简介:目的观察瞬时受体电位M8(transientreceptorpotentialmelastatintype8,TRPM8)在舌癌组织及舌癌细胞系Tca8113中的表达,探讨其在肿瘤生成与发展中的意义。方法应用免疫组织/细胞化学方法检测TRPM8在舌癌组织、Tca8113细胞株、舌乳头状瘤组织和正常舌体组织中的表达;应用Westernblot检测TRPM8在舌癌组织、、Tca8113细胞及正常舌体组织中的表达。结果免疫组织化学显示:TRPM8在舌癌组织中100%(22/22)呈强阳性表达;而在舌乳头状瘤组织中18%(2/11)呈强阳性表达,45%(5/11)呈弱阳性表达,余为阴性表达;正常舌体组织中10%(1/10)呈弱阳性表达,余为阴性表达。TRPM8在舌癌、舌乳头状瘤及正常舌体组织中的表达有统计学差异(P〈0.05)。免疫细胞化学显示:TRPM8在舌癌细胞Tca8113中呈阳性表达。Westernblot结果显示舌癌细胞及组织中TRPM8表达水平明显高于正常舌体组织。结论TRPM8在舌癌中的高表达提示肿瘤的发生发展可能受到离子通道蛋白的调节。
简介:摘要目的检测M型瞬时受体电位通道8(melastatin-related transient receptor potential 8,TRPM8)在慢性鼻窦炎、鼻息肉和对照组中鼻甲黏膜组织中表达及表达差异,探讨在慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)中TRPM8表达的意义。方法前瞻性纳入2019年2月至2020年1月在武汉大学人民医院耳鼻咽喉头颈外科行鼻内镜手术患者51例,分为慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)组17例、慢性鼻窦炎不伴鼻息肉(CRSsNP)组17例和对照组(单纯解剖上存在鼻中隔偏曲或鼻骨骨折的患者)17例。其中男性33例,女性18例,年龄为14~65(34.55±1.689)岁。利用免疫组织化学技术检测3组患者组织(CRSwNP组取息肉组织、CRSsNP组取钩突组织和对照组取中鼻甲组织)中TRPM8的表达及分布。根据免疫组织化学结果分析TRPM8表达与CRSwNP患者术前CT Lund-Mackay评分、鼻部症状视觉模拟量表(VAS)评分和鼻腔鼻窦结局测试20(SNOT-20)量表评分的相关性;利用原代细胞培养及实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫蛋白印迹法检测鼻息肉上皮细胞及中鼻道上皮细胞中TRPM8的mRNA及蛋白表达水平;收取3组临床标本制备成组织匀浆后加入人鼻腔上皮细胞系和原代正常鼻黏膜上皮细胞中刺激24 h,随后利用蛋白免疫印迹技术检测TRPM8蛋白表达。采用SPSS 23.0及GraphPad Prism软件进行统计学分析,两组间采用独立样本t检验,相关性分析采用Spearman检验。结果与对照组相比,CRSwNP组中TRPM8表达明显上调(t=6.852,P<0.05),同时蛋白主要表达在鼻黏膜上皮细胞中;CRSsNP组中TRPM8表达差异无统计学意义(t=1.980,P>0.05)。TRPM8表达与术前CT Lund-Mackay评分、VAS评分和SNOT-20均呈正相关(r=0.512,P<0.05;r=0.853,P<0.01;r=0.814,P<0.01);体外培养对照组中鼻道上皮细胞以及息肉上皮细胞后,检测发现息肉上皮细胞中TRPM8的mRNA及蛋白表达水平明显高于对照组上皮细胞,差异有统计学意义(t=8.845,P<0.05);相较于加入正常对照和慢性鼻窦炎组织匀浆而言,加入鼻息肉组织匀浆的人鼻腔上皮细胞系(RPMI 2650)细胞中TRPM8表达增高。结论TRPM8在鼻息肉上皮细胞中呈高表达且其表达量与患者VAS评分呈正相关,提示TRPM8可能参与鼻息肉发病过程中鼻黏膜上皮细胞调控的发病机制。
简介:摘要目的评价miR-21在脓毒症大鼠肺损伤中的作用及其与瞬时受体电位M2(TRPM2)表达的关系。方法清洁级健康Wistar大鼠48只,雌雄各半,体重250~300 g,采用随机数字表法分为4组(n=12):假手术组(SH组)、脓毒症组(S组)、miR-21抑制剂组(MI组)和miR-21抑制剂+TRPM2阻断剂Gd3+组(MIG组)。采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备大鼠脓毒症模型。于CLP前12 h,MI组和MIG组分别尾静脉注射miR-21抑制剂和miR-21抑制剂+TRPM2阻断剂组Gd3+。于CLP后24 h时取颈动脉血样,行血气分析,记录PaO2,计算氧合指数;随后处死大鼠取肺组织,光镜下行肺损伤评分,确定湿重/干重(W/D)比值,采用qRT-PCR法检测miR-21和TRPM2的mRNA表达,分光光度计比色法检测MDA和SOD水平,ELISA法检测血清IL-6、IL-8和TNF-α的浓度。结果与SH组比较,其余3组氧合指数和肺组织SOD活性降低,肺组织W/D比值、肺损伤评分、MDA含量、血清IL-6、IL-8和TNF-α浓度升高,S组肺组织miR-21 mRNA表达上调,TRPM2 mRNA表达下调(P<0.05);与S组比较,MI组氧合指数、肺组织SOD活性和血清IL-6、IL-8和TNF-α浓度升高,肺组织W/D比值、肺损伤评分、MDA含量降低,MI组和MIG组肺组织miR-21 mRNA表达下调,TRPM2 mRNA表达上调(P<0.05);与MI组比较,MIG组氧合指数和肺组织SOD活性降低,肺组织W/D比值、肺损伤评分、MDA含量和血清IL-6、IL-8和TNF-α浓度升高,肺组织TRPM2 mRNA表达下调(P<0.05)。结论miR-21表达上调,TRPM2表达下调参与了脓毒症大鼠肺损伤的过程。