Activation of canonical Wnt signaling pathway promotes proliferation and self-renewal of rat hepatic oval cell line WB-F344 in vitro

(整期优先)网络出版时间:2008-12-22
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瞄准:调查在肝的卵形的房间在试管内的增长和区别上表明小径的正规Wnt的激活的效果。方法:WB-F344房间与recombinantWnt3a被对待(20,40,80,160,200ng/mL)在24h的没有浆液的媒介。房间增长被Brdu加入分析测量;未经治疗的WB-F344房间作为控制被拿。有为24h的Wnt3a(160ng/mL)的术后疗法,在对待的WB-F344房间代替细胞的本地化和beta-catenin的蛋白质表示并且与Wnt3a未经治疗被免疫荧光染色和西方的污点分析检验。CyclinD1mRNA表示被半量的反向抄本的聚合酶链反应(RT-PCR)决定。一些表型的标记的mRNA层次(法新社,CK-19,白长袍的)并且二个肝的原子因素(HNF-4,HNF-6)被RT-PCR测量。CK-19和法新社蛋白质的表情被西方的污点分析检测。结果:Wnt3a支持了WB-F344房间的增长。有recombinantWnt3a的WB-F344房间的刺激导致了transcriptional使活跃之物beta-catenin的累积,和它进原子核,和起来调整的典型Wnt目标基因CyclinD1的易位。在当浆液不在时的Wnt3a处理的3d以后,WB-F344房间保留了他们的双性人潜力表示hepatocytes和cholangiocytes的几个特定的表型的标记,例如法新社和CK-19,跟随表明小径的正规Wnt的激活。结论:表明小径的正规Wnt支持老鼠的增长和自强肝的卵形的房间。