简介：摘要单链抗体具有分子量小，免疫原性低，组织穿透力强，特异性强等优点，通过重组DNA技术将单链抗体（singlechainantibodyfragment,scFv）基因与其他效应蛋白基因融合在一起，经表达后可以得到具有scFv特性和所融合的效应蛋白活性的scFv融合蛋白。这种融合蛋白已应用于许多领域的研究中，并已显示出较高的价值。本文就scFv融合蛋白的研究和应用做一综述。

简介：摘要近年来在骆驼和护士鲨等动物的体内发现了一种重链抗体。重链抗体和普通的抗体相比缺少轻链，仅有可变区，但依然保留了抗原结合能力。通过基因工程改造重链抗体形成的单域抗体不仅保留了分子量小、物理稳定性高、容易表达等特性优点，而且亲和力高、不易聚集，被广泛应用于科研和临床诊断。

简介：应用Pharmacia公司的重组噬菌体抗体系统,从经过人交联纤维蛋白特异抗原D二聚体（DD）免疫过的鼠脾细胞mRNA中构建出组合单链抗体（ScFv）cDNA文库。文库cDNA克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E,转化大肠杆菌TG1,得到2.5×105个氨苄抗性菌落。通过噬菌体表面呈现,用DD对表达的重组噬菌体单链抗体文库进行三轮亲和富集获得一株特异抗DD的噬菌体单链抗体（ScFvA11）。经Phage-ELISA鉴定,呈现在噬菌体表面的ScFvA11与DD结合的ELISA阳性滴度小于107tfu/ml,而与人纤维蛋白原结合的ELISA滴度大于1010tfu/ml,两者相差1000倍以上。表明ScFvA11具有较好的DD结合特异性。经序列分析,ScFvA11cDNA全长729bp,其中Vh基因354bp,编码118个氨基酸;Vl基因327bp,编码108个氨基酸;Vh与Vl之间为（Gly4Ser）315个氨基酸连接肽。

简介：载脂蛋白（APO）B主要分布在人体血液中的的低密度脂蛋白（LDL）和极低密度脂蛋白（VLDL）中，约占LDL蛋白质的95％～99％，其主要功能是参与脂质转运和被细胞膜上的LDL受体识别。研究证明，apoB与动脉粥样硬化（AS）的发生有着密切的关系。近年来，多数医院已开展了测定人体血液中apoB含量来判定AS的危险程度。而国内所用的试剂盒均为多克隆抗体，这给临床测定结果的准确性和特异性带来了一定的差异。为此国内许多研究单位拟想通过基因重组技术，将apoB单抗细胞株通过逆转录、构建使其表达apoB单链抗体。

简介：产生免疫原性的残基都是位于蛋白表面的暴露残基,为了消除鼠抗体对人的免疫原性,利用表面再塑方法对本室克隆的鼠抗人纤维蛋白抗体单链Fv片断进行了人源化分子设计。首先确定了鼠及人Fv表面残基,在此基础上分析了鼠与人Fv间表面残基的差异,将有差异的鼠表面残基换成人的。提出了残基最高频率人源化及最相似链人源化两种人源化方案。人源化后鼠抗人纤维蛋白抗体单链Fv的结构经Profile-3D验证是合理的,置换的表面残基溶液可及性未变,且未影响CDRs的结构,应不会影响与纤维蛋白的亲和力,为鼠抗体人源化实验研究奠定了基础。

简介：目的构建表达抗人红细胞血型A抗原50A杂交瘤细胞的单链抗体(SeFv)。方法应用重组噬菌体抗体技术，从50A杂交瘤细胞中分离、构建单链抗体基因，并将其克隆入噬粒pCANTAB5E中，转化E．coliXL-Blue，辅助噬菌体援救构建50A噬菌体单链抗体库；采用完整红细胞亲和富集法淘选阳性重组噬菌体，鉴定重组噬菌体并进行序列测定分析；免疫印迹试验检测重组单链抗体的特异性抗原活动。结果用M13KO7援救XL—Blue转化菌中的pCANTABSE重组噬菌体，得到滴度为4×10^9pfu／ml噬菌体单链抗体库；免疫印迹试验证实表达产物保留了亲本单抗对人红细胞血型A抗原的特异性亲和力。结论成功构建50AMcAb单链噬菌体抗体库，为进一步研制高特异性、高亲和力的基因工程原核血型检定抗体试剂奠定了基础。

简介：用Biosym公司开发的计算机辅助分子设计系统模建了鼠抗人纤维蛋白抗体Fv片断的三维结构。Fv是由重链可变区(Vh)和轻链可变区(Vl)两个结构域组成的具有抗原结合能力的最小抗体片断。先分别模建了Vh和Vl两个结构域,然后搭建出Fv片断的整体三维结构,并对模建的结构进行了分子力学和动力学优化。对结构的合理性验证显示模建结构是合理的。本研究为鼠抗人纤维蛋白抗体Fv片断的人源化的分子设计打下了基础。

简介：摘要 : 副溶血弧菌是一种革兰氏阴性细菌，主要通过水产品和伤口等途径感染人类和水生生物，导致人和水生动物发生疾病。不耐热溶血毒素 TLH是副溶血弧菌的一个重要溶血素，对其抗体分子研究具有极其重要的意义。本文以抗副溶血弧菌 TLH 的 scFv 为出发点，对其基因序列进行了生物信息学分析，为进一步研究 scFv 与 TLH 相互作用提供一定理论基础。

简介：摘要目的融合穿梭肽和狂犬病单链抗体，优化在大肠杆菌中的表达条件，获得具有中和活性的重组穿梭肽-单链抗体。方法重新编码SO57抗体序列，在N端融合Arg12的穿梭肽，构建pET22(b)-rSO57表达载体，在大肠杆菌中重组表达。在菌体生长密度OD600、诱导时间、诱导温度和诱导剂浓度条件进行优化，获得较高的表达效果。使用固定化金属螯合层析对重组蛋白进行纯化，测定了重组单链抗体的相对亲和力，通过rSO57/CVS-11混合感染细胞和快速荧光灶抑制实验(rapid fluorescent focus inhibition test，RFFIT)，验证重组单链抗体的中和作用。结果rSO57构建成功，在BL21(de3)中诱导表达，最优表达条件为菌体密度OD600在0.8时，使用0.4 mmol/ml的IPTG诱导，16 ℃下诱导24 h，rSO57以可溶形式表达，表达量占到了菌体可溶性蛋白的19.8%。层析纯化后，获得了纯度为84%的重组rSO57。ELISA实验显示，rSO57的相对亲和力系数Ka＝4.3×105。当rSO57与CVS-11混合时，随着稀释的增加，细胞的感染率上升，表明重组抗体具有中和狂犬病病毒的能力。使用RFFIT进行测定，50 μg的rSO57相当于2.17IU的狂犬病中和血清。结论本实验重组表达了融合穿梭肽的重组单链抗体rSO57，且可以中和狂犬病病毒，以期制备可以用于狂犬病治疗的特异性和靶向性的抗病毒药物载体。

简介：广东的小阳在台资厂上班5年了，感觉替别人打工就是没前途，还整天忙得晕头转向，工资也不多。后来他到了深圳，准备自己创业．可是选项目的时候头都大了，整天东奔西跑或上网．最后无意间在逛街的时候发现一种小东西一一姓名链。当时觉得新颖就买了一串，两个字15元，怎么这么贵？店主说这个独特．拿货贵云云，他也没太在意。

简介：比较双链腺相关病毒（Double－strandedadeno－associatedvirus，dsAAV）及单链AAV（Single－strandedadeno－associatedvirus，ssAAV）介导Exendin－4分泌表达效率。应用基因工程方法构建dsAAV／pSSHG／Exendin－4，与重组ssAAV比较转染NIH3T3细胞效率及转染后细胞上清Exendin－4浓度，免疫组化检测Exendin－4表达。经限制性内切酶及测序证实载体构建成功，测定重组dsAAVpSSHG／Exendin－4滴度为2．5＆#215;1011pfu，较重组ssAA滴度高（2．5×109pfu）；dsAAV／pSSHG／GFP转染NIH3T3细胞表达绿色荧光强；ELISA法检测感染重组dsAAV的NIH3T3细胞上清中Exendin－4的浓度为181．1±8．75pmol／ml，较重组ssAAV分泌浓度（133．81±8．09pmol／ml）升高（P＜0．05）；重组dsAAV及ssAAV转染NIH3T3细胞Exendin－4表达均为阳性。重组dsAAV可分泌表达Exendin－4并较ssAAV具有更高效转染能力，为研究Exendin－4功能及应用于临床打下基础。

简介：人工合成了芋螺毒素SO3的基因片段,通过链延伸方法获得了SO3的全长基因.在此基础上,将SO3基因插入到含抗大鼠转铁蛋白受体的单链抗体基因的pTIG-Trx表达载体中,构建含抗大鼠转铁蛋白受体单链抗体和SO3融合基因的重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)和Origmia(DE3)/DsbC并得到了表达,该融合蛋白主要以包涵体形式存在.为进一步研究芋螺毒素SO3跨血脑屏障转运和治疗作用奠定了基础.

简介：摘要针对双电源单回链电网结构区域供电网络存在的电网风险，提出了一种远方备自投策略。通过加装光纤通道接口、数字接口装置，实现与光纤网的接口，建立保护信号传输通道，远方备自投利用传输通道向对侧装置发送远方自投信号，实现两个变电站备自投的相互配合。该策略有效化解了双电源单回链电网结构变电站全站失压的电网风险，提高了电网的供电可靠性。

简介：摘要：电子文件的真实性、安全性、无法实施全生命周期管理等问题，一直让电子文件单套制归档与管理的工作不能有效落实。在区块链技术下，电子文件单套制归档与管理有了技术上的支持与突破，能够对这一类问题进行彻底解决。基于此，本文对区块链技术下电子文件单套制归档与管理展开了深刻探究，提出了该模式下相关工作现存的问题，并分析了解决策略。

简介：美国科学家近日揭示了单链DNA在穿越碳纳米管时发生的“易位”过程。这一过程可引发电流的不规则激增．而其中涉及的电子信号特性或可为纳米孔技术在快速DNA测序中的应用提供帮助。

简介：摘要：问题是有效开展课堂教学，发展学生核心素养的抓手，而有逻辑结构、层层递进的问题设计是实施有效提问的根本保证。这就要求教师基于整体教学规划设计问题、通过有逻辑结构的问题群，引导学生进行逻辑思考、培养高阶思维，促进学生深度理解，进行层层递进、环环相扣的单元问题链设计。本文将围绕“问题链+任务单”单元式教学在高中数学中的应用展开讨论。

简介：随着电子商务产业的持续增长,敦豪全球货运公司不断优化供应链服务,以满足千变万化的多渠道供应链履单需求。敦豪全球货运公司已经在美洲扩大了国际供应链服务范围。客户需要一个操作平台,以协调管理所有履单需求,敦豪国际供应链部门已经为众多领域设计出具有成本效益、专门针对客户购买趋势变化的多种.

简介：前不久．一篇《沃尔玛低价背后的黑幕——供应商严重违反劳动法》的新闻报道被炒得沸沸扬扬。为了追求竞争优势．零售巨鳄对全球供应商“低价．再低价”的要求从来就没有停止过。

简介：某个伟大善良的大人物遇刺的时候，每个人都记得他们当时在哪里，在做什么。甘地、教皇、撒切尔——只要你年纪够大历史在你的感官上刻下了痕迹。你可以杀死一个政治家，但是他们的思想通常都能流传下去——它们获得了自己独立的生命。那么，数学家们的思想又要危险多少倍呢？

简介：摘要目的探讨抗磷脂抗体（aPL）阳性患者在病程中发生血清学转化的情况及可能的影响因素。方法在北京大学第一医院前瞻性队列数据库中筛选2009年1月至2019年10月间aPL持续阳性至少12周、随访时间至少9个月的患者。分析入选患者在随访过程中狼疮抗凝物（LA）、抗心磷脂抗体（aCL）、抗β2糖蛋白I抗体（抗β2GPI）的变化情况，并分析不同aPL血清学转化的影响因素。统计学方法使用χ2检验或Fisher精确检验和Mann Whitney U检验，多因素分析采用Logistic分析。结果本研究共纳入93例患者，25%原发性APS，63%合并SLE。在平均45个月的随访时间里，LA、aCL和抗β2GPI转阴率（2次以上检测阴性，间隔至少12周）分别为11%（9/83），26%（18/69）和24%（13/53）。多因素分析结果表明，LA双法阳性是LA转阴的独立保护性因素[OR=0.055，95%CI（0.006，0.545），P=0.013]；aCL中高滴度阳性[OR=0.199，95%CI（0.050，0.798），P=0.023]和aPL基线阳性数量[OR=0.220，95%CI（0.066，0.735），P=0.014]是aCL转阴的独立保护性因素；而合并SLE是aCL转阴的独立危险因素[OR=13.50，95%CI（1.195，152.6），P=0.035]。与aCL结果类似，抗β2GPI中高滴度阳性[OR=0.168，95%CI（0.032，0.872），P=0.034]和aPL基线阳性数量[OR=0.243，95%CI（0.073，0.813），P=0.022]是抗β2GPI转阴的独立保护性因素。基线三抗体阳性的40例患者中未发现与aPL转阴的相关因素。aPL持续阳性与再发血栓/病态妊娠事件无明确相关性。结论aPL存在不同程度的血清学转化，其中aCL的转阴率最高。抗体低滴度阳性、抗体阳性数量少与aCL和抗β2GPI转阴相关。SLE患者中的阳性aCL更容易转阴；LA双法阳性患者多数保持持续阳性。