虾青素油抗氧化动物实验研究

李丹丹,王丽娟

摘要：目的 了解虾青素油对实验小鼠抗氧化功能的辅助增强作用。方法 动物实验设3个剂量组（12.5、25.0和75.0mg/kg·bw）和1个溶剂对照组，观察虾青素油对老龄小鼠抗氧化功能的影响。结果 在试验初始、中期、末期，3个剂量组的小鼠体重及增重与对照组差异均无统计学意义；试验末期各剂量组小鼠血清中蛋白质羰基含量差异无统计学意义；与对照组比较，高剂量组的丙二醛（MDA）含量降低、超氧化物歧化酶（SOD）活力增加、谷胱甘肽（GSH）含量升高。结论 来源于雨生红球藻的虾青素油，对实验动物有抗氧化功能。

关键词：抗氧化实验；老龄小鼠；氧化应激；动物实验

虾青素(astaxanthin )是唯一能通过血脑屏障的酮式类胡萝卜素，在其分子中，有很长的共轭双键 、羟基和在共轭双键链末端的不饱和的酮基，其中羟基和酮基又构成 Ot-羟基酮，这些结构都具有比较活泼的电子效应，能向自由基提供电子，使得虾青素具有抗氧化作用[[1]]。本实验研究来源于雨生红球藻的虾青素油的抗氧化作用。

1材料与方法

1.1样品 本研究所用虾青素油为暗红色油状液体，由雨生红球藻经CO2萃取制得，要求其虾青素含量≥5%。

1.2实验动物 SPF级ICR种雄性8～10月龄小鼠40只（湖南斯莱克景达实验动物有限公司），实验动物生产许可证号：SCXK（湘）2013－0004；实验期间小鼠饲养于22℃～26℃、湿度50％～56％的屏障环境中。实验动物使用许可证号：SYXK（湘）2015－0012。

1.3仪器与试剂 动物称量秤、离心机、水浴箱和紫外可见分光光度计等；丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）及蛋白质羰基试剂盒（南京建成生物工程研究所）。

1.4方法 试验初始、中期、末期均对小鼠进行体重监测。试验初始，采尾尖血制成４％溶血液，用试剂盒测定其MDA水平。根据MDA含量将40只小鼠平均分为１个对照组和低、中、高3个剂量组（12.5、25.0和75.0mg/kg·bw），保证各组试验前MDA值均衡。各剂量组小鼠经口灌胃给予相应剂量的虾青素油，溶剂对照组给予等体积玉米油，灌胃1次/d，灌胃体积为0.2ml/10g·bw，连续30d。试验末期，采尾尖血测定4%溶血液中MDA含量、全血中GSH含量；摘眼球采血，离心后取血清测定SOD活力及蛋白质羰基含量。

1.5数据处理 用Excel 2007、SPSS 19.0软件统计分析。

2结果

2.1老龄小鼠体重变化 实验初始、中期、末期，3个剂量组的小鼠体重及增重与对照组差异均无统计学意义，见表1。

表1 虾青素油对小鼠体重的影响（g）

组别	初始体重	中期体重	末期体重	增重
对照组	52.92±2.80	54.09±2.13	56.96±3.90	4.04±3.04
低剂量组	52.78±4.14	54.27±4.67	56.52±4.13	3.74±2.03
中剂量组	52.65±4.02	53.31±4.69	57.02±4.72	4.37±2.15
高剂量组	53.00±2.97	53.99±3.68	56.71±5.45	3.71±3.42
P值	0.890	0.951	0.944	0.946

2.2抗氧化试验结果

试验末期，与对照组比较，高剂量组的MDA含量显著降低（P＜0.05），见表2。

表2 对小鼠4%溶血液中MDA含量的影响

组别	4%溶血液MDA含量（nmol/ml）
	试验前期	实验末期	P值
对照组	15.24±3.38	16.28±2.14	-
低剂量组	15.01±3.55	15.42±3.54	0.814
中剂量组	14.96±2.97	13.42±2.07	0.058
高剂量组	15.23±3.06	12.55±2.71	0.010

试验末期，与对照组比较，高剂量SOD活力显著增加（P＜0.05）、GSH含量显著升高（P＜0.05）；各剂量组小鼠血清中蛋白质羰基含量差异无统计学意义（P＞0.05），见表3

表3 对小鼠血清中GSH含量、SOD活力和蛋白质羰基含量的影响

组别（n=10）	SOD活力（U/ml）	P值	GSH含量（g/L）	P值	蛋白质羰基含量（nmol/mg）	P值
对照组	165.32±20.86	-	0.39±0.05	-	0.44±0.15	0.657
低剂量组	176.20±36.91	0.764	0.40±0.07	0.896	0.43±0.16
中剂量组	188.71±29.63	0.222	0.43±0.07	0.230	0.39±0.17
高剂量组	206.56±32.14	0.012	0.46±0.03	0.018	0.37±0.14

3 讨论

氧自由基反应和脂质过氧化反应在机体代谢中起重要作用。MDA是机体内自由基作用于脂质过氧化的终末产物，大量产生时可导致细胞膜损伤[[2]]。SOD是生物体中清除自由基的主要物质，SOD水平常作为象征衰老的直观指标[[3]

]。GSH是机体内一种强抗氧化剂，可消除自由基并参与细胞解毒及细胞损伤修复，有抑制脂质过氧化、保护细胞膜、恢复细胞功能的作用[[4]]。蛋白羰基是机体内多种氨基酸在蛋白质氧化修饰过程中产生的早期标志，能直接反映蛋白质的损伤程度[[5]]。

 本实验研究结果显示，试验末期各剂量组小鼠血清中蛋白质羰基含量差异无统计学意义；与对照组比较，高剂量组的丙二醛（MDA）含量降低、超氧化物歧化酶（SOD）活力增加、谷胱甘肽（GSH）含量升高。证明来源于雨生红球藻的虾青素油，对实验动物有抗氧化功能。

参考文献：

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[[1]] 宋晓冬，刘文波等.虾青素对ECV-304细胞的抗氧化作用及其作用机制.滨州医学院学报，2009,32（3）

[[2]] Huang YY,Wu CC.The increase of ROS caused by the interference of DEHP with JNK/p38/p53 pathway as the reason for hepatotoxicity.Int J Environ Res Public Health,2019,16（3）

[[3]] 李洪波，王小琴等.六味地黄丸对D-半乳糖致衰老大鼠抗氧化功能影响的实验研究.中国国医药科技，2019，26（1）

[[4]] 张艺，叶升.还原型谷胱甘肽生理功能及其临床应用.生命的化学，2020,40（12）

[[5]] 罗胜勇，栗原博等.冬虫夏草对氧化损伤小鼠抗氧化作用研究.食品研究与开发，2019,40（13）