血、早产、羊水污染及剖宫产发生率差异不明显，无统计学意义(P>0.05)。阳性组新生儿的脑膜炎、肺炎及败血症发生率明显高于阴性组，其差异显著，有统计学意义(P<0.05)。两组新生儿的呼吸窘迫、黄疸及窒息发生率差异不明显，无统计学意义(P>0.05)。GBS早发型疾病发生率为0.89％，晚发型为0.71％，其差异不明显，无统计学意义(P>0.05)。 结论 海南省三亚地区孕晚期妇女胃肠道和生殖道GBS定植会导致孕妇和新生儿不良妊娠结局，应引起重视，做好GBS筛查、预防及控制工作，GBS感染者应给予规范化治疗，以提高母婴健康水平。

【关键词】三亚地区孕晚期妇女；胃肠道和生殖道GBS定植；妊娠结局；新生儿GBS疾病

Effect of GBS colonization of gastrointestinal tract and genital tract on pregnancy outcome and neonatal GBS disease in pregnant women in Sanya area of Hainan Province

【Abstract】Objective To investigate the effects of GBS colonization of gastrointestinal and genital tract on pregnancy outcomes and neonatal GBS disease in women in the third trimester of Hainan Province. Methods 560 pregnant women who were routinely prenatally examined in our hospital, Sanya People's Hospital, and Sanya Maternal and Child Health Hospital from January 2014 to December 2016 were selected as subjects for research. GBS was performed by bacterial culture method, according to the test results. They were pided into two groups, 58 in the positive group and 502 in the negative group. The factors related to GBS infection in pregnant women, pregnancy outcomes of the two groups of pregnant women, neonatal outcomes and the incidence of early onset and late onset of GBS in neonates were analyzed. Results The incidence of primipara, GBS infection and thyroid dysfunction in the positive group was higher than that in the negative group, and the difference was statistically significant (P<0.05). There were no significant differences between the two groups in the age, history of abortion, history of vaginal infection, and gestational diabetes (P>0.05). The incidence of premature rupture of membranes and intrauterine infection in the positive group was significantly higher than that in the negative group, and the difference was statistically significant (P<0.05). There was no significant difference in the incidence of postpartum hemorrhage, premature delivery, amniotic fluid contamination and cesarean section between the two groups (P>0.05). The incidence of meningitis, pneumonia and sepsis in the positive group was significantly higher than that in the negative group, and the difference was statistically significant (P<0.05). There was no significant difference in the incidence of respiratory distress, jaundice and asphyxia between the two groups (P>0.05). The incidence of early onset GBS was 0.89%, and the late onset was 0.71%. The difference was not obvious, and there was no statistical significance (P>0.05).

Conclusion GBS colonization of gastrointestinal and reproductive tract in women in the third trimester of Hainan Province is likely to lead to adverse pregnancy outcomes in pregnant women and neonates. It should be paid attention to, and GBS screening, prevention and control should be done. Patients with GBS infection should be given standardized treatment to improve Maternal and child health level.

[Key words] Women in the third trimester of pregnancy; GBS colonization of the gastrointestinal and reproductive tract; pregnancy outcome; neonatal GBS disease

Ｂ族链球菌(group B streptococcus，GBS)，学名叫作无乳链球菌，是一种兼性厌氧的革兰阳性细菌，正常寄居（又称定植）在阴道和直肠，一般情况下对人体不构成危害，属于一种条件致病菌^[1]。它于1938年被发现，能造成牛乳腺炎，因而在早期只是引起畜医界的重视。20世纪80年代后，GBS被认为是导致孕妇及新生儿感染的重要原因之一^[2]。国内外学者研究表明^[3-4]，围产期GBS的感染会造成妊娠不良结局，不仅能引起孕晚期孕妇尿道感染、胎膜早破、早产、宫内感染及菌血症等临床症状，还能造成新生儿败血症、肺炎及化脓性脑膜炎，引发神经系统后遗症，其病死率较高，严重危害了母婴健康。Gendrin C等调查发现^[5]，约40～70％的GBS带菌孕妇在阴道分娩时，将GBS垂直传播给新生儿，但最终只有1～2％的GBS定植新生儿表现出发病症状。近年来，国内部分地区和省份开展了孕晚期GBS筛查，但筛查结果差异大，并且存在一些矛盾之处^[6]，且新生儿GBS感染发病率低。因此我国产科对孕妇GBS定植及新生儿GBS感染的关注和重视程度不够，对GBS缺乏规范化、科学化的筛查预防以及治疗方法。目前国内关于生殖道GBS定植的影响研究较多^[7]，但胃肠道定植对妊娠结局和新生儿的影响研究较少且关注不够。本研究探讨妊娠35～37周孕妇胃肠道和生殖道GBS定植对母婴预后的影响，为临床采取抗生素预防性治疗措施提供指导性意见，从而改善母婴预后，提高新生儿健康水平，降低孕晚期并发症，现报道如下。

1资料与方法

1.1 一般资料 选择2019年1月～2020年12月在本院、三亚市人民医院、三亚市妇幼保健院进行常规产前检查的560例孕妇作为研究对象，采用细菌培养法对其进行GBS检测，根据检测结果将其分为阳性组和阴性组。阳性组58例，平均年龄为(29.3±0.8)岁，平均孕周为(36.4±0.6)周。阴性组502例，平均年龄为(29.2±0.7)岁，平均孕周为(36.5±0.5)周。两组孕妇在年龄、孕周、产次等一般资料方面差异无统计学意义(P>0.05)。该研究孕妇知情并同意参与该研究，该研究通过我院伦理委员会审批。

1.2纳入与排除标准。 纳入标准^[8]：①孕周为35～37周；②单胎妊娠；③汉族孕妇。排除标准^[9]：①高血压、糖尿病史；②慢性肾炎者；③急性感染者；④两周内使用抗生素者；⑤生殖器官畸形者。

1.3检查方法 ①取材。首先拭去孕妇外阴分泌物，然后使用一根无菌拭子置入阴道（无需扩阴器），于孕妇阴道下段三分之一的位置沿阴道侧壁轻轻旋转一圈，获取阴道分泌物。再使用另外一根无菌拭子置入肛门，于肛门括约肌2～3cm的位置沿肠壁轻轻旋转一圈，获取直肠分泌物。将采集的无菌拭子制作为标本后，立即送去检验科用作细菌培养。②细菌培养。将获取的标本接种到5％的哥伦比亚羊血平板培养基(青岛海博生物技术有限公司生产)，再将培养基置入35℃5％的CO₂孵育箱中培养18～24h。挑选出β溶血性的可疑菌落，先行纯培养，再做涂片采用革兰氏染色镜检法，若镜下革兰阳性球菌以链状排列，触酶试验阴性确定为链球菌属，则为阳性GBS。同时，于产后保留胎盘组织送检，并获取新生儿耳、咽部位的分泌物。③临床处理。按照2010年美国疾病预防控制中心发布的《围生期GBS预防指南》建议，所有阳性GBS孕妇于破膜后或者临产后给予产时抗生素预防（intrapartum antibiotic prophylaxis,IAP）治疗，以预防感染。抗生素首选青霉素类。氨苄青霉素2.0g＋生理盐水20ｍl静脉滴注,随后每6ｈ给予1次静脉滴注, 直到分娩。若有孕妇对青霉素过敏，则选用克林霉素，每8ｈ给予1次0.9g克林霉素静脉滴注，直到分娩。此外，孕期有GBS菌尿症或有GBS感染史的孕妇，不必细菌培养，直接给予IAP治疗。对于分娩时培养结果未知的孕妇，若存在任一危险因素，如产前体温≥38℃、胎膜破裂≥18h、胎龄<37周，同样给予IAP治疗。

1.4观察指标 ①孕妇GBS带菌相关因素。分析高龄、初产妇、流产史、GBS感染史、阴道感染、妊娠期糖尿病等因素对孕妇GBS带菌情况的影响。②孕妇妊娠结局。比较GBS阳性组和阴性组孕妇在产后出血、早产、胎膜早破、宫内感染、羊水污染及剖宫产方面的发生率。③新生儿结局。比较GBS阳性组和阴性组新生儿在呼吸窘迫、黄疸、窒息、脑膜炎、肺炎及败血症方面的发生率。④新生儿GBS早发和晚发疾病的发生率。比较新生儿GBS早发和晚发型脑膜炎、肺炎及败血症的发生率。

1.5 统计学处理 使用SPSS22.0软件对数据进行处理分析，孕妇GBS带菌相关因素、妊娠结局、新生儿结局、新生儿GBS早发和晚发疾病的发生率均为计数资料，采用χ²检验，以％表示，检验水准设定为a=0.05。当P<0.05时，差异具有统计学意义。

2 结果

2.1孕妇GBS带菌相关因素比较的分析 阳性组的初产妇、GBS感染史、甲状腺功能异常发生率高于阴性组，其差异显著，有统计学意义(P<0.05)。两组在高龄、流产史、阴道感染史、妊娠期糖尿病方面差异不明显，无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 孕妇GBS带菌相关因素比较[n(％)]

Table1 Comparison of factors related to GBS infection in pregnant women [n(％)]

相关因素	阳性组(n=58)	阴性组(n=502)	χ2值	p值
高龄(≥35岁)	5(8.62)	27(5.38)	0.920	>0.05
初产妇	37(63.80)	242(48.21)	4.746	<0.05
流产史	25(43.10)	228(45.42)	1.549	>0.05
GBS感染史	31(53.45)	199(39.64)	4.133	<0.05
阴道感染史	4(6.90)	28(5.58)	0.254	>0.05
妊娠期糖尿病	7(12.07)	78(15.54)	0.685	>0.05
甲状腺功能异常	28(48.28)	145(28.89)	5.243	<0.05

2.2两组孕妇妊娠结局比较的分析 阳性组孕妇的胎膜早破及宫内感染发生率明显高于阴性组，其差异显著，有统计学意义(P<0.05)。两组孕妇的产后出血、早产、羊水污染及剖宫产发生率差异不明显，无统计学意义(P>0.05)，见表2。

表2 两组孕妇妊娠结局比较[n(％)]

Table2 Comparison of pregnancy outcomes between the two groups of pregnant women[n(％)]

组别	例数	产后出血	早产	胎膜早破	宫内感染	羊水污染	剖宫产
阳性组	58	12(20.69)	11(18.97)	9(15.52)	8(13.79)	8(13.79)	22(37.93)
阴性组	502	95(18.92)	82(16.33)	38(7.57)	24(4.78)	53(10.56)	192(38.25)
χ2值		0.356	0.353	4.317	4.684	0.987	0.285
p值		>0.05	>0.05	<0.05	<0.05	>0.05	>0.05

2.3两组新生儿结局比较的分析 阳性组新生儿的脑膜炎、肺炎及败血症发生率明显高于阴性组，其差异显著，有统计学意义(P<0.05)。两组新生儿的呼吸窘迫、黄疸及窒息发生率差异不明显，无统计学意义(P>0.05)，见表3。

表3两组新生儿结局比较[n(％)]

Table3 Comparison of neonatal outcomes between the two groups [n(％)]

组别	例数	呼吸窘迫	黄疸	窒息	脑膜炎	肺炎	败血症
阳性组	58	3(5.17)	12(20.69)	2(3.45)	2(3.45)	4(6.90)	3(5.17)
阴性组	502	12(2.38)	95(18.81)	18(3.56)	0(0.00)	5(0.99)	1(0.19)
χ2值		1.463	0.358	0.211	3.784	5.637	4.858
p值		>0.05	>0.05	>0.05	<0.05	<0.05	<0.05

2.4新生儿GBS早发和晚发疾病的发生率比较的分析 GBS早发型疾病发生率为0.89％，晚发型为0.71％，其差异不明显，无统计学意义(P>0.05)，见表4。

表4 新生儿GBS早发和晚发疾病的发生率比较[n(％)]

Table4 Comparison of the incidence of early onset and late onset of GBS in neonates [n(％)]

组别	总例数	肺炎	败血症	脑膜炎	总计()
早发型	560	2(0.36)	2(0.36)	1(0.18)	5(0.89)
晚发型		2(0.36)	1(0.18)	1(0.18)	4(0.71)
χ2值					0.327
p值					>0.05

3 讨论

根据国外文献报道^[10]，孕晚期妇女GBS定植率为6.5～36.5％，国内文献报道指出^[11]，我国孕晚期妇女感染GBS几率为10.2～32.5％。GBS定植率差距巨大，有学者认为可能与年龄、社会经济状况、种族、遗传、阴道感染及性生活有关^[12]。目前国内关于GBS定植的研究，大部分是针对生殖道，对胃肠道定植的研究较少，这可能与孕妇对直肠拭子采集方法较难接受有关。本研究中的直肠拭子采集一开始也受到孕妇抵制和排斥，但经过检查医师的耐心讲解后，都表示接受。本研究显示，560例孕妇中，有19例在胃肠道定植，胃肠道GBS定植率为3.39％。有39例在生殖道定植，生殖道GBS定植率为6.96％。根据2010年美国CDC预防指南，阴道和直肠中任何一个部位阳性，即可认为GBS定植。因此本研究中孕妇GBS定植率为10.36％，这与相关文献报道的我国GBS定植率大体一致^[13]。美国波士顿儿童医院教授Michael Wessels认为

^[14]，若围产期孕妇的GBS定植率小于5％，则没必要进行常规筛查。本研究表明，海南省三亚地区孕晚期妇女有一定的GBS定植率，因此有必要对本地区孕妇进行GBS筛查。

本研究发现，GBS阳性组的初产妇、GBS感染史、甲状腺功能异常发生率高于阴性组，两组在高龄、流产史、阴道感染史、妊娠期糖尿病方面差异不明显，说明GBS定植与初产妇、GBS感染史及甲状腺功能异常有关，而与高龄、流产史、阴道感染史、妊娠期糖尿病没有显著相关性。Helmig RB等研究表明^[15]，初产妇、GBS感染史是GBS定植的危险因素。杨磊等研究表明甲状腺功能异常也是GBS定植的危险因素^[16]。但也有学者研究结果与上述结论不一致。郭琦等研究指出^[17]，GBS定植与初产妇无关，而与高龄、阴道感染史有关。这可能是样本容量及地域不同等原因造成的。普筱敏等研究发现^[18]，GBS可通过黏附在内皮细胞中，直接穿越细胞屏障，从而躲开机体免疫清除，进而引发一系列炎症反应，最终对围产期孕妇妊娠结局造成不利影响。本研究表明，阳性组孕妇的胎膜早破及宫内感染发生率明显高于阴性组，这可能与GBS具有吸附及穿透能力相关。GBS具有极强的绒毛膜吸附及穿透能力，可侵入胎膜并通过机体内的炎症细胞吞噬作用，降解胎膜蛋白，从而降低胎膜张力，引发胎膜早破。Akoh CC等研究表明^[19]，GBS是导致宫内感染的重要原因，其通过引起磷脂酶A及前列腺素等细胞因子的释放，从而刺激子宫，引发感染。本研究中，两组孕妇的产后出血、早产、羊水污染及剖宫产发生率差异不明显，但也有研究者得出不一致的结论^[20]。

近年来，GBS引发新生儿不良结局逐渐受到关注。本研究发现，阳性组新生儿的脑膜炎、肺炎及败血症发生率明显高于阴性组，而两组中的呼吸窘迫、黄疸及窒息发生率差异不明显。但许媛媛等研究指出^[21]，GBS可显著提高新生儿黄疸、呼吸窘迫及窒息发生率。这可能是本研究对孕妇采取了积极的抗生素干预，从而减少了新生儿GBS感染。根据发病时间不同，新生儿GBS感染可分为早发型GBS疾病（early-onset GBS disease,GBS-EOD）和晚发型GBS疾病（late-onset GBS disease,GBS-LOD）。林新祝等研究表明^[22]，母亲GBS定植是新生儿GBS感染的最主要的原因，通常是采用水平或者垂直传播方式。胎膜破裂或者分娩发动时，GBS通过阴道进入羊水从而导致新生儿感染，也可在胎儿通过产道之时，GBS定植到新生儿黏膜或者皮肤上。定植于新生儿消化道或者呼吸道的GBS，通常情况下是安全的，只有约1～3％会感染^[23]。本研究发现，新生儿GBS早发型疾病发生率为0.89％，晚发型为0.71％，与上述研究结论一致。

综上所述，海南省三亚地区孕晚期妇女胃肠道和生殖道GBS定植易导致孕妇和新生儿不良妊娠结局，应引起重视，做好GBS筛查、预防及控制工作，GBS感染者应给予规范化治疗，以提高母婴健康水平。

参考文献：

[1]彭兰,柴利强,陈大立等.孕妇孕晚期 GBS定植及新生儿早发型GBS感染趋势[J].中国妇幼健康研究,2016,27(1):26-27.

[2]Le Doare K,Heath PT.Anoverview of global GBS epidemiology[J].Vaccine,2014,31(l4):7-12.

[3]Puccio G,Cajozzo C,et al.Epidemiology of Toxoplasma and CMV serology and of GBS colonization in pregnancy and neonatal outcome in a Sicilian population[J].Ital J Pediatr,2014,40(1):23-26.

[4]罗力冰,周镇邦,劳锦辉等.孕晚期B族链球菌筛查及分娩期预防性抗生素治疗效果的临床分析[J].中华围产医学杂志,2018,21(8):537-540.

[5]Gendrin C,Vornhagen J,et al.Mast cell degranulation by a hemolytic lipid toxin decreases GBS colonization and infection[J].Sci Adv,2015,1(6):225-226.

[6]郑建琼,陈海迎,陈晶晶等.生殖道B族链球菌定植现状及妊娠结局分析[J].医学研究杂志,2018,47(3):93-96

[7]曾白华,吕禄平,王豫川等.孕晚期妇女B族链球菌定植情况与高危因素分析[J].徐州医科大学学报,2017,37(10):658-660.

[8]Zilberman D,Williams SF,et al.Does genital tract GBS colonization affect the latency period in patients with preterm premature rupture of membranes not in labor prior to 34 weeks[J].J.Matern.Fetal.Neonatal.Med,2014,27(4):338-341.

[9]Jordan JA,Hall G,et al.Multicenter study evaluating performance of the Smart Group B Streptococcus (GBS) assay using an enrichment protocol for detecting GBS colonization in patients in the antepartum period[J].J.Clin.Microbiol,2014,48 (9):3193-3197.

[10]Picchiassi E,Coata G,et al.Intrapartum test for detection of Group B Streptococcus colonization during labor[J].J.Matern.Fetal.Neonatal.Med,2017, 12(8):1-17.

[11]洪翔,于红,王蓓.新生儿B族链球菌感染相关疾病影响因素的研究进展[J].中华流行病学杂志,2018,39(2):249-252.

[12]贾忠兰,卢新,许丽风.三种方法筛查孕妇B族链球菌的效果评价[J].标记免疫分析与临床,2017,24(3):338-340.

[13]刘碧媚,李燕钰.妊娠晚期B族链球菌带菌者预防性治疗的效果观察[J].中国现代药物应用,2018,12(17):111-112.

[14]尉建霞,范玲,陈雪.孕晚期 B族链球菌带菌者母儿结局及高危因素分析[J].中国妇幼健康研究,2016,27(1):81-83.

[15]Helmig RB,Gertsen JB.Diagnostic accuracy of polymerase chain reaction for intrapartum detection of group B streptococcus colonization[J].Acta Obstet Gynecol Scand,2017,56(3):1123-1126.

[16]杨磊,时春艳.围产期B族溶血性链球菌的筛查与处理[J].中华产科急救电子杂志,2017,6(3):147-153.

[17]郭琦,杨启文,胡静等.孕晚期阴道B族链球菌定植的两种筛查方法比较[J].协和医学杂志,2018,9(3):242-245.

[18]普筱敏,张力,旷凌寒等.成都地区妊娠晚期B群链球菌定植情况调查及围产结局分析[J].现代妇产科进展,2018,27(1):33-36.

[19]Akoh CC,Pressman EK,et al.Vitamin D mediates the relationship between placental cathelicidin and group B streptococcus colonization during pregnancy[J].J. Reprod.Immunol,2018,121(6):42-48.

[20]Carrillo-Ávila JA,Gutiérrez-Fernández J,et al.Comparison of qPCR and culture methods for group B Streptococcus colonization detection in pregnant women: evaluation of a new qPCR assay[J].BMC Infect.Dis,2018,18(1):305-308.

[21]许媛媛,陈红波,孟祥莲等.围生期B族链球菌感染对足月孕妇妊娠结局的影响[J].蚌埠医学院学报,2016,41(12):1651-1654.

[22]林新祝,吴健宁,张雪芹等.晚孕期阴道B族链球菌定植与新生儿感染的关系[J].中华围产医学杂志,2016,19(7):491-496.

[23]Olaleye Atinuke O,Adefusi Olorunwa F,et al.Group B streptococcus colonization and HIV in pregnancy:A cohort study in Nigeria[J].J Neonatal Perinatal Med,2017，10(1):91-97.