简介：摘要目的登革病毒（dengue virus，DENV）的NS5蛋白主要起RNA依赖的RNA聚合酶（RdRp）作用，本研究旨在通过构象型噬菌体展示肽库筛选潜在的抗病毒前体药物。方法以可溶性重组DENV-2 NS5蛋白为靶点，从构象型噬菌体展示肽库中筛选高特异性寡肽（oligopeptide，OP），并通过分子对接技术验证OP与RdRp之间的相互作用。将感染DENV-2的C6/36细胞暴露于不同浓度的OP中，并通过RT-qPCR检测病毒滴度，以此来评估OP的抗DENV-2作用。同时，将C6/36细胞暴露在较高浓度的OP中进行培养，并通过CCK-8法测定细胞活性以评估OP的细胞毒性。结果通过分子对接发现，OP可特异性结合于DENV NS5蛋白的RdRp结构域。在体外实验中发现，OP可以抑制DENV复制，且在细胞实验中未表现出细胞毒性。此外，基于RdRp结构域在单股正义链RNA（+ssRNA）病毒中的高度保守性，并利用分子对接技术初步发现，OP可能同样结合于多种+ssRNA病毒的RdRp活性空腔。结论OP可能具有广谱的+ssRNA病毒RdRp抑制能力，是一个潜在的广谱抗病毒前体药物。

简介：摘要目的在1例具有广谱中和活性的慢性HIV-1感染者(DRVI01)血浆样本中，分析潜在的中和抗体特异性。方法查找已知的HIV-1广谱中和抗体(bNAbs)的关键氨基酸位点，分析DRVI01来源不同时间点的膜蛋白序列。对存在频繁变异的关键氨基酸位点进行回复突变，比较突变前后的假病毒与自体血浆中和敏感性的差异，推测可能存在的bNAbs。结果在DRVI01来源的6个时间点155条膜蛋白序列中，查找存在频繁突变的10类bNAbs的关键氨基酸位点，其中gp41融合肽、gp120/gp41交界面两类bNAbs的关键氨基酸位点存在较多的变异。对这些位点回复突变后，后一个时间点及同一时间点的自体血浆，对大部分突变株病毒的中和能力明显增强。结论具有广谱中和活性的HIV-1感染者(DRVI01)体内，可能存在与gp41融合肽类及gp120/gp41交界面类bNAbs的中和特异性。

简介：摘要成功建立体液免疫记忆反应至少取决于两层防御机制：抵抗再感染病原体的第一道防线为既有体液免疫记忆，其依赖于长寿浆细胞(plasma cells，PCs)分泌的预存的保护性抗体；第二道防线为反应性体液免疫记忆，即病原体经历的记忆B细胞迅速重新激活以产生抗体。其中后者在防御同源病毒的再次感染时起到至关重要的作用。由于人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)破坏免疫系统及病毒高变异特性对预防性疫苗的研发提出了挑战。因此，了解HIV诱导产生广谱中和抗体的记忆B细胞受体(B cell receptors，BCR)的特点为HIV-1预防性疫苗的设计提供新的思路和方向。

简介：无

简介：摘要目的探讨产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌感染临床分布及耐药情况。方法抽取2016年1月至2017年12月开封市中心医院检出的506株大肠埃希菌，菌株均分离自非消化道感染506例住院患者的送检标本，采用K-B纸片扩散法检测菌株耐药性、表型确证试验检测产ESBLs菌株。记录菌株分布并分析其耐药性。结果506株大肠埃希菌感染部位以呼吸道较常见(40.32%，204/506)，其次为泌尿道(21.74%，110/506)，其中产ESBLs菌株116株(22.92%，116/506)。产ESBLs菌株与非ESBLs菌株对亚胺培南、厄他培南、美罗培南、替加环素均未见明显耐药性，产ESBLs菌株对其他常用抗菌药物耐药率高于非ESBLs菌株(P<0.05)。结论大肠埃希菌主要与下呼吸道及泌尿系统感染有关，产ESBLs菌株较非ESBLs菌株耐药性更强。

简介：摘要目的制备靶向甲型流感病毒血凝素(hemagglutinin，HA)蛋白的广谱抗体FHA3，并对其进行鉴定。方法依据单链抗体(single-chain antibody fragment，scFv)序列信息，PCR扩增FHA3重链和轻链可变区序列，连入抗体哺乳细胞表达载体pFRT-IgG1κ，构建重组表达质粒pFRT-IgG1κ-FHA3。利用瞬时高效表达系统ExpiCHO以及亲和纯化技术获取抗体蛋白FHA3。ELISA检测FHA3与甲型流感病毒HA的结合。假病毒感染宿主细胞试验检测抗体FHA3的体外中和活性。结果蛋白质电泳结果显示制备获取了高纯度FHA3。FHA3与甲型流感病毒H1N1 HA、H2N2 HA、H3N2 HA、H5N1 HA、H7N9 HA以及H9N2 HA均识别结合，且呈浓度依赖效应。FHA3具有较好的体外中和活性，在低浓度下(5 μg/ml)能有效阻断H5N1以及H7N9假病毒入侵靶细胞，在0.012 5 μg/ml浓度下能有效阻断H1N1假病毒入侵靶细胞。结论获得1株具有体外中和活性的靶向甲型流感病毒HA蛋白的广谱抗体。

简介：摘要流感是由流感病毒引起的呼吸系统疾病，接种流感疫苗是预防流感的重要手段。疫苗的主要抗原是流感病毒表面蛋白血凝素和神经氨酸酶，但这两者都存在抗原漂移的现象，给疫苗设计带来巨大困难。广谱流感疫苗的候选抗原之一是高度保守的流感病毒基质蛋白2胞外域(matrix protein 2 ectodomain，M2e)。M2e在天然感染的情况下免疫原性较弱，但是可通过相关的佐剂、包裹材料和蛋白疫苗提高免疫原性。此文介绍了加强M2e免疫效果方式的研究以及M2e疫苗的临床研究进展。

简介：摘要目的探究神经外科术后产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌感染的风险因素。方法收集2012年1月至2019年5月在某医院接受神经外科手术后感染肺炎克雷伯菌的患者病历资料。选取15个临床变量，通过多因素Logistic分析患者术后感染的风险因素。结果72例术后感染患者中，共分离出肺炎克雷伯菌菌株91株，其中产ESBLs肺炎克雷伯菌42株。多因素Logistic分析显示，呼吸机的使用[（OR（95%CI）=20.627（2.795~152.233）]和开颅手术[OR（95%CI）=13.658（1.618~115.298）]是神经外科术后产ESBLs肺炎克雷伯菌感染的独立风险因素。结论神经外科术后产ESBLs肺炎克雷伯菌感染可导致严重后果，呼吸机的使用和开颅手术作为其独立风险因素，应予重视。

简介：摘要人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）感染的长期不进展者（LTNP）体内分离到的广谱中和抗体（bNAbs），已被证明可以预防HIV-1感染并降低感染者体内的病毒载量，成为了指导HIV-1疫苗设计和被动免疫治疗的突破口。中和抗体的功能除了与靶向表位有关，其亲和力也极大的影响了抗体的活性。HIV-1 bNAbs通过体内的多轮亲和力成熟获得了较高亲和力，从而实现了广谱度和中和活性的增加。高亲和力HIV-1 bNAbs在治疗过程中能更好的协助机体免疫系统清除病原体，并且使用剂量更少，毒副作用也相对较低。在亲和力成熟的同时，HIV-1 bNAbs表现出了高水平的体细胞超突变（SHM）、插入缺失、较长的重链第三互补决定区等不寻常的特征。这些特征阻碍了通过有效疫苗诱导HIV-1 bNAbs在体内产生并发育成熟，因此了解抗体亲和力成熟过程中发生的突变及其要点，有助于理解中和抗体的活性与特征的关系，并为设计有效的HIV-1潜在免疫原提供参考。

简介：摘要HIV/AIDS在世界上广泛流行，抗逆转录病毒药物尚无法彻底根除HIV感染，开发新的治疗和预防方法仍然至关重要。不断分离到的广谱中和抗体(bnAb)，在抗HIV-1感染和治疗方面的应用日益突出，也为新疫苗的设计带来曙光。本文对近年来bnAb的分离鉴定的技术及中和表位特征研究进展进行简要综述。

简介：摘要目的分析具有高广谱中和活性的HIV-1感染者包膜蛋白(Env)基因的氨基酸及密码子使用特点。方法根据中和宽度是否高于90%将样本分为高广谱中和活性组(hBCN+组)和非高广谱中和活性组(hBCN-组)，采用单拷贝基因组扩增法(SGA)分离全长Env基因，通过两组样本Env基因的相对氨基酸使用度(RAAU)的对应性分析(COA)，并基于相似性指数D(A，B)计算及与宿主相对密码子使用度(RSCU)的比对探讨两组毒株的氨基酸及密码子使用特点。结果对应性分析结果显示hBCN+组和hBCN-组毒株RAAU数据沿两个主轴分布形成两个相对独立的簇，表明两组毒株Env基因具有相对独特的氨基酸使用模式；相似性指数分析结果显示hBCN+组(0.097)低于hBCN-组(0.102)，且两组毒株相比较，hBCN+组Env基因与人具有相似使用模式的密码子少于hBCN-组，提示hBCN+组毒株在感染者体内的适应性较hBCN-组毒株低。结论hBCN+和hBCN-两组毒株的Env基因具有相对独特的氨基酸使用模式，hBCN+组毒株对宿主的适应性较hBCN-组毒株低。

简介：摘要目的了解某三甲医院产超广谱β-内酰胺酶（extended-spectrum beta-lactamase，ESBLs）肺炎克雷伯菌的临床分布、标本来源及耐药情况，为临床诊治提供依据。方法收集2016年1月至2018年12月某院门诊和住院患者分离的菌株，使用VITEK-Compact 2全自动微生物鉴定系统进行鉴定和药敏实验。采用K-B法进行ESBLs确证试验。应用Whonet 5.6软件进行统计分析。结果共分离出1 716株肺炎克雷伯菌，检出产ESBLs 800株，总检出率为46.62%。菌株主要来源于痰液、气管内导管、血液等，科室分布居前3位的是新生儿科、儿科、小儿外科。产ESBLs肺炎克雷伯菌对青霉素类氨苄西林完全耐药；对3代头孢菌素头孢曲松、头孢他啶耐药率分别为97.00%、57.62%；对碳青霉烯类药物、阿米卡星的耐药率较低，低于2.98%。结论肺炎克雷伯菌产ESBLs检出率较高且2016-2018年的耐药率呈明显上升趋势，临床应合理有效地选用抗菌药物，避免产ESBLs菌的院内流行。

简介：摘要目的基于药代动力学/药效学理论，利用蒙特卡洛模拟研究评价和优化碳青霉烯类药物治疗产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌血流感染的给药方案。方法收集全国血流感染细菌耐药监测联盟2018至2019年分离自患者血液的产ESBLs肠杆菌科细菌3 225株，其中大肠埃希菌2 731株，肺炎克雷伯菌494株。采用蒙特卡洛模拟计算并比较亚胺培南、美罗培南、厄他培南3种药物不同给药方案对肠杆菌科细菌感染的达标概率(PTA)和累积反应分数(CFR)。结果对于亚胺培南，当肠杆菌科细菌最低抑菌浓度(MIC)≤0.25 μg/mL时，所有给药方案的PTA值均>93.00%；当MIC＝0.5或1 μg/mL时，除500 mg次/12 h所得PTA不达标外，其余给药方案PTA值均>97.00%；当MIC＝2 μg/mL时，仅500 mg次/6 h，750 mg次/8 h，750 mg次/6 h和1 g次/6 h四种方案的PTA值>90.00%。对于美罗培南，当肠杆菌科细菌MIC＝0.007 μg/mL时，8种给药方案所得PTA值均>90.00%；当MIC≤0.125 μg/mL时，除500 mg次/12 h和1 g次/12 h两种方案外，其余PTA值均>92.00%；当MIC＝0.25 μg/mL时，仅500 mg次/6 h，750 mg次/6 h，1 g次/8 h和2 g次/8 h四种方案的PTA值>90.00%；当MIC＝0.5 μg/mL时，仅500 mg次/6 h，750 mg次/6 h和2 g次/8 h三种方案PTA值>90.00%；当MIC＝1 μg/mL时，8种给药方案PTA值均不达标。对于厄他培南，当肠杆菌科细菌MIC≤0.125 μg/mL时，3种方案PTA值均>92.00%；当MIC＝0.25 μg/mL时，500 mg次/24 h和750 mg次/24 h两种方案的PTA值分别为57.22%和82.75%，1 g次/24 h方案PTA值为92.87%；当MIC≥0.5 μg/mL时，3种给药方案PTA值均<60.00%。亚胺培南7种给药方案CFR值均>92.00%。美罗培南除500 mg次/12 h和1 g次/12 h两种方案的CFR值分别为69.92%和82.33%外，其余6种给药方案CFR值均>98.00%。厄他培南3种给药方案CFR值均>92.00%。结论通过蒙特卡洛模拟分析，亚胺培南、美罗培南、厄他培南的推荐经验给药方案分别为500 mg次/8 h、500 mg次/8 h或500 mg次/6 h、1 g次/24 h。目的给药需根据肠杆菌科细菌实际MIC值适当调整方案。

简介：摘要目的基于药代动力学/药效学理论，利用蒙特卡洛模拟研究评价和优化碳青霉烯类药物治疗产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌血流感染的给药方案。方法收集全国血流感染细菌耐药监测联盟2018至2019年分离自患者血液的产ESBLs肠杆菌科细菌3 225株，其中大肠埃希菌2 731株，肺炎克雷伯菌494株。采用蒙特卡洛模拟计算并比较亚胺培南、美罗培南、厄他培南3种药物不同给药方案对肠杆菌科细菌感染的达标概率(PTA)和累积反应分数(CFR)。结果对于亚胺培南，当肠杆菌科细菌最低抑菌浓度(MIC)≤0.25 μg/mL时，所有给药方案的PTA值均>93.00%；当MIC＝0.5或1 μg/mL时，除500 mg次/12 h所得PTA不达标外，其余给药方案PTA值均>97.00%；当MIC＝2 μg/mL时，仅500 mg次/6 h，750 mg次/8 h，750 mg次/6 h和1 g次/6 h四种方案的PTA值>90.00%。对于美罗培南，当肠杆菌科细菌MIC＝0.007 μg/mL时，8种给药方案所得PTA值均>90.00%；当MIC≤0.125 μg/mL时，除500 mg次/12 h和1 g次/12 h两种方案外，其余PTA值均>92.00%；当MIC＝0.25 μg/mL时，仅500 mg次/6 h，750 mg次/6 h，1 g次/8 h和2 g次/8 h四种方案的PTA值>90.00%；当MIC＝0.5 μg/mL时，仅500 mg次/6 h，750 mg次/6 h和2 g次/8 h三种方案PTA值>90.00%；当MIC＝1 μg/mL时，8种给药方案PTA值均不达标。对于厄他培南，当肠杆菌科细菌MIC≤0.125 μg/mL时，3种方案PTA值均>92.00%；当MIC＝0.25 μg/mL时，500 mg次/24 h和750 mg次/24 h两种方案的PTA值分别为57.22%和82.75%，1 g次/24 h方案PTA值为92.87%；当MIC≥0.5 μg/mL时，3种给药方案PTA值均<60.00%。亚胺培南7种给药方案CFR值均>92.00%。美罗培南除500 mg次/12 h和1 g次/12 h两种方案的CFR值分别为69.92%和82.33%外，其余6种给药方案CFR值均>98.00%。厄他培南3种给药方案CFR值均>92.00%。结论通过蒙特卡洛模拟分析，亚胺培南、美罗培南、厄他培南的推荐经验给药方案分别为500 mg次/8 h、500 mg次/8 h或500 mg次/6 h、1 g次/24 h。目的给药需根据肠杆菌科细菌实际MIC值适当调整方案。

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简介：摘要质谱流式技术是近来年发明的一门新兴技术，它利用金属同位素标签替代荧光标签，并利用质谱对标签进行定量，通过结合质谱和流式细胞技术，可以同时对单细胞进行超多参数、无需补偿的测量，大大增强了评估复杂细胞系统和过程的能力，弥补了荧光流式的不足。其高通量、高灵敏度和高稳定性的特点尤其适合于免疫、肿瘤、血液、药物和遗传学等学科的研究中。

简介：摘要降水数据是研究气候变迁、天气动力、数值天气预报模式、水分平衡计算、水文模型等的重要参数，是雷达与卫星定标、水库管理、工程设计等的重要依据。基于此，本文重点分析激光雨滴谱仪的降雨特征，以发挥出其在区域性降雨监测中的作用。