简介：目的：设计靶向乙型肝炎病毒（HBV）基因保守区的人工microRNA（amiRNA）,考察其对HBV基因表达的抑制作用。方法：比对HBV全基因组现有序列,选择保守区设计amiRNA,定向克隆到pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR载体,将amiRNA载体与HBV复制载体pHBV1.31共转染HepG2细胞,72h后收取细胞上清,ELISA检测HBV表面抗原（HBsAg）及e抗原（HBeAg）的含量,荧光定量PCR检测HBVDNA含量。结果：amiRNA可显著抑制细胞上清HBsAg、HBeAg和HBVDNA的水平。结论：amiRNA作为防治HBV感染的潜在有效手段之一值得进一步深入研究。

简介：预防与控制乙型肝炎发病的乙型肝炎病毒(HBV)疫苗，是有重大的社会和经济意义。HBV的持续感染可引起慢性肝脏疾患，并逐步发展为肝硬化和肝细胞癌(HCC)。目前的乙肝重组亚单位疫苗可以使90％的接种者产生保护性抗体；但是对慢性HBV携带者，由于其机体对HBsAg蛋白产生耐受，不能产生体液和细胞免疫，因此它只能作为一种预防性的疫苗。DNA疫苗(基因疫苗)是一种新的疫苗技术，通过向体内递送编码抗原的细菌质粒，刺激产生特异的体液和细胞免疫反应。在小鼠和其他的肝炎病毒感染动物模型中，HBVDNA疫苗可以特异性地引起体液和细胞免疫，清除HBV转基因动物血循环中的HBsAg颗粒和HBVDNA。如果加入各种免疫调节细胞因子的基因，可以进一步提高HBVDNA疫苗的免疫效果，因此它不仅可作为预防性疫苗，也可作为治疗型疫苗。

简介：目的检测精制甲型肝炎(甲肝)灭活疫苗的保护效果.方法甲型肝炎病毒(YN5株)经Vero细胞培养制成精制甲肝灭活疫苗,采用普通狨猴进行疫苗的免疫原性和保护性研究.结果7只狨猴均有特异性抗体产生,无血清酶活性升高和肝组织学病理改变,接种疫苗的狨猴能抵抗甲肝病毒强毒(Han-ZD)株的攻击.但是,对照组狨猴均出现血清酶异常升高和肝组织学病理改变.结论甲肝灭活疫苗(YN5株)具有良好的免疫原性和保护效果.

简介：丙型肝炎病毒（HCV）是造成慢性肝炎，肝硬化及肝癌的重要原因之一，目前全球约有1.7亿人感染HCV。然而缺乏有效的HCV感染模型，严重阻碍了对HCV致病机制的认识。最近几年以JFH1株和Huh-7细胞系为基础，通过对不同病毒株基因组的重组和细胞系的优化，进一步提高其感染能力，在HCV感染系统的建立上取得了突破性进展。我们简要综述近几年在HCV感染细胞模型方面取得的进展。

简介：乙型肝炎病毒（HBV）感染严重影响人类的健康，感染HBV的慢性患者可引起肝硬化、肝细胞癌及肝功丧失等病症。开发有效的抗HBV药物，对于其感染的治疗非常关键。HBV具有非常窄的宿主范围，因此选择合适的药物评价用动物模型至关重要，常用的模型动物有鸭、土拔鼠、黑猩猩及近年研究的转基因小鼠等。

简介：目的：探讨丙基硫氧嘧啶（PTU）影响妊娠合并甲状腺功能亢进（甲亢）孕妇甲状腺功能及妊娠结局的影响。方法：选择我院妇产科2010年3月至2013年1月收治的110例妊娠合并甲亢的患者作为观察对象,随机分为观察组58例,对照组52例。观察组予PTU每天300mg口服,对照组确诊后未能定期检测甲状腺功能而自行停药,或拒绝PTU药物治疗。结果：观察组TT3、TT4、FT3、FT4、TSH水平均显著低于对照组,差异均具有统计学意义（均P〈0.05）；观察组早产或流产、剖宫产、妊娠高血压、心力衰竭、重度子痫明显低于对照组,而足月产明显高于对照组,差异均具有统计学意义（均P〈0.05）；观察组的围生儿发生胎儿窘迫、低体重儿、新生儿甲亢、转入NICU发生率均显著低于对照组,两组比较差异均具有统计学意义（均P〈0.05）。结论：规范的PTU治疗能很好地改善妊娠合并甲亢患者的孕期甲状腺功能,减低甲亢对孕妇及新生儿的危害,改善妊娠结局,且对新生儿畸形率无显著的影响,是一种相对安全和有效的治疗方法。

简介：细胞信号转导异常往往与人类疾病的发生、发展密切相关。一些病毒致病和感染机制即为病毒抗原蛋白作用宿主细胞信号转导途径,导致宿主细胞内信号转导发生紊乱。丙型肝炎病毒（HCV）是引发慢性丙型肝炎,导致肝硬化和肝细胞癌发生的主要病原体,但目前HCV的致病机制与宿主内持续感染机制尚不清楚。HCV致病机制可能与HCV表达的蛋白质干扰宿主细胞信号转导途径而导致异常的细胞信号转导有关。研究HCV蛋白对宿主细胞信号转导途径的影响不仅有助于阐明其致病机制,还能为新药设计和寻找新的治疗方法提供新思路和新靶点。本文主要综述了近年来国内外有关HCV蛋白作用细胞信号转导途径的研究进展。

简介：利用DNA重组和细胞体内同源重组技术,分别获得了P7.5启动子和P11启动子单独带动的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)基因的重组痘苗病毒和同一个重组痘苗病毒中含有P7.5和P11启动子分别带动一个HBsAg基因(正反两个插入方向)的四种重组痘苗病毒,比较了它们对HBsAg表达的影响。含P7.5启动子的比含P11启动子的重组痘苗病毒表达的HBsAg水平更高些;在同一个重组痘苗病毒中P7.5和P11两个启动子分别带动HBsAg基因时,两个启动子同向转录表达的HBsAg水平较低,而两个启动子又向转录时表达的HBsAg水平较高,但均没有单一P7.5启动子带动的HBsAg基因的表达水平高。

简介：利用PCR技术扩增HCVns3基因,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后与原核表达质粒pProEX-HTb连接,转化感受态细胞E.coliDH5α,酶切鉴定得阳性重组质粒pProEX-HTb-ns3并测序;pProEX-HTb-ns3转化宿主细胞获得工程菌,用IPTG诱导,获得NS3蛋白的高效表达,薄层扫描显示其占菌体总蛋白的35%;目的蛋白在变性条件下经Ni2+-NTA凝胶亲和层析纯化,透析并浓缩后用丙型肝炎患者阳性血清做为一抗行Western-Blot证实特异性和抗原性.结果成功表明,诱导表达产物主要以包涵体形式存在;6His-NTA纯化后获得目的蛋白,Western-blot结果显示纯化蛋白具有良好的抗原性.HCVNS3蛋白的高效表达及纯化,为利用NS3蛋白作为诊断抗原及制备单克隆抗体奠定了基础.

简介：目的：探讨未足月胎膜早破（PPROM）合并绒毛膜羊膜炎（HCA）孕妇血清中中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）、氧化型α1-抗胰蛋白酶（Ox-AT）及白细胞介素-8（IL-8）水平变化及对妊娠结局的影响。方法：选择2015年3月至2016年2月我院收治的PPROM孕妇86例,根据患者是否合并HCA分为HCA组（n=46）和非HCA组（n=40）,HCA组包括轻度（n=16）、中度（n=15）和重度（n=15）,同期选择来我院进行产检的正常孕妇45例作为对照组。应用酶联免疫吸附测定法测定孕妇产前血清NE、Ox-AT及IL-8水平,对比其在不同组孕妇间的差异,分析HCA与PPROM孕妇的妊娠结局的关系。结果：HCA组及非HCA组孕妇血清NE、Ox-AT及IL-8水平均显著高于对照组,且HCA组均显著高于非HCA组,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。随着HCA的程度加重,孕妇血清中NE、Ox-AT及IL-8水平明显升高,分别与HCA严重程度呈正相关（r=0.732、0.694、0.787;均P〈0.05）。HCA组中孕妇产后出血率、剖宫产率及早产儿肺炎率明显高于非HCA组,而Apgar评分显著低于非HCA组,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论：血清NE、Ox-AT及IL-8与PPROM合并HCA孕妇的发生、发展有关,及时检查上述指标有助于改善此类孕妇的妊娠结局。