乳清蛋白粉对小鼠增强免疫力保健功能的研究

姜禹岐

摘要：目的：观察乳清蛋白粉对小鼠免疫力的影响，我们以乳清蛋白粉为原料，进行了增强免疫力实验研究。  方法：本次试验经口灌胃小鼠不同剂量的乳清蛋白粉30d。 结果：乳清蛋白粉对迟发型变态反应、抗体生成细胞数、HC50、碳廓清吞噬指数和巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力有显著增强作用。 结论：乳清蛋白粉具有增强免疫力的作用。

关键词：乳清蛋白粉 免疫 小鼠 巨噬细胞

营养与免疫的关系作为近年来营养学研究的一个热点，受到了越来越多的国内外学者的重视，而蛋白质、氨基酸既是机体生长发育的营养物质又是构成机体免疫系统的物质基础，因而更加受到重视。蛋白质是一切生命的物质基础，为机体细胞的重要组成部分。蛋白质作为人体不可缺少的营养成分约占人体组织的20%，每天约有3%的蛋白质参与新陈代谢完成人体的各种生理活动。如果蛋白质长时间地摄入不足，正常代谢和生长发育便会无法进行，轻者发生疾病，重者甚至可以导致死亡。因此保证优质蛋白质的补给是关系到身体健康的重要问题，只有不断的摄取优质的蛋白质，才能维持细胞的正常功能及其新陈代谢。

蛋白质的来源有两大类：一类是动物性蛋白质，另一类是植物性蛋白质。动物性蛋白属完全蛋白质，如乳清蛋白，乳清蛋白以纯度高、吸收率高、氨基酸组成最合理等诸多优势被推为“蛋白之王”【1】。乳清蛋白不但容易消化，而且还具有高生物价、高消化率、高蛋白质功效比和高利用率等特点，是蛋白质中的精品，是人体优质蛋白质补充剂之一。因此，本实验通过给小鼠连续灌胃乳清蛋白粉，判断乳清蛋白粉对小鼠免疫力是否具有增强作用。

1 材料与方法

1.1样品：乳清蛋白粉。

1.2  试验动物：由某实验动物中心提供，SPF级昆明种雄性小白鼠200只，体重18-22g，试验动物房为屏障系统，温度20-25℃，相对湿度45%-65%。

1.3剂量设计、受试样品配制：将200只雄性小鼠设定为五大组（分8项试验），每大组40只小鼠并随机分为4小组，每小组10只小鼠。剂量设计：按人体推荐量的30倍、20倍、10倍的剂量设计，即0.45g/kg.BW、0.30g/kg.BW、0.15g/kg.BW三个剂量组，另设阴性对照组（蒸馏水）。受试样品配制：取适量样品粉末，分别称取0.90g、0.60g、0.30g加蒸馏水至20ml，混合均匀，配制成浓度为4.5%、3.0%、1.5%的混悬液，备用。

1.4主要仪器、试剂、物品：电子天平、离心机、CO2培养箱、紫外分光光度计、酶标仪、恒温水浴锅、微量血凝板、可调微量加样器、显微镜、超净工作台、无菌手术器械、细胞计数器、24孔和96孔平底细胞培养板、96孔U型细胞培养板、纱布、载玻片、试管、计时器、培养皿，绵羊红细胞(SRBC)、鸡红细胞、YAC-1细胞、印度墨汁、琼脂糖、小牛血清、Hank's 液、MTT、ConA、RPMI1640培养液、甲醇、丙酮、酸性异丙醇、生理盐水、磷酸盐缓冲液、青霉素、链霉素、乳酸锂、硝基氯化四氮唑(INT)、吩嗪二甲酯硫酸盐、0.2mol/L 的 Tris-HCL 缓冲液、2-ME、台酚蓝、补体(豚鼠血清)、SA缓冲液、Gimsa 染液、氧化型辅酶I、1%冰醋酸、1%的NP40等。

1.5  试验方法：各组小鼠按剂量设计每天灌胃受试样品一次，灌胃容量均为10mL/kg.BW，阴性对照组给予等容量蒸馏水，连续灌胃30天后分别对动物进行各项免疫指标测定

1.6数据处理采用SPSS软件对数据进行方差分析。

2  结果

2.1  乳清蛋白粉对小鼠体重的影响：

乳清蛋白粉对小鼠体重增长无明显影响，各剂量组小鼠各期体重及增重与阴性对照组比较，差异均无显著性（P＞0.05）。

2.2  乳清蛋白粉对小鼠淋巴器官/体重比值的影响：

由表1结果表明，乳清蛋白粉对小鼠胸腺/体重比值和脾脏/体重比值无明显影响，各剂量组与阴性对照组比较，差异无显著性（P＞0.05）。

表 1 乳清蛋白粉对小鼠淋巴器官/体重比值的影响（±s）

组别	剂量	动物数（只）	胸腺/体重 （/103）	脾脏/体重 （/103）
高剂量组	0.45g/kg.BW	10	2.84±0.26	3.15±0.32
中剂量组	0.30g/kg.BW	10	2.91±0.28	3.32±0.48
低剂量组	0.15g/kg.BW	10	2.89±0.23	3.29±0.37
阴性对照组	0.00g/kg.BW	10	2.85±0.34	3.48±0.43

2.3  乳清蛋白粉对小鼠细胞、体液免疫功能的影响：

由表2结果表明，乳清蛋白粉低、中、高剂量组能增强小鼠对SRBC诱发的DTH反应，与阴性对照组比较，差异有显著性（P＜0.05）。乳清蛋白粉低、中、高剂量组能增强其抗体生成细胞数量和抗体积数，与阴性对照组比较，差异有显著性（P＜0.05，P＜0.01）。

表 2 乳清蛋白粉对小鼠细胞、体液免疫功能的影响（

±s）

组别	剂量	动物数（只）	SRBC诱导DTH前后足跖厚度差（mm）	加与不加ConA孔吸光度差值（OD)	血清半数溶血值（HC50）	溶血空斑数/106脾细胞
高剂量组	0.45g/kg.BW	10	0.69±0.08*	0.137±0.028	171.4±14.2**	1089.0±69.5**
中剂量组	0.30g/kg.BW	10	0.64±0.07*	0.139±0.035	169.3±19.7*	1085.7±77.2*
低剂量组	0.15g/kg.BW	10	0.63±0.07*	0.125±0.042	168.9±17.5*	1082.0±103.4*
阴性对照组	0.00g/kg.BW	10	0.54±0.06	0.126±0.027	151.6±18.3	972.0±110.1

注：各剂量组与阴性对照组比较，* P＜0.05，**P＜0.01。

2.4  乳清蛋白粉对小鼠碳廓清和腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验结果：

由表3结果表明，乳清蛋白粉中、高剂量组能提高小鼠碳廓清吞噬指数，与阴性对照组比较，差异有显著性（P＜0.05）。乳清蛋白粉中、高剂量组能提高小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬百分率和吞噬指数，与阴性对照组比较，差异有显著性（P＜0.05）。

表 3 乳清蛋白粉对小鼠碳廓清和腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响（±s）

组别	剂量	动物数（只）	吞噬指数a	吞噬百分率（%)	吞噬指数
高剂量组	0.45g/kg.BW	10	7.12±1.09*	32.6±2.4*	0.875±0.081*
中剂量组	0.30g/kg.BW	10	7.03±0.85*	32.1±2.1*	0.862±0.075*
低剂量组	0.15g/kg.BW	10	6.38±0.98	30.8±2.2	0.771±0.077
阴性对照组	0.00g/kg.BW	10	5.80±1.52	29.1±2.1	0.742±0.071

注：各剂量组与阴性对照组比较，* P＜0.05。

2.5  乳清蛋白粉NK细胞活性试验结果：

由表4结果表明，乳清蛋白粉各剂量组的NK细胞活性值与阴性对照组比较，差异均无显著性（P＞0.05）。

表 4 乳清蛋白粉对小鼠NK细胞活性的影响（±s）

组别	剂量	动物数（只）	NK细胞活性（%）
高剂量组	0.45g/kg.BW	10	34.68±2.91
中剂量组	0.30g/kg.BW	10	33.25±2.34
低剂量组	0.15g/kg.BW	10	34.12±2.68
阴性对照组	0.00g/kg.BW	10	34.37±2.59

3 讨 论

免疫力是我们抵抗大多数疾病的主要武器，乳清蛋白中含有多种活性蛋白成分，可以作为一款品质优秀的蛋白质补充剂，在调节人体免疫功能方面发挥着不可忽视的作用。研究证实，乳清蛋白粉能促进各类免疫因子的释放，可为临床患者快速补充蛋白质从而提高机体免疫力[2]。本次实验中，我们可以看出中等剂量的乳清蛋白粉就已经显现出对小鼠免疫功能具有促进作用，因此，乳清蛋白粉能具有促进机体免疫力的作用。

参考文献：

[1]韩婷,蔡东联.乳清蛋白的营养特点和作用[J].肠外与肠内营养,2005,12(4):243-246．

[2]黄育英,卢漫芳,谷欣.老年急性缺血性脑卒中患者添加乳清蛋白早期肠内营养的临床研究[J].中国食物与营养,2015,21(9):83-86.