简介：目的构建针对人抑凋亡基因Livin的小干扰RNA（siRNA）重组表达质粒载体。方法通过分子克隆技术,设计并合成具有基因特异性的3组寡核苷酸片段,克隆到pmU6质粒载体,并经菌落PCR鉴定及测序鉴定,Livin的siRNA序列成功克隆到重组表达质粒载体中。结果经菌落PCR鉴定及测序鉴定证实,人Livin的siRNA序列成功克隆到表达载体中,插入序列正确。结论成功构建了LivinsiRNA质粒表达载体,为后续研究降低或沉默Livin基因表达后能否有效抑制膀胱癌细胞增殖和促进细胞凋亡奠定了基础。

简介：追求健康是人生的需要，是建设创新型国家的需要，也是提高人类生存质量增强自我保健能力的一件大事，它是构建社会主义和谐社会的重要组成部分。

简介：目的构建长链非编冯RNABRE-AS1的慢病毒表达载体。方法利用重叠延伸PCR法构建出BREAS1的全长目的片段，将全长目的片段及慢病毒载体质粒pCDHCMVMC8EF1分别双酶切后进行连接，转化到感受态大肠杆菌后，通过DNA测序鉴定筛选出阳性菌落，提取目的质粒。利用目的质粒制备包装慢病毒，并感染肾细胞癌细胞系OS-RC-2，分别利用荧光显微镜和荧光实时定量PCR检测细胞中BREAS1是否过表达。结果重叠延伸PCR得到正确的BREAS1全长序列，经过双酶切、连接、转化、筛选及I）NA测序，成功构建重组慢病毒载体质粒pCDH-BRE-AS1。通过荧光显微镜检测，几乎昕有经过嘌呤霉素筛选的OSRC2细胞均具有绿色荧光，显示其被重组慢病毒感染；荧光实时定量PCR显示，感染了RNABRE-AS1慢病毒的OSRC2细胞中，BREAS1的表达水平上升了38．5倍。EdU插入实验显示BREASl抑制肾癌细胞的增殖。结论本研究成功构建了BRE-AS1的慢病毒表达载体，并证明BREAS1能抑制肾癌细胞增殖。

简介：目的探讨以纤维蛋白凝胶为支架，通过组织工程技术以胃．重建膀胱的可行性。方法从实验动物获取膀胱黏膜，体外培养并扩增移行上皮细胞。分别通过纤维蛋白凝胶（实验组）和keratinocyte-SFM（对照组）将单个细胞悬液移植于带血管蒂的去黏膜胃片，将胃片缝成囊状（新膀胱），固定于腹壁。于术后2、4、6、8周取胃片进行组织学及免疫组化分析。结果实验组术后随时间延长新膀胱有不同程度挛缩；HE染色提示胃囊腔面有上皮样细胞覆盖，2周时细胞覆盖率约50％，4—8周时约70％。这些细胞分布不均匀，分层不明显；上皮样细胞AE1／AE3染色和CK7染色均阳性。对照组各标本均严重挛缩，腔隙消失，无上皮覆盖。结论将体外培养扩增的尿路上皮细胞通过纤维蛋白凝胶移植至去黏膜胃片，可以使去黏膜胃片移行上皮化，从而重建膀胱。

简介：目的：构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒并检测其在人胚胎肾293T细胞中的表达。方法：应用RT-PCR方法从大鼠肾脏组织总RNA中扩增出编码Uqcrfs1的cDNA,克隆至pUM-T载体并测序,然后亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,酶切鉴定及测序正确后以磷酸钙共沉淀法瞬时转染HEK293T细胞,使用RT-PCR、WesternBlot方法检测重组质粒在转录及蛋白水平的表达。结果：测序结果证实PCR扩增得到编码Uqcrfs1的cDNA序列正确;磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞后,在基因转录与蛋白表达水平,结果达到预期。结论：成功构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒,该重组质粒可在HEK293T中过表达。

简介：目的构建并鉴定逆转录病毒介导的Ku80基因RNA干扰表达体系,并建立稳定、高效、长久低表达Ku80的人肾癌786-O细胞株.方法针对Ku80基因,设计并合成3对特异性RNA干扰靶序列,退火形成双链DNA,与BglⅡ和HindⅢ双酶切后的pSUPERretro-puro载体连接,构建pSUPERretro-puro-siKu80干扰表达载体,并对重组载体进行测序鉴定.筛选出基因沉默效应最强的干扰序列后使用磷酸钙法共转染293FT细胞,产生的病毒颗粒随后感染786-O细胞,经嘌呤霉素筛选得到阳性克隆.用RT-PCR检测Ku80基因mRNA表达,Westernblot测定转染后786-O细胞中Ku80蛋白的表达量,以鉴定稳定细胞株.结果测序结果证实目的片断正确插入pSUPERretro-puro表达载体中,成功构建了pSUPERretro-puro-siKu80干扰表达载体,稳定转染干扰表达载体的786-O细胞Ku80基因的表达显著降低.结论成功构建了抑制Ku80基因表达的逆转录病毒载体,并获得Ku基因稳定干扰的人肾癌786-O细胞株,为下一步利用小干扰RNA技术研究肾癌的基因治疗奠定了基础.

简介：最近几十年来，妇女生第一胎的年龄越来越大。同样的趋势在男性群体也逐渐表现出来了。母亲年龄对生育、染色体异常、孕期并发症、先天缺陷以及对后代的整体健康的影响已经得到全面的研究，而且这些研究结果已经应用于临床受孕咨询和产前咨询中。但男性的年龄及其对生育结果的影响相对来说得到的关注度较低。本综述的目的是对最近相关文献中父亲年龄对生育结果的影响做一个综合评述。

简介：IgA肾病，是以IgA为主的免疫球蛋白在肾小球系膜区弥漫沉积所致的肾小球损害。不难看出，IgA肾病系免疫病理学诊断名词，即肾活检组织经免疫荧光染色，在肾小球系膜区可见IgA为主的免疫球蛋白颗粒状沉积，常伴有C3沉积，而少见补体的前期产物如C1q和C4的沉积。

简介：所谓血尿，是指新鲜尿液经离心沉淀，在显微镜下检查，如果每高倍视野红细胞〉3个，尿液红细胞计数〉10万个或12h尿沉渣红细胞〉50万个的一种尿异常现象。根据尿的肉眼外观和颜色可分为肉眼血尿和镜下血尿。尿液外观颜色正常，仅在镜检时发现红细胞计数增多，称为镜下血尿。肉眼观即可发现尿有血，称为肉眼血尿。

简介：“心肾综合征”（cardiorenalsyndrome，CRS）这一术语是由美国国立卫生研究院国家心肺血液研究所于2004年最早提出，但其概念及内容一直在演变，并不统一。直到2008年，在Ronco等发起下，由《急性透析质量创意》机构主办，在意大利威尼斯召开首届“国际心肾综合征共识研讨会”才第一次制定出CRS概念及分型的共识，此共识已于2010年发表。

简介：目的：了解维持性血液透析患者的睡眠质量,分析睡眠质量与生存质量的关系。方法：采用便利抽样的方法,使用匹兹堡睡眠质量指数量表（PSQI）、简明健康调查问卷（SF-36）及一般情况调查表、对我院等七家医院血液透析患者进行调查与分析。结果：有93.2%的患者PSQI总分≥5分,患者在各方面的生存质量较低,睡眠质量各因子得分与生存质量各因子得分均呈负相关,即PSQI得分越低,生存质量越高。结论：维持性透析患者的睡眠质量较差,睡眠质量影响生活质量,提高他们的睡眠质量对治疗和生存都有极为重要的意义。

简介：不育男性中频发的精索静脉曲张备受关注，面向治疗的分子水平的研究也随之增加。本研究的目的是探讨大鼠模型中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）及其受体在精索静脉曲张起的睾丸功能障碍中的作用。大鼠被随机分为三组：对照组，假手术组和精索静脉曲张组。部分结扎左肾静脉与左睾丸构建大鼠精索静脉曲张模型。对手术13周后的大鼠进行分析。睾丸细胞内DNA片段程度用末端脱氧核苷酸转移酶的脱氧尿苷三磷酸缺口未端标记法（TUNEL）检测。用约翰逊得分评估肾小管退化情况。用免疫组化和Westernblot技术检测TRAIL及其受体的表达。检测了细胞凋亡指数，约翰逊得分，TRAIL和TRAIL受体的表达。数据以平均值±标准偏差（s．d．）表示，并用计算机软件进行了分析。用Kruskal—Wallis和Dunn’s多重比较试验进行数捌分析。与假手术组和对照组相比，精索静脉曲张的大鼠生殖细胞凋亡指数增加（P=0．0031），约翰逊得分显著下降（P〈0．0001）。免疫组化和Westernblot分析表明，精索静脉曲张后，生殖细胞中的TRAIL-R1和TRAIL—R4的表达增加，TRAIL—R2的表达下降。在TRAIL和TRAIL—R3受体的表达上,各组间没有显著差异。这一研究结果表明，TRAIL及其受体可能神精索静脉曲张引起的罩丸功能障碍的发病机制中有潜在的作用。

简介：中年人正处于承上启下的时期，在事业、家庭等方面都是顶梁柱，负担重、压力大，往往忽视对自己身体的保健。中年搞垮了身体，到老年就过不去了。常见一些人刚到60岁出头就过世了，忙碌了一辈子，却没有享受晚年的幸福，实在是遗憾。

简介：高钾血症是临床常见的急症，发生率约占住院患者的1％～10％，严重的高钾血症可导致心律失常甚至死亡。而内科处理高钾血症的方法很多，为了评价各种方法的疗效，确定一线的急诊干预措施，我们回顾性地分析以往的随机对照研究资料，探讨合理治疗急性高钾血症的方法。

简介：目的探讨孤立肾病变的治疗方法.方法回顾分析我院自1990年5月～2000年8月收治的12例孤立肾病变患者.6例肾结石行肾盂切开取石术.2例孤立肾肿瘤,其中1例行肾部分切除术,1例2次行肿瘤剜除术.4例外伤性肾出血行保守治疗,其中2例因继发性出血而行超选择性肾动脉栓塞治疗.结果6例孤立肾结石随访0.5月～6年,平均3.3年,肾功能好转.2例孤立肾肿瘤中,1例于剜除手术后4年复发而再次行剜除肿瘤,半年后死于肺转移.另1例未复发.4例肾外伤均痊愈.结论对于孤立肾病变应早期积极处理,尽量减少肾单位的丢失.

简介：IgA肾病（IgAnephropathy,IgAN）是多基因、多因素参与的一种复杂性肾脏疾病,以肾脏组织系膜区IgA弥漫性沉积为特点,临床表现为血尿和（或）蛋白尿,但不伴有系统性损伤。本文就IgA肾病的诊治进展作一综述。

简介：20世纪60年代初，当Scribner和他的同事研究出建立长期血管通路的技术和一整套制备透析液的装置后，血液透析才作为慢性肾衰竭患者的替代治疗在世界范围开始应用。作为血液透析的关键环节之一，建立和维护血管通路的效能是血液透析医护过程十分重要的，一个理想的血管通路应当能够为血液透析提供足够的血流量，使用时间长，而且并发症少。除了选择合适的时机建立血管通路，并且能够选择最佳的方法和理想的部位制作血管通路，及时地评估血管通路的功能，必要时采用正确的方法解决血管通路并发症，才能更好维护血管通路的功能。

简介：恶性肿瘤严重危害人们的健康。据WHO统计，全世界平均每年死于恶性肿瘤者达690万人，新发病例870万例，且数字还在逐年增加。随着抗肿瘤新药的不断推出和各种联合化疗的应用，肿瘤化疗已有了长足的发展，恶性肿瘤患者生存期得到了延长，但化疗药物的不良反应仍是阻碍长期化疗的主要因素。

简介：与继发性睾丸衰竭相比，男性生精障碍的治疗目前大都收效甚微。从激素治疗，到补充相应营养成分（抗氧化作用），很多种疗法都被尝试过了。虽然有些研究表明某些疗法有一定的效果，但是没有任何一种疗法能够对所有患者都起效，同时又无法预测该疗法能够适用于哪类患者。先天生精障碍可能由许多不同的还未被证实的精子产生方面的缺陷引起的。深入理解这些缺陷，能够帮助我们寻求更有效的治疗方案，同时能够帮助我们筛选某种疗法的适用患者群。本文着眼于综述目前男性不育激素和抗氧化疗法的基本原理和成效，特别关注生精障碍的相关疗法。尽管目前辅助生殖技术已经大大取代了生精障碍的传统医疗方法，但二者将继续齐头并进发挥作用，相互结合共同起效。

简介：男性不育的评估和手术治疗领域经过数次演变和扩展后，目前已经有了更精确的诊断和适应个人的治疗方法，死亡率逐渐降低，成功率逐渐提高．男性不育手术目前被分为四个主要的大类：1）诊断手术；2）改善精子生成的手术；3）提高精子运输的手术；4）提取精子用于IVF—ICSI的手术．尽管现在的男性不育治疗效果比以前有了显著的提高，但还是有些达不到妊娠的要求，这可能是由一些我们还不知道的因素造成的。医生在治疗不育时应提倡“夫妻双方共同治疗”的准则，要求在实施具体的治疗方案之前，夫妻双方都进行彻底的评估，并进行广泛讨论决定方案。