简介：microRNA（miRNA）对调控基因表达有着重要作用,病毒与宿主在miRNA水平存在着复杂的＂对话＂。研究显示,人类免疫缺陷病毒（HIV）可能编码病毒miRNA（vmiRNA）,通过维持病毒潜伏、保护感染细胞免于凋亡或外力刺激下的细胞死亡等方式,在HIV病理过程中发挥重要作用。宿主miRNA则参与到了抗HIV的防御性机制中,但也面临HIV调控相应宿主miRNA、编码RNA沉默抑制物等多种阻力。深入研究HIV与宿主间miRNA水平上的动态相互作用,有助于进一步了解HIV的致病机理,开发新的治疗策略

简介：目的：构建能介导结缔组织生长因子（CTGF）基因RNA干扰的复制缺陷型腺病毒表达载体。方法：以大鼠CTGF基因为靶序列，设计并合成含编码短发夹RNA序列的寡核苷酸，构建腺病毒穿梭质粒P-shuttle-CTGF，酶切及测序分析正确后，与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转染AD-293细胞，进行病毒包装，得到腺病毒载体Ad．H1-CTGF，用该载体感染HSC-T6细胞，观察其对CTGF基因表达抑制的效果。结果：构建的腺病毒穿梭质粒p-shuttle-CTGF经酶切、测序分析证实正确；包装的病毒载体滴度为4×1010PFU／mL，感染HSC-T6细胞后，Western印迹证实CTGF表达显著减少。结论：构建的腺病毒载体Ad．H1-CTGF可有效抑制HSC-T6中CTGF的表达，为抗纤维化研究提供了有力的工具。

简介：在大肠杆菌中,利用新构建的含T7g-10LRBS以及λ-PR启动子的新型原核表达载体,通过表达gag-pol基因片段,获得了具有天然序列的人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)核心蛋白p24的高效表达。克隆的gag-pol基因片段在其阅读框架移位区域插入了4bp碱基,其表达的病毒蛋白酶在阅读框架上与gag一致,从而实现了对gag-pol融合蛋白的有效加工,产生成熟的核心蛋白p24及其它产物。重组p24以可溶形式存在,可以被抗p24的单克隆抗体特异识别。测定的N端8个氨基酸序列与从病毒纯化的p24完全一致。在使用硫酸铵沉淀后,采用两步离子柱层析,可将重组蛋白纯化到95％以上的纯度。结果表明,纯化的p24可以作为特异性很强的试剂而用于HIV感染的诊断及病情的预后,并可用于p24的生化及结构分析。

简介：随着我国畜牧业的不断发展,畜牧业为我国经济带来了巨大的影响,也做出了很多贡献。改革开放至今,畜牧业一直在走向成熟和进步,也一直受到了国家的大力扶持,使得我国的畜牧业能够快速的成长,尤其在最近几年,由于畜牧业的生产和生活越来越受到了社会的关注和国家的重视,畜牧业已经成为了我国可持续发展中重要的组成部分。牛是一种家畜型哺乳动物,具有较强的生命力,牛为人们的生产和生活提供了较大的帮助。因此,牛疾病的问题也成了现在最重要的工作,也是很多人一直关注的问题,笔者在本文分析了牛常见的疾病,并针对一些牛的疾病提出了相应的防治方法,具有一定的现实意义。

简介：目的：建立检测猪常见致病菌的反向斑点杂交方法。方法：将23SrRNA基因芯片用的针对12种细菌的25～30mer探针加长到30～38mer,2对通用引物序列不变。用地高辛标记下游引物,以尼龙膜为载体制备膜芯片,检验探针/膜杂交的特异性和敏感性;另外设计1条大肠杆菌K88基因探针、一段带K88探针的报告基因和1对报告基因的反向PCR引物,在PCR体系中增加封口的K88报告基因和反向引物对,被检样品扩增后进行膜杂交。结果：修改的13条探针与参考目标菌株在膜上成特异性杂交,对52个参考菌株和野外分离株的检测准确率为92%;膜杂交的敏感性与玻片芯片接近,最小检出量为100fgDNA;在尼龙膜上增加K88探针,与3重PCR产物杂交,可以检测到大肠杆菌K88毒力基因。结论：建立的反向斑点杂交方法简便快速,检测成本低,可用于仪器设备不足的实验室,同时可以加入检测如大肠杆菌K88等致病基因,提高基于保守基因的芯片的诊断能力。

简介：海洋站获取观测的数据文件作为水文气象情报资料的原始档案,为海洋预报和调查科研提供最基础的数据保障.对海洋站数据报表的预审对保证水文气象观测资料及其重要.本文以国家海洋局舟山海洋环境监测站为例,通过对原始资料的审查和报表校对复算进行分析总结,探讨了海洋站软件及报表预审工作中常见的问题和注意事项,提出相应的应对措施,有利于全面了解海洋站观测工作,减少不稳定因素,进一步提高海洋站观测预审工作的质量.

简介：在高职英语写作中,应用文写作至关重要。本文针对高职英语应用文写作中存在的问题及几点解决方法进行了探讨。

简介：目的：利用基因芯片技术，以细菌16SrDNA和23SrDNA为靶序列筛选引物和探针，建立快速、准确的检测水产食品中肠道致病菌的方法。方法：将致病菌的16SrDNA和23SrDNA全序列进行软件比对，在可变区和恒定区分别设计特异性寡核苷酸探针和通用性引物，点样于玻片制成基因芯片。致病菌DNA经过通用引物扩增后与芯片上的探针杂交，然后通过扫描图像对结果进行判断。对基因芯片检测的灵敏度进行了评价，并对模拟污染样本进行了实际检测，以验证所建立的方法。结果：设计的4对通用引物在同一条件下能够扩增7种常见肠道致病菌。在均一的杂交条件下能够同时检测单核细胞增生利斯特菌、副溶血性弧菌、霍乱弧菌、金黄色葡萄球菌、弗氏志贺氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和肠出血性大肠杆菌O157∶H7；以鼠伤寒沙门氏菌为对象，本方法的检测灵敏度可达到10^-3cfu/mL，实际检测模拟污染的样本的正确率达到100%。结论：建立的基因芯片系统可以准确而稳定地实现对7种水产食品中常见致病菌的通用检测，为食源性感染的诊治与预防提供了有效的技术手段和方法依据。