简介:基金项目国家自然科学青年基金(项目编号81102482)摘要目的构建人钙联蛋白S100A8的原核表达载体并进行蛋白表达及纯化,以便进一步研究。方法从人单核巨噬细胞THP-1中提取总RNA,逆转录后进行PCR,得到目的基因,与TA克隆载体pMD-T进行连接,得到pMD-S100A8质粒,经BamHⅠ和XhoI双酶切产物或者PCR产物双酶切后,与大肠杆菌pGEX-6P-1表达载体进行连接,得到pGEX-S100A8重组质粒。重组质粒转入E.coliBL21(DE3)表达菌进行蛋白表达。融合GST蛋白用GST柱纯化,冷冻干燥,进行下一步研究。结果成功构建了TA克隆质粒pMD-S100A8及阳性pGEX-S100A8重组质粒,成功诱导蛋白的原核表达。结论纯化得到的蛋白为进一步研究S100A8钙联蛋白的结构和功能提供了参考。
简介:摘要目的探讨血清脑利钠肽前体检测在心血管病中的表达及作用。方法用罗氏cobase602全自动化学发光分析仪测定30例高血压患者、30例冠心病患者、30例急性心肌梗死患者、30例急性心力衰竭患者和30名健康体检成人的血清proBNP水平,观察它们的变化与心血管病程度的相关性。结果HBP组血清proBNP水平明显高于对照组(P<0.01);CHD组血清proBNP水平明显高于HBP组(P<0.01);AMI组血清proBNP水平明显高于CHD组(P<0.01);AHF组血清proBNP水平明显高于AMI组(P<0.01);AHF>AMI>CHD>HBP>对照组且各组间有显著差异(P<0.01)。结论proBNP在心血管病中具有重要的临床价值,血清proBNP浓度与心血管病的严重程度呈正相关。