白花丹急性毒性的初步研究

蒋梦婷，黄雪婷

摘要：目的：观察小鼠给予白花丹生品水煎液后小鼠的中毒表现并研究出其半数致死量的大小，为探讨白花丹生品的毒性机理提供依据。方法：采用测定半数致死量法对白花丹药材的毒性剂量大小进行研究，根据改良寇氏法计算其LD50值。结果：白花丹生品的LD50值为65.31g/kg，其95%可信区间：60.53g/kg~70.79g/kg。结论：白花丹生品确有毒性，给小鼠服用白花丹生品水煎液，小鼠的中毒表现为呼吸急促，抽搐，极度兴奋。

关键词：白花丹；白花丹醌；急性毒性

白花丹为白花丹科植物白花丹（Plumbago zeylanica L.）的干燥全草。在我国产于台湾、福建、广东、广西、四川等地，为民间常用药[1]。该植物辛苦涩，性温，有毒，用于治疗风湿性关节疼痛，血瘀闭经，跌打损伤等症[2-3]；广西壮医用叶治疗跌打损伤、肝脾肿大；云南傣医用其干根散瘀消肿，治风湿疼痛；新疆维吾尔医用白花丹茎枝，主治白癜风、偏瘫等症[4]。近年来许多实验研究都表明，白花丹具有抗炎、抗氧化应激、调节血糖、抗细菌活性等药理作用[5]，这使得白花丹在诸多病症的治疗中受到广泛的关注与越来越深入的研究。白花丹除了具有重要的药理作用之外，同时也具有不可忽视的毒性作用。白花丹的根、茎、叶、花及全草中均含有有毒成分。目前研究白花丹醌的抗肿瘤活性较多，但对其毒性作用机制研究很少[6]，经文献查阅可知白花丹醌(plumbagin)为其主要的毒性成分，且其在体内外均具有毒性[7-8]。文献及临床应用表明白花丹药材有毒，皮肤与其液接触引起红肿，误食后会出现麻痹，孕妇误食会引起流产；家畜误食会引起泻下[9-10]。白花丹的毒性是制约其药效的主要因素，因此为了更好的利用白花丹，对其毒性还有待深入研究。本实验通过小鼠急性毒性实验研究白花丹生品的半数致死量大小来探讨白花丹的毒性机理，本项目的开展为民族药的药用安全及药用价值的进一步开发提供参考。

1材料与动物

1.1药材

白花丹，南宁市华泰中药饮片有限公司生产批号：210701；白花丹醌（厂家：北京索莱宝科技有限公司。生产批号SH8800，质量分数≥98%）

1.2动物

购于广西医科大学实验动物中心，SPF级，昆明小鼠，体重(18~25)g，雌雄各半。分笼饲养，饲养室温度(18~26)℃，相对湿度50%～60%。

2方法与结果

2.1白花丹生品药物的提取

称取白花丹生品药材1000g，加入10倍量的水浸泡30min，回流提取2h，共提取四次，合并滤液，常压浓缩得生药浓度为2.5g/mL。

2.2急性毒性实验

经预试，分别找出引起动物0%(Dn)和100%(Dm)死亡的白花丹水提物的剂量。根据预试结果在测得Dn和Dm剂量范围内设7个剂量组，分将昆明小鼠按照体重进行随机分组，每组10只，雌雄各半，将给药组分成7组，禁食12h后不禁水，分别灌服不同的剂量的受试药物，给药剂量分别为87.5g/kg、78.7g/kg、70.9g/kg、63.8g/kg、57.4g/kg、51.7g/kg、46.5g/kg。记录它们的中毒表现以及死亡情况（每只小鼠用药体积均为0.3ml/10g体重）。根据改良寇氏法公式计算半数致死量(LD50):LD50=lg-1［Xm-i(∑p-0.5)］;LD50的95%可信限=lg-1(LD50±1.96×Sx50);Sx50=i∑pq/n。

2.3实验结果

根据改良寇氏法计算，白花丹水提物小鼠口服给药可测得LD50值为65.31g/kg，其95%可信区间：60.53g/kg~70.79g/kg。小鼠的中毒表现为呼吸急促，抽搐，行动迟缓，死亡前突然急剧兴奋，持续转圈或跳跃，持续时间大约10s后死亡，死后尾巴发紫。

表 1 白花丹水提物毒性实验动物死亡结果
组别	动物数（只）	剂量（g/kg）		剂量对数	死完数(只)	死亡率（%）
1	10	97.2	1.99		10	100
2	10	87.5	1.94		9	90
2	10	78.7	1.9		8	80
3	10	70.9	1.85		5	50
4	10	63.8	1.8		3	30
5	10	57.4	1.76		3	30
6	10	51.7	1.71		2	20
7	10	46.5	1.67		0	0

3.结果

根据动物实验，证明了白花丹具有毒性，可致小鼠死亡。根据改良寇氏法计算，白花丹水提物小鼠口服给药可测得LD50值为65.31g/kg。其95%可信区间：60.53g/kg~70.79g/kg。

4.讨论

白花丹为白花丹科植物白花丹的干燥全草。白花丹的主要成分是白花丹醌，白花丹提取物具有抗菌，抗过敏，抗高血糖症，抗肿瘤及抗肝纤维化等作用。白花丹药材有小毒，该实验初步探究了白花丹生品毒性剂量的大小，但是具体的影响还要根据日后进一步的药效实验来验证，为以后在该方面的研究提供了实验依据。

参考文献

[1]陈少锋,赵湘培,余胜民,钟鸣.瑶药白花丹炮制前后急性毒性的研究[J].中国民族医药杂志,2017,23(02):65-66.

[2]中国科学院中国植物志编辑委员会·中国植物志:60卷1第一分册［M］． 北京: 科学出版社，1987:4－5．

[3]江苏新医学院·中药大辞典［M］．上海:上海人民出版社，1977:4181．

[4]亚森.吐尔逊,田如玮.药品标准(维药分册) [M].乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社,1999.23.

[5]李文娟.中药白花丹化学成分及药理作用研究进展[J].大众科技,2020,22(06):47-50.

[6]霍仕霞,闫明.白花丹的研究进展[J].中国医药导报,2008(28):17-18.

[7]刘鼎,钟鸣,余胜民,陈勇.白花丹炮制工艺考察[J].中国实验方剂学杂志,2015,21(16):19-22.

[8]王玖恒，李景强，彭岳，等． 白花丹醌的研究进展［J］．中华中医药学刊，2012，30(7):1626-1628.

[9]赵湘培,陈少锋,余胜民,钟鸣.瑶药白花丹炮制前后白花丹醌含量测定及小鼠急性毒性试验[J].中国民族医药杂志,2017,23(08):46-49.

[10]中国药品生物制品检定所，等．中国民族药志［M］．第二卷．北京:人民卫生出版社，1990:152．