简介：摘要目的探索微小RNA(miRNA，miR)-345-5p对成骨细胞的调控机制。方法利用miRNA芯片寻找差异表达miRNA。pLVX-IRES-ZsGreen1质粒构建miR-345-5p过表达载体，建立过表达miR-345-5p大鼠成骨细胞、过表达变异miR-345-5p大鼠成骨细胞和空白对照组。通过细胞计数试剂盒(CCK-8)及生长曲线实验对比3组细胞增殖能力，双荧光素酶报告基因实验验证miR-345-5p与Smad1基因相互作用。构建miR-345-5p+空质粒、对照RNA+空质粒、对照RNA+Smad1质粒和miR-345-5p+Smad1质粒组，在大鼠成骨细胞内验证miR-345-5p与Smad1基因的相互作用。采用Student-t检验和ANOVA分析。结果生信分析提示miR-345-5p在骨折中的高表达，Smad1为其调控分子。将miR-345-5p质粒导入大鼠成骨细胞，CCK-8提示miR-345-5p质粒较miR-345-5p变异体质粒(48 h：q＝7.453，P<0.01，72 h：q＝15.34，P<0.01)及空白质粒(48 h：q＝6.963，P<0.01，72 h：t＝12.68，P<0.01)成骨细胞的活性显著增强。生长曲线显示转入miR-345-5p质粒的成骨细胞48 h时细胞数量显著低于空白对照组(q＝3.814，P<0.05)，72 h时细胞数量显著低于miR-345-5p变异(q＝11.010，P<0.01)和对照组(q＝10.410，P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验显示miR-345-5p可降低野生型Smad1-3’端非编码区(3’UTR)质粒组荧光素酶的活性，细胞实验证实miR-345-5p显著降低大鼠成骨细胞的活性和生长曲线，过表达Smad1后成骨细胞的活动和生长曲线得到恢复。结论miR-345-5p通过调控Smad1分子调控大鼠成骨细胞的增殖参与骨折的愈合。

简介：目的研究补肾中药血清对离体SD大鼠成骨细胞中Smad1/5活性的变化。方法采用多次胶原酶消化法获取新生SD大鼠颅盖骨中的成骨细胞进行体外培养,并应用Gomori改良钙钴法对其进行碱性磷酸酶表达的鉴定;随机将实验用大鼠分为正常组、补肾中药组（补肾组）、骨疏康颗粒对照组（骨疏康组）、补中益气颗粒对照组（补脾组）;对实验大鼠给药干预8d后,通过血清药理学的方法使用各组大鼠血清培养成骨细胞48h;应用免疫组化SABC方法检测成骨细胞中Smad1/5的活性表达。结果补肾中药血清作用于体外培养的成骨细胞48h后对于成骨细胞的增殖具有明显的促进作用,其效果优于正常组（P〈0.01）;成骨细胞中Smad1/5的活性表达,与正常组相比有所降低。结论成骨细胞中存在Smad1/5的表达,表明Smad1/5可能有促进成骨细胞分化、增殖的功能,对成骨细胞保持自身功能、维持骨密度的作用上发挥重要的作用。②具有益肾填精壮骨的补肾中药可以影响Smad1/5在成骨细胞中的表达,对于促进和维持成骨细胞的特性及功能具有重要作用,这可能是防治骨质疏松症的机理之一。

简介：摘要目的探讨骨形成蛋白2(BMP2)信号通路在颅内动脉瘤中的表达情况及其介导血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的作用机制。方法将健康成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为模型组(n＝32)和假手术组(n＝32)。模型组通过结扎左侧颈外动脉、翼颚动脉及右侧颈总动脉制备颅内动脉瘤模型，假手术组不结扎血管。两组于术后3个月处死，采用电镜和HE染色法判断成模情况；采用免疫组织化学染色和蛋白免疫印迹法分别检测BMP2及下游磷酸化Smad1/5(p-Smad1/5)在两组大鼠前交通动脉复合体VSMCs中的表达情况。进一步离体培养大鼠脑动脉的VSMCs，分为对照组、BMP2组(加入BMP2 100 ng/ml)以及Smad6＋BMP2过表达组(转染Smad6过表达载体＋BMP2 100 ng/ml)。采用TUNEL法检测各组细胞的凋亡情况，进一步采用蛋白免疫印迹法检测各组细胞中BMP2、Caspase3及p-Smad1/5的表达情况。结果电镜和HE染色结果显示，与假手术组比较，模型组大鼠前交通动脉复合体的血管壁均发生不同程度的瘤样病变，且VSMCs发生明显的重构和凋亡，说明建模成功。免疫组织化学染色结果显示，模型组大鼠前交通动脉复合体中的Caspase3(0.25±0.03)和BMP2(0.12±0.03)相对表达量均较假手术组(均为0.06±0.01)增加(均P<0.05)。蛋白免疫印迹法结果显示，与假手术组比较，模型组大鼠BMP2(分别为：0.75±0.07、0.50±0.04)和p-Smad1/5(分别为：0.73±0.07、0.27±0.04)的相对表达量均明显增高(均P<0.05)。TUNEL法检测离体VSMCs，结果显示BMP2组[(74.63±6.05)%]和Smad6＋BMP2组[(45.92±1.08)%]的细胞凋亡率均较对照组增加[(4.35±0.65)%，均P<0.01]；但Smad6＋BMP2组的细胞凋亡率较BMP2组低(P<0.01)。蛋白免疫印迹法结果显示，BMP2组和Smad6＋BMP2组的p-Smad1/5、Caspase3的相对表达量均较对照组增加(均P<0.01)；但Smad6＋BMP2组的p-Smad1/5、Caspase3相对表达量均较BMP2组低(均P<0.05)。结论BMP/Smad信号通路在颅内动脉瘤中被激活，且可能通过BMP2上调p-Smad1/5进而促进VSMCs凋亡。

简介：目的观察辛伐他汀体内给药对大鼠骨量和骨髓基质干细胞增殖、分化的影响。方法16只6w龄雌性SD大鼠按体重随机分成2组,每组8只：第一组（G1）,实验组,辛伐他汀灌胃20mg/kg·d（S20）,持续6w;第二组（G2）,对照组,每天蒸馏水灌胃（N）,持续6w。于最后一次灌胃的第二天处死所有大鼠,取左侧股骨行骨密度和骨组织形态计量学测定;取右侧股骨和胫骨骨髓细胞向成骨方向诱导培养,并作如下检测：采用CellCountingKit-8（CCK-8）法检测定向成骨分化中的骨髓基质干细胞的增殖能力;细胞培养第16d和28d分别检测碱性磷酸酶（ALP）比活性、ALP染色和vonKossa染色;细胞培养第21d,提取总RNA,采用Real-timeRT-PCR检测Smad1、2、7的mRNA的表达。结果辛伐他汀体内给药干扰6w后大鼠骨量和骨密度无显著变化,体外培养骨髓基质干细胞所有检测基因mRNA水平、细胞增殖能力、矿化能力（vonKossa染色）、ALP比活性、ALP染色两组间均无显著差别。结论辛伐他汀体内给药6w对大鼠骨量及骨髓基质干细胞的增殖和分化无显著作用。

简介：目的研究转化生长因子Bl（transforminggrowthfactor—betal，TGF—B1）和Smad4在宫颈上皮内瘤变（cervicalintraepithelialneoplasia，CIN）及IA2-ⅡA宫颈鳞状细胞癌（squamouscarcinomaofthecervix，scc）中的表达，并探讨其与SCC患者临床病理资料之间的关系。方法采用免疫组化S—P法检测TGF—β1、Smad4在35例CIN、50例SCC、10例正常宫颈组织中的表达并分析其在肿瘤不同临床病理特征之间的关系。结果TGF—β1蛋白在正常宫颈鳞状上皮组织、CIN、SCC组织中表达强度渐增加，3组之间比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；且TGF—p1在SCC中的表达强度与SCC的病理分级、有无淋巴结转移、浸润深度密切相关（p〈0．05）。Smad4蛋白在正常宫颈鳞状上皮组织、CIN、SCC组织中表达强度渐减弱，3组之间比较，差异有统计学意义（P〈0．05），且Smad4在SCC中的表达强度与SCC的病理分级、有无淋巴结转移密切相关（P〈0．05）。TGF—p1和Smad4在SCC中的表达呈负相关性（P〈0．05）。结论TGF—β1、Smad4蛋白可能在SCC发生发展以及转移方面发挥了一定的作用，它们的表达与SCC病理分级有关，有望作为判断SCC恶性程度的指标。

简介：摘要：肿瘤发病率和死亡率每年都在增加，尤其是在年轻人群中呈上升趋势。2018年，全球报告了1810万例新发肿瘤病例，960万人死于肿瘤，使其成为对人类健康的最大威胁之一。传统的抗肿瘤放化疗具有很强的细胞毒性，因为它会使肿瘤细胞中的核酸和蛋白质变性，然而，这也会对正常细胞造成损害，并引起严重的不良反应，甚至继发肿瘤。为解决放化疗特异性差的问题，发展了靶向治疗和免疫治疗。同时，免疫治疗后自身免疫严重不良反应的高发生率对患者的生命构成了新的威胁。因此，寻找新的肿瘤相关因子十分有必要。

简介：目的：探讨复黄生肌愈创油膏（简称复黄膏）促进创面愈合的作用机制。方法：36只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、复黄膏治疗组。复制Wister大鼠糖尿病创面模型，药物干预后分第3天和第11天两个观察时段，采用免疫组化技术观察不同时段创面中TGF—β1、smad3、smad7含量变化。结果：第3天时，复黄膏治疗组TGF—β1含量、smad3含量均明显高于模型组（P〈0．05），但与正常组比较无统计学差异；smad7含量3组间比较无统计学差异。第11天时，复黄膏治疗组TGF—β1含量、smad3含量均明显低于正常组（P〈0．05），但与模型组比较无统计学差异；复黄膏治疗组smad7含量明显高于正常组和模型组（P〈0．05）。结论：TGF—β1、smad3在复黄膏治疗组创面愈合早期表达上调，表明复黄生肌愈创油膏通过促进创面生长因子的表达及其信号转导，从而起到促进创面愈合的作用；而在创面愈合晚期，TGF—β1、smad3在复黄膏治疗组表达下调，smad7作为细胞内Smad信号的抑制剂表达上调，可能为复黄生肌愈创油膏促进了创面愈合的负反馈机制，及时中止成纤维细胞过度生长，防止瘢痕形成。

简介：摘要目的观察泡型肝包虫病患者肝组织中Smad2、Smad5、Smad7蛋白表达，探讨各蛋白亚型在泡型肝包虫病肝纤维化进程中的作用、表达量的变化及其关系。方法收集20例泡型肝包虫病患者术中肝组织标本，根据泡性肝包虫病患者病灶液化范围及手术切除标准，每例分为A组(距离病灶0.5 cm内)、B组(距离病灶0.5~1.5 cm之间)、C组(距离病灶1.5 cm以外的肝组织)。对标本行苏木精-伊红(HE)及Masson染色，检测各组织纤维化，同时利用蛋白质印迹法(Western blot)技术检测Smad2、Smad5、Smad7蛋白表达量情况。通过相关性分析Smad2、Smad5、Smad7蛋白与HF程度之间的内在关系以及各蛋白之间的关系。结果在20例患者标本中，病灶旁A组和B组组织中均存在1级(n＝2、14)、2级肝纤维化(n＝18、6)，未发现3级肝纤维化；且病灶旁组织越靠近病灶，纤维化程度越高，差异有统计学意义(χ2＝15.000，P<0.01)。Western blot检测发现，同一组织中，越靠近病灶，Smad2、Smad5蛋白表达量越高(F＝48.336、75.988)，Smad7蛋白表达量越低(F＝44.202)，差异有统计学意义(P<0.01)，A组Smad2指标高于B、C组(A组1.18±0.19比B组1.02±0.25比C组0.60±0.13，F＝48.336，P<0.01)；A组smad5指标高于B、C组(A组0.99±0.13比B组0.76±0.18比C组0.41±0.12，F＝75.988，P<0.01)；A组smad7指标低于B、C组(A组0.32±0.07比B组0.46±0.13比C组0.60±0.09，F＝44.202，P<0.01)。不同组织中，随着纤维化分级越高，Smad2、Smad5表达量越高(F＝104.437、128.238)，Smad7蛋白表达量越低(F＝92.626)，差异有统计学意义(P<0.05)，2级肝纤维化组中Smad2指标高于1级肝纤维化组高于0级肝纤维化组(HF-2组1.24±0.16比HF-1组0.89±0.16比HF-0组0.60±0.13，F＝104.437，P<0.05)；2级肝纤维化组中Smad5指标高于1级肝纤维化、0级肝纤维化组(HF-2组0.72±0.28比HF-1组0.68±0.10比HF-0组0.41±0.12，F＝128.238，P<0.05)；2级肝纤维化组中Smad7指标低于1级肝纤维化、0级肝纤维化组(HF-2组0.31±0.08比HF-1组0.51±0.05比HF-0组0.60±0.09，F＝92.626，P<0.05)。泡型肝包虫病病灶旁组织中，Smad7与Smad2、Smad5表达量呈负相关(r＝-0.830、-0.780，P<0.05)，Smad5与Smad2表达量呈正相关(r＝0.795，P<0.01)。此外，排除混杂干扰因素分别对三个因子进行控制，对各因子进行控制时，仍呈现出与控制前相同趋势的相关性。结论泡型包虫病PJ0V0M0分型患者局部肝纤维化程度多表现为1~2级，Smad2、Smad5、Smad7因子共同参与了其调控过程。Smad5随着肝纤维化进程持续性的高表达，可能与泡型包虫病PJ0V0M0分型患者仅表现为局灶性HF且不发生严重HF有关。

简介：摘要目的研究压力对增生性瘢痕(HTS)形成及转化生长因子β1(TGF-β1)/Sma和Mad同源物蛋白(Smad)信号通路的影响。方法健康成年新西兰大白兔12只(空军军医大学动物实验中心提供)，用直径为1 cm的圆形打孔器在每侧兔耳腹侧标记出4个圆形创面，用手术小圆刀沿标记线切开皮肤全层至兔耳软骨膜，分离软骨膜及全层皮肤，刮除创面残留组织，暴露创面，术后第28天观察瘢痕形成情况。兔耳HTS模型构建成功后进行分组，采用自身对照研究，兔左耳设为实验组，右耳为对照组，用抽签法于每侧兔耳选取2个HTS模型作为研究对象，每组24个。实验组：使用4-0尼龙丝线将直径为1.5 cm的圆形钕铁硼磁铁垫上压力垫片缝合至兔耳软骨上，使用Flexiforce压力传感器测量压力大小并每周进行调整，将压力控制在20~25 mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa),每天持续时间≥23 h；对照组：不做处理。在施加压力后第40天观察兔耳瘢痕大体形态，并切取组织行HE、Masson染色进行组织学研究，计算瘢痕增生指数(SEI)、成纤维细胞数、角质层厚度；采用荧光定量PCR检测TGF-β1、Smad3、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(Collagen Ⅲ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA相对表达量；采用蛋白质印迹法检测TGF-β1、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、α-SMA蛋白相对表达量及Smad3磷酸化蛋白(p-Smad3)相对表达量(p-Smad3与Smad3蛋白表达量的比值)。使用Excel 2019、GraphPad Prim 8.0软件进行数据统计分析，计量资料均符合正态分布，以±s表示，2组间比较采用配对样本t检验，P<0.05为差异有统计学意义。结果12只兔共形成96个创面，有27个创面无明显增生，其余69个创面形成突出皮肤表面、质地坚硬、暗红色的瘢痕增生样组织块，瘢痕形成率为71.9%(69/96)。施加压力后第40天，与对照组相比，实验组瘢痕外观凸起明显降低，硬度变软，颜色稍浅；HE染色和Masson染色结果显示，实验组中角质层厚度、SEI和成纤维细胞数分别为(69.33±6.03) μm、1.30±0.08、(236.30±14.64)个/视野，均显著低于对照组的(114.00±10.15) μm、1.72±0.05、(320.30±14.57)个/视野(均P<0.01)，真皮层未见丰富的毛细血管、炎性细胞和成纤维细胞，胶原纤维排列有序，且较稀疏。荧光定量PCR检测结果表明，实验组TGF-β1、Smad3、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、α-SMA mRNA相对表达量分别为0.48±0.08、0.58±0.05、0.04±0.01、0.15±0.02、0.31±0.03，均低于对照组的1.00±0.07、1.00±0.05、1.00±0.08、1.00±0.10、1.00±0.06(均P<0.01)。蛋白质印迹法检测结果显示，实验组TGF-β1、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、α-SMA蛋白相对表达量及Smad3磷酸化蛋白相对表达量分别为0.65±0.03、0.07±0.01、0.43±0.03、0.53±0.03、0.54±0.03，均低于对照组的1.02±0.06、0.93±0.05、0.92±0.03、0.82±0.03、0.92±0.03(均P<0.01)。结论压力疗法可明显抑制瘢痕的增生，改善HTS组织结构，有利于胶原纤维蛋白的正常排列，减少胶原蛋白的过度沉积；压力疗法可能通过调控TGF-β1/Smad信号通路来抑制瘢痕的增生。

简介：摘要目的探讨EWSR1-SMAD3阳性纤维母细胞肿瘤（EWSR1-SMAD3-postive fibroblastic tumor，ESFT）的临床病理学特征、免疫表型、分子遗传学改变及鉴别诊断。方法回顾性分析复旦大学附属肿瘤医院病理科2018—2021年会诊的3例ESFT，总结其临床资料、组织病理学特征、免疫表型及分子改变，并复习相关文献。结果例1、2为男性，例3为女性，年龄分别为24、12和36岁。3例肿瘤均发生于足部皮下。术前病程6个月至2年，表现为局部肿块隆起或缓慢性生长的结节，1例伴有疼痛。肿瘤最大径0.1~1.6 cm（平均1.0 cm）。镜下观察，肿瘤位于皮下，呈结节状或丛状，例1示皮下脂肪组织浸润。肿瘤主要由条束状排列的梭形细胞组成，瘤细胞形态温和，染色质均匀细腻，未见核分裂象。3例均伴有明显的间质胶原化，其中例2显示区带性结构。例1复发病灶及例2于局部区域可见细腻的点状钙化。免疫组织化学标记显示，瘤细胞弥漫性表达ERG，但不表达CD31和CD34，Ki-67阳性指数<2%。2例荧光原位杂交检测显示EWSR1基因重排，3例二代测序检测均显示有EWSR1-SMAD3融合基因。随访3~60个月，1例于24个月后局部复发。结论ESFT是一种好发于足部的良性纤维性肿瘤，以特征性表达ERG和具有EWSR1-SMAD3融合基因为特征，少数病例切除不净可复发。熟悉其临床病理性特点和分子表型有助于与肢端其他梭形细胞肿瘤相鉴别。

简介：转变生长因素--尾除了Smads利用大量的细胞内部的发信号小径调整细胞的功能的一个宽数组。这些不在经典中，non-Smad小径被占据ligand的受体直接激活到增强，稀释，或不那样调制下游地细胞的回答。这些non-Smad小径包括地图kinase小径，象Rho一样GTPase发信号小径，和phosphatidylinositol-3-kinase/AKT小径的各种各样的分支。这评论在non-Smad小径的分子、生物化学的机制的理解集中于最近的进展。另外，这些non-Smad小径的功能也被讨论。

简介：利用酵母双杂交试验,鉴定了细胞内信号传导蛋白SMAD3和SMAD4的相互作用。通过SMAD3和SMAD4各突变体的同源和异源相互作用的双杂交反应,确定SMAD4介导信号传递的功能区在中间连接区,SMAD3的功能区在C末端。

简介：摘要肾纤维化的主要特征为肾间质中成纤维细胞增生和细胞外基质的过量沉积，最终造成肾组织结构损伤及功能丧失。转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad信号通路是调节成纤维细胞和肌成纤维细胞胶原形成的典型途径。TGF-β1/Smad信号传导途径的持续激活导致成纤维细胞和肌成纤维细胞长期过度活化，对于肾纤维化的形成是必需的。本文对TGF-β1/Smad通路对肾纤维化的机制以及中药对其干预进行综述，为肾疾病的治疗提供新的靶点。

简介：

简介：摘要目的探讨miR-193a对刀豆蛋白a(Concanavalin A，Con a)所致小鼠慢性肝损伤的影响及其分子机制。方法c57BL/6小鼠32只，随机分成对照组、ConA损伤组、过表达组(ConA＋慢病毒包装miR-193a组)、过表达对照组(ConA＋慢病毒空载体组)，每组8只；小鼠经尾静脉按8 mg/kg体重每周注射ConA 1次(对照组注射等体积生理盐水)，连续8周，构建慢性肝损伤模型，过表达组第6周于ConA给药48 h后经尾静脉将慢病毒包装的miR-193a过表达质粒注射到小鼠体内，过表达对照组以相同的给药方式注射慢病毒空载体(对照组、ConA损伤组注射等体积生理盐水)；ConA给药8周后，处死小鼠收集样本，血清酶学谷丙转氨酶(alanine aminotransferase ，AST)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase ，ALT)水平、HE染色及Masson染色评价模型小鼠实验性肝损伤程度，实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(real time fluorescent quantitative reverse transcription polymerase chain reaction，qRT-PCR)检测miR-193a，Ⅰ型胶原(collage type Ⅰ，col1a1)，Ⅳ型胶原(collage type Ⅳ，col4a1)，α-平滑肌激动蛋白(α-smooth muscle actin，α-SMA)和激活素受体1(activin receptor-1，acvr1)，激活素a(activin a)，smad 2 mRNA的表达，Westernblot检测col1a1和α-SMA蛋白的表达；KEGG分析miRNA在多种信号通路中的富集，GO分析miR-193a作用靶基因的生物学作用，在线生物信息学预测miR-193a与acvr1之间的靶向结合作用。结果慢性肝损伤模型中miR-193a表达明显下调(F＝7.044，P<0.05)。在肝损伤鼠体内过表达miR-193a后，AST和ALT含量明显下降(t值分别为2.733和6.412，P值均<0.05)，HE和Mass染色检测观察到过表达的miR-193a明显减轻肝损伤的程度，抑制与肝损伤相关col1a1，col4a1和α-SMA表达(F值分别为5.295，6.443，8.546，P值均<0.05)。通过生物信息学分析miR-193a与acvr1之间存在的潜在的预测靶点，miR-193a过表达后下调acvr1，和activin a和smad 2 mRNA的表达(F值分别为6.046，7.716，7.063，P值均<0.05)。结论miR-193a可通过抑制activin/smad信号通路中acvr1的表达，减轻ConA诱导的慢性实验性肝损伤。

简介：【摘要】  目的  研究白藜芦醇在转化生长因子β1（TGF-β1）刺激人骨骼肌细胞纤维化中的作用及可能机制。方法  体外培养人骨骼肌细胞，并分为正常对照组（control组）；白藜芦醇干预组（Res组）；TGF-β1干预组（TGF-β1组）；白藜芦醇+TGF-β1干预组（Res+TGF-β1组）。采用ELISA法、Western blot 方法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、结缔组织生长因子（CTGF）、Smad3、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）蛋白表达水平，实时定量PCR方法检测其mRNA表达水平。结果  TGF-β1组及Res+TGF-β1组的α-SMA、CTGF、Smad3、MCP-1蛋白和mRNA表达水平均较control组及Res组显著升高（P<0.001）。在分组比较中，Res+TGF-β1组α-SMA、CTGF、Smad3、MCP-1表达较TGF-β1组明显降低（P<0.001），control组及Res组α-SMA、CTGF、Smad3、MCP-1表达无明显差异（P>0.05）。结论  白藜芦醇能够抑制TGF-β1诱导的α-SMA、CTGF、Smad3、MCP-1表达增加，其作用可能是通过抗炎及抑制TGF-β1/CTGF/Smad3信号通路实现。

简介：

简介：MuchresarchhasbeencarriedoutonthethreeCombinedPacificationCommissionsandChiefMilitaryCommands(宣慰使司都元帅府),andontheCommissionforBuddhistandTibetanAffairs(宣政府)sincepublicationoftheessay,HowtheYuanCentralGovernmentManagedTibetanLocalAffairswrittenbyHanRulinsomefortyyearsago.

简介：目的：观察在全反式维甲酸（ATRA）作用下,人急性早幼粒细胞白血病（APL）NB4细胞株转化生长因子β1（TGF-β1）/Smad信号转导途径中蛋白表达的变化,探讨TGF-β1/Smad途径在NB4细胞分化过程中的作用机制。方法：将ATRA作用于NB4细胞株不同时间后,应用蛋白印迹（Westernblot）方法检测TGF-β1、Ⅰ型受体（TβRⅠ）、Ⅱ型受体（TβRⅡ）、Smad2、Smad4和Smad7蛋白表达的变化。结果：ATRA作用3h后TβRⅠ、TβRⅡ的表达量开始增加;12h后TGF-β1的表达量开始增加,随着加药时间延长,蛋白表达量逐渐上升,48h表达量至最高,然后下降。而Smad2、4、7蛋白的表达在加药3～6h后开始增加,呈逐渐上升趋势,Smad2表达量于48h达峰值,然后逐渐下降;而Smad4和Smad7的最高值出现较晚,出现在72h,然后下降。结论：TGF-β1信号转导途径与APL细胞的分化密切相关,ATRA在体外能上调TGF-β1/Smad途径的蛋白表达,以发挥抗白血病效应。

简介：摘要目的探讨富血小板血浆（PRP）经TGF-β1/Smad2/3介导MMP/TIMP表达，治疗大鼠椎间盘退变（IVDD）的作用机制。方法将40只IVDD大鼠随机分为4组，每组10只，PRP组：腰椎间盘（L4/5、L5/6）内注射10 μl PRP；PRP+TGF-β1抑制组：10 μl PRP+10 μl TGF-β1抑制剂混合物；TGF-β1抑制剂组：10 μl TGF-β1抑制剂；生理盐水对照组：10 μl理盐水。各组治疗后2、4周采用HE、Masson染色观察椎间盘退变情况；RT-qPCR检测TGF-β1，Smad2/3，MMP1、3，TIMP1 mRNA表达水平；免疫组化检测椎间盘内TGF-β1、Ⅰ型胶原蛋白表达丰度；通过分析比较不同组间、不同时间椎间盘内各种指标的变化，评估大鼠椎间盘退变情况。结果治疗2、4周后HE、Masson染色观察发现PRP组优于另外3组；免疫组化检测PRP组TGF-β1表达优于另外3组，而Ⅰ型胶原蛋白表达少于另外3组；治疗2周后RT-qPCR检测PRP组大鼠椎间盘内TGF-β1（2.14±0.11），Smad2（3.47±0.18）、Smad3（1.77±0.09），TIMP1（2.80±0.18）的mRNA相对表达量明显高于其他3组（P<0.05），MMP1（0.70±0.07）、MMP 3（0.67±0.06）的mRNA相对表达量明显低于生理盐水组和TGF抑制剂组（P<0.05）；在治疗4周后PRP组TGF-β1（2.45±0.23），Smad2（3.82±0.06）、Smad 3（3.22±0.15），TIMP1（2.96±0.06）的mRNA相对表达量进一步升高，明显高于其他3组（P<0.05），MMP1（0.39±0.05）、MMP3（0.51±0.07）的mRNA相对表达量逐渐减少，明显低于生理盐水组和TGF抑制剂组（P<0.05）。结论PRP通过TGF-β1/Smad2/3介导MMP/TIMP表达，改善退变椎间盘理化指标，从而延缓椎间盘退变。