简介：目的：构建压电基因传感器阵列检测系统。方法：首先利用精细微加工法制作单个传感器，在此基础上先后构建了粘胶式以及夹具式2×5型传感器阵列。并自行开发研制自激式振荡电路、PESAV2.0版频率记录分析软件。将它们与计算机联用以构建传感器阵列检测系统。结果：成功地制造出了在气、液相中稳定振荡的单个传感器，构建的粘接式及夹具式传感器阵列各有其优缺点；自激式振荡电路有非常强的振荡能力，在液相中起振非常容易，其频率稳定度也可达实用要求。PESAV2.0版频率记录分析软件具有自行设置各初始参数，实时记录频率变化、自动绘制频率变化趋势图及分析结果等多项功能。结论：成功地构建了传感器阵列检测系统，搭建起一个基因检测的技术平台，为临床上病原性微生物的检测以及多种疾病的早期诊断提供一种新方法。

简介：人类基因组研究的快速进展，极大地推动了医学与医学遗传学的发展，为人类认识自身、防病治病提供了广泛的前景。面对21世纪这一高度信息化时代的来临，医学基础课程的教育不能落后于时代发展的步伐，因此，只有将有关基因的基础知识与基因研究最新成果融会贯通，才能真正体现教育面向现代化、面向世界、面向未来的现代教育观，培养高水平、高素质，有强烈进取心、责任心的实用人才。并通过让学生了解我国科学家对基因研究的艰苦历程以及参与研究的意义，激发他们爱祖国、爱人民的思想感情，从而，崇高的职业理想。

简介：基因工程学实验教学具有自身的特点。通过带教几届学生，笔者认为在教学活动中，理论知识要有一定的系统性，在操作过程中要狠抓实验技能训练，对时间安排上应具有合理性，培养学生创造性思维，并对学生进行实验的安全性教育，使学生具备扎实的实验基本技能，为将来进入科研领域和走向工作岗位奠定基础。

简介：

简介：目的：摸索及优化肽核酸（PNA）石英谐振式基因传感器（QOGS）阵列的检测条件。方法：设计针对HBV的bis-PNA探针，将其固定在QOGS阵列表面，具体摸索了bis-PNA探针与HBV基因组DNA杂交时的最佳pH值、最佳离子浓度、最佳探针固定量。结果：杂交缓冲液pH值为6.8、离子浓度为20mmol/L、探针浓度为1.5μmol/L时杂交条件最为适宜。结论：摸索出了PNA-QOGS阵列反应时的最佳条件，为成功地构建PNA-QOGS阵列检测系统奠定了坚实的基础。

简介：

简介：常规分离鉴定47株大肠埃希菌，以标准纸片扩散法(K—B法)对其进行常用氨基糖苷类药物敏感性测定，耐药株经PCR检测aac(3)～Ⅱ基因保守区，扩增产物进行DNA测序分析。初步探讨大肠埃希菌氨基糖苷类抗生素耐药株与aac(3)-Ⅱ基因保守区之间的关系，结果显示本地区大肠埃希菌氨基糖苷类抗生素耐药株的aac(3)-Ⅱ基因保守区具65位G、84位T和65位A、84位C两种基因型，且高度耐药菌株皆为65位G、84位T。

简介：

简介：目的建立石英谐振压电基因传感器检测系统液相稳定平台并应用该检测系统实时检测链置换扩增(SDA)反应。方法①观察以金属夹具式和粘胶式两种检测池连接方式构成的传感器在液相中的频率稳定性；②以巨细胞病毒(HCMV)为检测对象，建立链置换扩增(SDA)反应系统；③传感器检测系统对HCMVSDA反应进行实时检测。结果①新型金属夹具式可调节及可换式传感器检测池可实现传感器在液相中的频率稳定性；②链置换扩增(SDA)反应可引起压电基因传感器的频率持续下降；③在一定范围内核酸杂交所引起的频率下降幅度与加入的靶序列浓度呈正相关；结论成功构建压电基因传感器液相检测平台并实现对链置换扩增(SDA)反应的实时检测；该系统可直接检测基因组DNA并可广泛应用于病源微生物的临床检测。

简介：目的:建立α-干扰素(IFN-α)信号传导蛋白和基因检测的方法.方法:收集慢性乙型病毒性肝炎、自愈性乙型肝炎病毒感染者、健康对照者的外周静脉血并分离外周血单核细胞(PBMC),建立EB病毒(EBV)转化的B淋巴细胞系.体外分别用不同浓度的IFN-α(0、100、1000、10000IU/ml)刺激细胞,用凝胶电泳迁移率试验(EMSA)检测IFN活化的干扰素刺激基因因子3(ISGF-3)和γ-干扰素活化因子(GAF);设计特异的引物和探针,用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测IFN诱导抗病毒蛋白MxA、OAS1、PKR的相对表达.结果:成功建立了EBV转化的B淋巴细胞系.建立了EMSA检测ISGF-3和GAF转录蛋白的方法,用实时荧光定量PCR能够准确地检测样本中MxA、OAS1和PKR的表达.结论:建立了IFN信号传导蛋白和基因检测的方法,为进一步研究IFN治疗慢性乙型病毒性肝炎的疗效提供依据.

简介：目的：研究新型报道基因——绿色荧光蛋白（greenfluorescentprotein，GFP）和目的基因HSV-TK基因在哺乳动物细胞内的表达。方法：将同时表达GFP和HSV-TK的多右反子重组逆转录病毒GCGPTKSN，分别转染K562、NS-1、EL4、Sp2/0细胞株，并在体外应用荧光显微镜检测GFP的表达，同时GCV杀伤试验检测HSV-TK基因表达。结果：GFP在四种细胞系中高效表达。高浓度的GCV能有效抑制转染细胞的生长。结论：逆转录病毒载体能介导GFP和HSV-TK基因进入多种细胞系，并在那里共表达。GFP基因是一种很有前途的报道基因，这为基因转移的检测以及转基因细胞的筛选提供了一种新的方法。

简介：目的:研究非小细胞肺癌(NSCLC)多药耐药(MDR1)、谷胱甘肽转移酶(GST-π)、多药耐药相关蛋白(MRP)基因表达与肿瘤药敏试验之间的相关性及其临床指导意义.方法:56例NSCLC(已手术)进入研究,药敏方法采用磷脂结合蛋白V(annexinV)联合碘化丙啶(PI)双参数法,耐药基因MDR1、GST-π、MRP采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测.结果:各抗癌药物的平均抑瘤率分别为:紫杉醇(14.6±12.3)%,顺铂(21.7±12.2)%,去甲长春花碱(8.3±13.2)%,丝裂霉素(11.3±15.2)%,鬼臼乙叉甙(10.7±18.1)%,双氟胞苷(13.2±10.8)%,长春碱酰胺(6.6±11.3)%,长春新碱(7.4±7.7)%.耐药基因阳性率分别为MDR164.3%,MRP42.8%,GST-π46.4%.耐药基因MRP、GST-π阳性和阴性表达与病理类型和期别间未见明显相关;腺癌MDR1阳性表达组明显高于阴性表达组(P＜0.05).MDR1耐药基因阳性和阴性表达与肿瘤的药敏未见相关性.MRP阳性表达者对去甲长春花碱、长春碱酰胺、长春新碱和丝裂霉素的肿瘤抑制率显著低于阴性表达组(P＜0.05).耐药基因GST-π阳性表达者对顺铂、去甲长春花碱、丝裂霉素的抑瘤率显著低于阴性表达组(＜0.05).结论:肺癌耐药基因GST-π、MRP表达阳性与部分化疗药物的肿瘤药敏存在相关性,其对临床化疗药物的选择具有一定指导作用.

简介：目的:研究遗传性凝血因子Ⅶ(FⅦ)缺陷家系基因与表型的特点.方法:一个遗传性FⅦ缺乏家系19名成员的FⅦ及其他凝血因子促凝活性检测和用PCR及DNA序列检测FⅦ基因缺陷,初步探讨遗传性FⅦ缺乏的血液凝固变化.结果:在这一家系中,FⅦ缺乏伴FⅫ:C下降或FX:C增高的,在临床上无明显出血现象;FⅦ缺乏症与其基因10827核苷酸C→T突变有关.结论:遗传性FⅦ缺乏发生临床出血除与FⅦ:C水平有关外,还可能与FⅫ:C和FX:C变化引起的凝血和纤溶活性改变有关.

简介：目的:检测两个中国汉族人遗传性凝血因子Ⅻ缺陷症家系中的FⅫ基因突变.方法:检测先证者及家系成员血浆FⅫ:C.,并以其外周血单个核细胞中提取的基因组DNA为模板,PCR扩增FⅫ基因的所有外显子及其侧翼序列,用DNA测序仪检测FⅫ的基因突变.结果:在两个家系中共发现3种杂合型基因突变,即Gly526Asp、7142insertC和Glv542Ser.结论:上述3种FⅫ基因突变是导致中国人遗传性FⅫ缺陷的分子发病机制之一,且均为国际首次发现.

简介：目的用合成仪自动地合成60mer寡核苷酸SARS冠状病毒的探针来制作寡核苷酸基因芯片。方法根据寡核苷酸探针的制作要求，选取SARS冠状病毒的特异序列30条、长度为60mer的片段进行合成，并对合成后的纯化方法与条件进行探索。将经12％变性PAGE胶纯化后的探针直接点样制备成12×12阵列的寡核苷酸的基因芯片，初步与处理后的临床样品进行杂交。结果经PAGE纯化的寡核苷酸探针的纯度高，能满足寡核苷酸芯片制备的要求。临床SARS患者标本进行处理后与寡核苷酸芯片杂交、扫描检测，效果较好。结论本室合成的60mer的寡核苷酸SARS冠状病毒探针能用于基因芯片的制备与检测，这为该疾病的实验室诊断提供了一种快速、平行的检测方法。

简介：

简介：目的：检测革兰阴性菌中耐季铵盐消毒剂-磺胺复合物的qacE-sul1基因，为临床提供细菌对消毒剂的耐药信息。方法：使用稀释计数法测定60株革兰阴性杆菌对季胺盐复合物（QACs）的最低有效杀菌浓度．使用改良的表型筛选试验检测耐QACs的表型．使用聚合酶链反应（PCR）试验检测耐季铵盐消毒剂-磺胺复合物基因qacE--sul1。结果：部分革兰阴性杆菌临床分离株对QACs的最低有效杀菌浓度超过其推荐消毒浓度的8倍；60株革兰阴性杆菌中表型筛选试验14株阳性；11株qacE-sul1基因阳性．其中部分菌株进行全长基因测序并登陆美国核酸数据库（Genebank）．注册号：AY769739；结论：在临床常见革兰阴性杆菌中已出现由遗传物质介导的高耐QACs的细菌；衣研究所采用的改良表型筛选试验能有效地检测高耐QACs的细菌表型。

简介：目的克隆精子表面蛋白P34H基因的编码区，为进一步体外表达P34H蛋白做难备。方法提取人附睾体部总RNA，并以此为模板，进行反转录PCR获得编码P34H蛋白的基因片段。应用T／A克隆策略，将扩增的P34H基因编码区克隆入T载体，并通过双酶切和DNA测序进行鉴定。同时，以β-actin为内参，进行反转录PCR半定量分析，比较P34H在附睾头部、体部和尾部及睾丸组织中的表达量大小。结果成功地克隆了P34H基因。将P34H的cDNA序列登录GenBank，登录号为AF515625。反转录PCR半定量分析表明P34H主要在附睾体部表达。结论克隆的P34H基因可用于构建表达载体，为进一步表达P34H重组蛋白进行有关P34H的基础和应用研究打下了基础。