简介：骨性关节炎是当前世界范围内最常见的关节疾病,常侵犯膝关节、髋关节、手和脊柱等。是老年人群致残的最常见病因之一,并严重影响老年人的生活质量。当前普遍的观点认为骨关节炎（OA）影响受累关节内的所有结构,并最终导致软骨的退化。当前软骨下骨的变化受到更多的关注,因为随着疾病的进展及软骨细胞的缺失,软骨下骨也会发生结构性的改变。关节软骨和软骨下骨的变化受软骨细胞和成骨细胞的调节,这两种细胞在维持这些组织的完整性和功能方面扮演着重要角色。有证据表明,软骨细胞和骨细胞之间存在化学串扰,骨细胞能通过细胞间信号传导促进软骨细胞代谢。这些疾病发展过程中细胞功能的改变将使我们获得新的疾病标志物。的确,如果软骨和软骨下骨表现为一个相互联系的功能单位,那么对于这两种细胞研究的深入以及骨性关节炎的诊断和治疗将能得到巨大的推动。

简介：本研究观察人树突状细胞（dendriticcells，DC）来源的外泌体（DC—derivedexosome，DCex）对人骨髓间充质干细胞（mesenchymalstemcells，MSC）成骨分化的影响。采用超速离心法从树突状细胞培养上清中获取DCex，应用电子显微镜观察DCex形态并通过流式细胞术检测和鉴定其细胞来源。取第3代MSC，设3组培养诱导体系：①对照组：d—MEM基础培养液组；②实验组：d—MEM基础培养液＋DCex（10μg/m1）组；③α-MEM基础培养液＋标准诱导剂组。采用荧光实时定量PCR、琼脂糖凝胶电泳检测各组成骨分化转录因子Runx2mRNA的表达情况，并进行碱性磷酸酶（ALP）活性检测。另外，荧光染料DiI标记DCex，应用共聚焦显微镜观察DCex进入MSC的过程。结果显示，在电子显微镜下DCex呈典型的圆形或椭圆形膜层结构，直径为40—100nm，并表达DC细胞的标志物CD83，CD86，CD80和HLA—DR。在DCex处理MSC后6h时，可在共聚焦显微镜下观察到进入到MSC胞质内的DCex，随着作用时间延长，细胞荧光强度增加。按组培养第7天，DCex实验组Runx2表达较对照组增高，差异有统计学显著性（P〈0．05）；MSC培养第14天，DCex组ALP含量OD值与对应蛋白比为2．22±0．27，显著高于阴性对照组（1．20±0．21）（P〈0．01），但低于标准诱导组（3．22±0．24）（P〈0．05）。结论：DCex可以促进MSC向成骨细胞分化，其且体机制仍需讲一步研穷证实．

简介：背景：Hedgehog信号通路不仅参与骨髓间充质干细胞的成骨向分化,而且是位于RANKL-RANK-OPG系统调节轴上游的重要通路之一,对成骨细胞RANKL的分泌表达具有重要的调控作用,其调控机制已逐步被揭示。目的：对Hedgehog信号通路调控成骨细胞RANKL表达的研究现状进行综述。方法：通过检索CNKI,GoogleScholar,PubMed等数据库,分别以＂Hedgehog,成骨细胞,骨髓间充质干细胞,甲状旁腺激素相关蛋白,环磷酸腺苷应答元件结合蛋白,活化T细胞核因子,核因子κB受体活化因子配体＂和＂Hedgehog,Osteoblast,BMSCs,PTHrP,CREB,NFAT,RANKL＂为检索词进行检索,审阅有关Hedgehog信号通路与成骨细胞RANKL表达相关的文献,根据纳入标准最终选取37篇文献进行综述。结果与结论：Hedgehog信号蛋白可促使骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,同时又可以通过上调细胞内甲状旁腺激素相关蛋白的表达,进一步激活下游细胞因子环磷酸腺苷应答元件结合蛋白和活化T细胞核因子,两者协同促使成骨细胞RANKL基因表达,进而增加破骨前体细胞向破骨细胞分化、成熟。

简介：目的研究c（RGDfK）肽修饰后的纯钛表面对小鼠成骨细胞黏附、增殖的影响。方法应用超声微孤氧化技术和多巴胺化学偶联的方式分别在纯钛表面构建MAO-PDA-GRGDSP（X组）、MAO-PDA-C（RGDfK）（H组）和MAO（M组）功能涂层，采用扫描电镜进行形貌分析，通过CCK-8实验检测和激光共聚焦观察MC3t3-E1细胞在各组的早期黏附和增殖情况。结果扫描电镜检测涂层呈多孔形貌，多巴胺的修饰孔变小，并有颗粒状的RGD肽在微孔内。CCK-8结果显示，H组的OD值在各个时间点上都高于X组和M组，且各组比较具有统计学意义（P〈0．05）。激光共聚焦观察细胞在X组和H组表面的状态均好于M组，但H组表面细胞的数目更多，丝足铺展的面积更大。结论线形肽GRGDSP和环形肽C（RGDfK）对细胞的早期黏附和增殖皆有促进作用，且环形肽C（RGDfK）的作用更强。

简介：

简介：本研究探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米在骨髓瘤骨病（myelomabonedisease,MBD）病理状态下对成骨细胞的影响。以小鼠骨髓瘤细胞RPMI8226与小鼠成骨细胞MC-3T3E1共培养和上清干预培养的方式,模拟体内骨髓瘤骨病状态,采用改良四甲基偶氮唑盐比色（MTT）法检测硼替佐米对MC-3T3E1细胞的增殖抑制,AnnexinV/PI染色流式细胞术检测MC-3T3E1细胞的凋亡,RT-PCR及Westernblot法比较加入硼替佐米后MC-3T3E1细胞成骨相关基因及蛋白Runx2/cbfa1、OSX（osterix）、骨钙蛋白（osteocalcin,OCN）的表达变化。结果表明：较高浓度的硼替佐米对成骨细胞MC-3T3E1的增殖抑制呈剂量依赖性,48小时IC50为38.1nmol/L。低浓度（5nmol/L）硼替佐米对单独培养的MC-3T3E1增殖无明显影响（p〉0.1）,但可使与骨髓瘤细胞RPMI8226共培养及上清干预培养的MC-3T3E1凋亡比例分别降低24.6%和32.5%,并且促使成骨细胞相关基因osx、ocn的mRNA及蛋白表达增加（p〈0.05）,而Runx2/cbfa1无明显变化（p〉0.05）。结论：低剂量硼替佐米可通过活化成骨细胞内部机制减弱骨髓瘤细胞引起的成骨细胞凋亡,增强Runx2/cbfa1通路中成骨细胞相关基因osx、ocnmRNA及蛋白的表达,可能在骨髓瘤骨病中保护成骨细胞,维持成骨细胞生存。

简介：目的探讨成骨细胞在细菌纤维素/聚乳酸/羟基磷灰石复合支架中的生长和增殖情况。方法将成骨细胞以5×104/ml的密度接种于细菌纤维素（BC）、细菌纤维素/聚乳酸（BC/PLA）、细菌纤维素/聚乳酸/羟基磷灰石（BC/PLA/HA）三种支架中,进行体外培养。采用MTT比色法测定1、3、5、7d的成骨细胞增殖情况;碱性磷酸酶活性测定法检测3、6、9d的碱性磷酸酶活性变化,并通过扫描电镜观察细胞在复合支架中的形态变化。结果实验组与对照组比较1、3、5、7d细胞的增殖量（OD值）有统计学差异（p〈0.05）,其中BC/PLA/HA组的OD值高于其他实验组;第3d至第9d三组细胞的ALP分泌量均呈上升趋势,各组间比较均有统计学差异（p〈0.05）;复合培养6dSEM观察可见三组材料中均有细胞的粘附,BC/PLA/HA组的细胞生长状态好于其他两组材料。结论BC/PLA/HA较BC/PLA和BC有利于成骨细胞的增殖和生长。

简介：背景：酒精性股骨头坏死的病理过程主要是酒精中毒引起的骨细胞脂肪变性、坏死、沉积及骨髓间充质干细胞分化成骨细胞、破骨细胞过程异常导致的骨代谢紊乱引起骨质疏松,进而造成股骨头软骨下骨小梁塌陷,最终导致股骨头缺血性坏死。目的：就成骨细胞、破骨细胞与酒精性股骨头坏死的关联性做系统性综述。方法：第一作者应用计算机检索2016年5月前PubMed数据库、中国期刊全文数据库的相关文章,英文检索词＂osteoblast,osteoclast,alcohol-inducedONFH,bonemetabolism＂;中文检索词＂成骨细胞,破骨细胞,酒精性股骨头坏死,骨代谢＂。共检索到133篇相关文献,38篇文献符合纳入标准。结果与结论：在骨代谢过程中,成骨细胞的数量与活性影响、调控破骨细胞的数量与活性,而破骨细胞的数量与活性也会反作用于成骨细胞。不断深入了解探索成骨细胞、破骨细胞及其之间的作用机制,不仅能够对酒精性股骨头坏死的发病及修复机制有更为详尽的认识,更能够对其他相关骨代谢疾病的预防与靶向治疗提供新的思路与策略。

简介：背景：细胞共培养技术是在体外条件下将细胞与另一种细胞共同培养。对于成骨细胞和脂肪细胞横向分化研究多采用体外条件下成脂诱导液诱导成骨细胞发生横向分化，而忽略了体内环境中细胞互相作用的因素。目的：探讨在Transwell间接共培养条件下成熟脂肪细胞诱导成骨细胞成脂横向分化的能力。方法：①选取小鼠成纤维样3t3-l1前体脂肪细胞进行成脂诱导为成熟脂肪细胞；②实验分组：A组接种成熟脂肪细胞(Transwell间接共培养体系下室)，B组接种小鼠成骨样细胞mc3t3-e1(以1∶4比例接种到Transwell间接共培养体系上室)，C组单独培养的小鼠成骨样细胞mc3t3-e1；③检测指标：分别在7，14，21d倒置相差显微镜下观察细胞形态变化，检测各组细胞三酰甘油相对含量、成脂目的蛋白PPARγ2表达，并进行油红O染色以及茜素红染色观察；以0，24，36h为截点检测B组与C组细胞增殖抑制率的变化。结果与结论：①培养2周时，3t3-l1细胞由长梭形变为圆形，胞质内脂滴增多呈亮圆形，油红O染色鉴定后备用；②细胞形态：B组共培养7d时呈长梭形，未见透明脂滴；14d时胞质内出现黑色颗粒及小圆形脂滴；21d细胞形态由长梭形变为椭圆形或圆形，脂滴变大；③茜素红染色：7，14，21d时B组细胞呈染色区减少的趋势，C组细胞无明显变化均呈大片着色区；④油红O染色：7，14，21d时，B组细胞染色区呈递增趋势且与时间成正比，C组细胞染色阴性且无明显变化；⑤三酰甘油：B组细胞三酰甘油聚集量呈递增趋势且与时间成正比，B组组间及与A组相比差异有显著性意义(P<0.05)，C组无明显变化(P>0.05)；⑥MTT抑制率：B组细胞增殖抑制率与时间成正比，与C组差异有显著性意义(P<0.05)；⑦Westernblot实验：B组细胞PPARAγ2蛋白表达量呈递增趋势且与时间成正比，与A、C组相比，差异均有�

简介：摘要：研究证实PI3K/Akt信号通路在调控成骨细胞、破骨细胞的骨代谢中发挥着重要作用，对维持人体骨稳态具有一定的意义。本文拟探讨该信号通路在成骨细胞分化、破骨细胞凋亡中的作用，并探析以miRNA为代表的非编码RNA在PI3K/AKt信号通路中调控骨代谢的作用机制，以期为骨代谢相关疾病的防治提供理论依据。

简介：目的探索物理混合及化学交联两种方法制备的细菌纤维素（BC）/明胶支架材料用于成骨细胞体外培养的可行性。方法采取物理混合和化学交联两种方法将BC和明胶两者结合制备出海绵状复合体,接种成骨细胞后培养观察细胞形态,考察ALP活性表达,HE染色和共聚焦观察材料表面细胞情况和粘附。结果物理混合法制备的BC/明胶细胞增殖和粘附性能,ALP表达量优于单纯BC和化学交联制备的BC/明胶。结论物理混合法制备BC/明胶复合支架材料可以作为成骨细胞体外培养的良好载体。

简介：目的探讨P物质对骨髓基质干细胞（BMSCs）来源的成骨细胞（OB）与内皮细胞（EC）体外联合培养的影响.方法分别建立BMSCs来源的OB与EC单独培养体系,以及按2∶1的比例体外直接或间接共培养体系.实验组：各培养体系细胞内同时加入1＆#215;10-8mol/LP物质（n=6）,对照组：各培养体系不添加P物质（n=6）.培养48h后采用流式细胞仪分析细胞的增殖与活性,并采用酶联免疫吸附法测定碱性磷酸酶（ALP）的表达,实时定量聚合酶链式反应检测骨钙素（OC）mRNA基因的表达.比较两组不同培养方式细胞功能的变化.结果与对照组比较,实验组OB单独培养、间接共培养时细胞G1期减少,G2/M期明显增高,差异均有统计学意义（P＜0.05）.实验组OB单独培养、间接共培养、直接共培养的细胞ALP增殖活性[（2.877±0.188）、（3.053±0.179）、（4.345±0.305）]及OCmRNA的表达量[（1.682±0.155）、（3.188±0.213）、（3.720±0.194）]均明显高于对照组[（2.600±0.233）、（2.842±0.120）、（3.220±0.191）;（1.360±0.141）、（2.272±0.143）、（2.507±0.176）],差异均有统计学意义（P＜0.05）;而EC单独培养的ALP增殖活性和OCmRNA的表达量两组间比较差异均无统计学意义（P＞0.05）.实验组间接共培养、直接共培养的ALP增殖活性及OCmRNA的表达量较OB单独培养明显增高,且直接共培养较间接共培养也有所提高,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论BMSCs来源的OB与EC共培养细胞相容性良好,P物质可显著促进共培养体系中OB的增殖与活性.

简介：

简介：背景：前期实验发现掺锶的聚磷酸钙材料对单独培养内皮细胞或成骨细胞的行为有显著促进作用。目的：观察掺锶聚磷酸钙对共培养下成骨细胞与脐静脉内皮细胞行为和功能蛋白表达的影响。方法：取第3代人脐静脉内皮细胞与人成骨肉瘤细胞MG63以2∶1的浓度比接种于24孔板中，然后再分别加入掺锶聚磷酸钙、聚磷酸钙与羟基磷灰石，共培养7d后。采用ELISA法检测细胞血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子蛋白的表达，采用MTT法检测细胞活性。结果与结论：与聚磷酸钙与羟基磷灰石相比，在掺锶聚磷酸钙表面生长的细胞呈现更加良好的形态，细胞融合生长形成单层覆盖在材料表面，并且在材料表面有一定的跨度生长，说明掺锶聚磷酸钙材料能促进内皮细胞在其上黏附、伸展，有利于细胞的生长和增殖。掺锶聚磷酸钙组细胞分泌的血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子明显高于聚磷酸钙组和羟基磷灰石组（P〈0.05），说明掺锶聚磷酸钙可上调血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子蛋白的表达

简介：目的通过微弧氧化-硅烷偶联不同浓度抗菌肽KSL对钛片表面进行成骨细胞相容性检测和牙龈卟啉单胞菌抗菌性检测，评价其生物相容性及抗菌性。方法超声微弧氧化-碱处理-硅烷膜层为对照组（A组），载抗菌肽KSL0．25mg／ml（B组）、KSL0．50mg／ml（C组）、KSL0．75mg／ml（D组）为实验组。扫描电镜观察试件表面形貌特征，CCK-8检测不同时间段细胞黏附及增殖情况，ALP检测不同时间段碱性磷酸酶活性，激光共聚焦显微镜观察试件表面的活死菌比例数。结果CCK-8和ALP的检测结果显示四组材料表面的增殖、黏附和碱性磷酸酶活性顺序为D组〉C组〉B组〉A组，四组的比较差异均具有统计学意义，激光共聚焦显微镜显示在有效杀菌浓度下抗菌肽KSL浓度越高抗菌效果越好。结论抗菌肽KSL涂层具有良好的生物相容性与抗菌性。

简介：目的比较不同孔隙率的锶磷灰石(含5at%锶的羟磷灰石,Sr-HA)陶瓷在体外培养条件下对兔骨髓成骨细胞生物学行为的影响.方法抽取健康兔的骨髓组织,体外培养,诱导分化为成骨细胞,分别与孔径约为300μm-600μm、孔隙率分别为50%、60%、70%的Sr-HA以及孔隙率为70%的纯羟磷灰石陶瓷体复合,在不同时间点利用相差显微镜及扫描电镜观察,并进行碱性磷酸酶的定量检测.结果兔骨髓成骨细胞与不同孔隙率的Sr-HA陶瓷体外培养后,表现出典型成骨细胞的形态特征和生物学特性,Sr-HA多孔陶瓷有利于细胞的贴附、生长与增殖,并对细胞的功能无不良影响.其中,孔隙率为70%的Sr-HA陶瓷更有利于细胞向材料内部爬行.结论Sr-HA多孔陶瓷是较理想的骨组织工程支架材料,成骨细胞复合Sr-HA陶瓷用于骨缺损的修复,具有广阔的临床应用前景.孔隙率为70%的Sr-HA陶瓷由于具有良好的孔隙连通性,在促进成骨细胞生长方面表现出更佳的效果,较其他孔隙率的Sr-HA陶瓷更适用于骨组织工程支架材料.

简介：目的探讨不同浓度的葛根素溶液对纯镁经超声微弧氧化植酸处理后表面生长的成骨细胞的影响，确定最适宜成骨细胞生长的浓度。方法取四组不同浓度组：A组0mol／L葛根素溶液，B组1×10^-8mol／L葛根素溶液，c组1×10^-6mol／L葛根素溶液，D组1×10^-4mol／L葛根素溶液，通过CCK-8法检测不同时间点纯镁试件表面生长的成骨细胞的黏附、增殖状况，激光共聚焦显微镜下观察细胞的早期骨架形态。结果纯镁经超声微弧氧化后植酸处理达到封孔效果，成骨细胞附着于试件生长后加入相应浓度的葛根素溶液，四组实验CCK-8黏附、增殖数据显示C组〉B组〉A组，A组与D组之间未见统计学差异，激光共聚焦显微镜下显示C组的细胞形态效果最好。结论1×10^-6mol／L葛根素溶液为促进纯镁UMAO植酸涂层表面的成骨细胞生长的最适宜浓度。

简介：背景:骨髓瘤骨病因骨骼疼痛、溶骨性破坏导致患者可能懒动而导致骨质丢失增加、骨病加重。目的:探讨运用液体流动装置模拟人机械运动时产生的流体剪切力在骨髓瘤环境下,瘤细胞(U266细胞)对骨细胞(Y4细胞)、破骨细胞的作用,及其对骨细胞分泌的RANKL表达的影响。方法:①建立液体流动装置,实验组为U266细胞培养液,对照组为Y4标准培养液,每组均设流动和不流动模式;体外细胞传代培养骨髓瘤细胞系U266细胞和小鼠骨细胞系Y4细胞;②再取新的Y4细胞,按实验分组再培养48h,显微镜下观察骨细胞、破骨细胞的形态并计数;③ELISA定量检测RANKL的水平;WesternBlotting检测RANKL蛋白;④建立RANKL+实验样品+标准培养液的体系,取RAW264.7细胞体外培养,用RANKL干预诱导,TRAP染色观察RAW264.7细胞株分化的破骨细胞数量及状态。结果与结论:①与对照组相比,U266细胞培养上清下的Y4细胞计数显著下降,形态变化明显;TRAP阳性细胞数增加和RANKL蛋白表达显著升高(P均<0.05);②动模式较非流量模式,Y4细胞数量明显增多,TRAP阳性细胞数明显减少,骨细胞表达的RANKL蛋白降低(P均<0.05);③结果说明,骨髓瘤细胞可以抑制正常骨细胞的生长和促进RANKL蛋白和破骨细胞的增殖。与静态相比,流体切应力可促进骨细胞的增殖,RANKL蛋白表达受抑制和抑制破骨细胞的增殖。因此,推测机械运动可以防止骨髓瘤骨病进展。

简介：背景：目前骨组织工程中,支架材料的生物相容性和生物力学性能都不尽满意,后续的材料降解也是亟待解决的问题.新材料、方法、技术以及医学研究相结合,可以使骨组织工程中支架的外形与结构、生物相容性、降解速率都有很好的改进.目的：通过介孔纳米羟基磷灰石/聚乳酸（nano-hydroxyapatite/polylacticacid,nHA/PLLA）复合物的支架构建以及与成骨细胞的相容性研究,旨在开发由2种材料复合而成具有更好的生物相容性的骨组织工程支架.方法：采取冷冻快速成型法制备nHA/PLLA复合物,BET法测定孔隙率,扫描电镜（scanningelectronmiscroscopy,SEM）观察材料内部结构等进行物理性能表征,X线衍射（X-raydiffraction,XRD）表征材料物理学特性.SEM观察成骨细胞在nHA/PLLA内生长、黏附、增殖情况;荧光倒置显微镜观察并计算细胞在该支架材料内的存活情况;MTT实验测定nHA/PLLA复合物对成骨细胞的活性影响.结果：制备的nHA/PLLA复合物,通道孔径为（164±52）μm,介孔率为89.3％±1.4％;干性和湿性nHA/PLLA复合支架的压缩模量分别为（1354.6±53.7）kPa和（1012.8±61.3）kPa.MTT实验结果表明,nHA/PLLA复合物对成骨细胞活性无显著影响,随着孵育时间的延长,黏附在复合物表面及介孔中的细胞数量逐渐增加.结论：nHA-PLLA复合物是一种性能良好的骨组织工程支架材料,具有制备简单、外形及内部结构符合组织工程支架要求、与成骨细胞的生物相容性好等优点.

简介：造血微环境（造血龛）主要由成骨龛和血管龛组成,而成骨细胞是成骨龛的主要组成成分,并对调节造血龛起到重要作用,成骨细胞与多种血液系统疾病密切相关.本文就成骨细胞在造血微环境中的作用以及成骨细胞与部分血液系统疾病关系的最新进展作一综述.