简介：目的:建立α-干扰素(IFN-α)信号传导蛋白和基因检测的方法.方法:收集慢性乙型病毒性肝炎、自愈性乙型肝炎病毒感染者、健康对照者的外周静脉血并分离外周血单核细胞(PBMC),建立EB病毒(EBV)转化的B淋巴细胞系.体外分别用不同浓度的IFN-α(0、100、1000、10000IU/ml)刺激细胞,用凝胶电泳迁移率试验(EMSA)检测IFN活化的干扰素刺激基因因子3(ISGF-3)和γ-干扰素活化因子(GAF);设计特异的引物和探针,用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测IFN诱导抗病毒蛋白MxA、OAS1、PKR的相对表达.结果:成功建立了EBV转化的B淋巴细胞系.建立了EMSA检测ISGF-3和GAF转录蛋白的方法,用实时荧光定量PCR能够准确地检测样本中MxA、OAS1和PKR的表达.结论:建立了IFN信号传导蛋白和基因检测的方法,为进一步研究IFN治疗慢性乙型病毒性肝炎的疗效提供依据.

简介：动静脉内瘘成形术后,组织粘连、瘢痕愈合是导致内瘘栓塞、无法保持正常通畅的原因之一,我们在临床实践中发现,动静脉内瘘成形术后血管吻合质量的好坏关键在于血管吻合前后对血管的保护[1,2].我科2005-02～2006-02在动静脉内瘘成形术中应用透明脂酸钠19例,分析如下.

简介：我院2002—01～2005—03应用降纤酶（Defibrase，DF）联合血塞通注射液治疗进展性脑卒中（脑梗死）56例，疗效较好，总结如下。

简介：目的：对血清Apo—B在评估心血管疾病危险性的临床应用价值作出正确的评价。方法：对775名健康体检者血脂项目总胆固醇(TCHO)、三酯酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL—C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL—C)、Lp(a)和Apo—B及血糖、血压、吸烟史、年龄和性别等进行评估，分析这些项目对被检者患心血管疾病及冠心病的危险性。并分析同一地区不同人群的血脂差异。结果：Apo—B对被检者患冠心病的危险性相关性良好，与其它能提示心血管疾病的血脂项目相关。结果还提示同一地区不同人群中男性的血脂差异较大，女性相对较小。结论：Apo—B是心血管疾病的独立危险因素，且可用于评价患冠心病的危险性，是一个良好的心血管疾病筛选指标。另外，应对部分人群的血脂状况进行综合分析，重点监护，定期检查血脂。

简介：目的:探索建立一种利用核酸酶免疫试验中探针的熔解温度差异检测已知突变位点的方法.方法:目的靶基因经扩增后,5'末端标记洋地黄毒苷(digoxigenin,Dig)的等位基因探针与已结合在酶标板上的扩增产物杂交,其杂交的探针-DNA二聚体的碱基错配与未错配之间存在变性温度差异.选择适宜的熔解温度进行已知突变位点的检测,并利用酶联免疫吸附试验对标记探针进行识别、放大和结果判断.结果:实验结果表明,当熔解温度为37℃时,扩增产物的加样量为5μl/孔和检测探针加入量为10pmol/孔时所测得A450值为0.800～0.923.等位基因检测探针的熔解温度为53℃,P1、P2与靶DNA结合率分别为86%和16%.当P1、P2按不同比例杂合时,其与结合率存在着明显的线性关系(r=0.9985).从8例人类乙型肝炎病毒(HBV)DNA阳性的血清标本检测中证实1例酪氨酸-缬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸(YVDD)突变、3例野生型,其余4例可能是杂合型突变.结论:本法具较高的检测灵敏度,且其突出的特点是能检测出标本中杂合突变所占的比例,间接反映出患者体内突变的类型和比例.这对于疾病的诊断、治疗、预后评价等都具有较高的价值.

简介：在医学院校中生物化学的学习一直是学生感到头疼的问题，主要是生物化学的结构特点决定了学习的困难性。采用适当的教学方法是解决这一问题的关键。本文针对生物化学的知识结构特点，结合布鲁纳的结构教学理论，介绍生物化学教学中采用基本结构和发现式学习的一些看法。

简介：1998年,美国临床生化科学院(NACB)提出了心肌标志物在急性冠脉综合征(ACS)诊治中的应用准则和建议[1],并将建议划分为3级.NACB的建议在ACS诊断和预后判断等临床实践中发挥了重要作用.随着心肌标志物的研究和临床应用的深入,2004年NACB起草了"急性冠脉综合征和心衰生化标志物的实验室医学实践指南",对原来的准则进行了修正和补充,并在原有建议分级的基础上,进一步对事实型依据的可靠性分为A、B、C3层(表1).本文对该指南作综合介绍.

简介：应用口腔正畸学原理,制作导杆式(OA)导下颌向前治疗轻度或中度(OSAS)16例,效果良好,现总结如下.1对象和方法1.1对象本组年龄47～68岁,平均55.2岁,平均身高1.69m,平均体重78kg.夜间最低血氧饱和度47%,最高呼吸暂停指数50n/h.经多导睡眠图检查确诊为轻度或中度OSAS,耳鼻喉科检查排除了上气道解剖及病理异常.口腔正畸科检查下颌后缩,偏胖者患病率为86%.患者OA治疗1～2个月后,主诉及PSG复查,有完整主诉复查记录14例,有完整的PSG复查资料2例.

简介：骨髓增生异常综合征(MDS)是源于造血干(祖)细胞水平损伤而引起的一组克隆性疾病.临床表现为贫血,有时有感染和出血,外周血象呈一系或多系细胞减少,骨髓有显著的病态造血.随着细胞学、免疫学、遗传学、分子生物学(MICM)的应用,WHO于2000年发表了MDS分型方法,进一步明确了MICM在MDS诊断、分型、分期和预后判断中的临床价值.骨髓活检切片作为病理学方法在MDS法、美、英(FAB)分型中的重要价值已被广泛认识,本文对我院MDS骨髓活检切片进行观察分析,以判断骨髓活检切片在MDSWHO2000分型中的临床价值.

简介：目的：建立免疫沉淀法测定血清LDL-VLDL-GGT活性并观察其在肝癌鉴别诊断中的价值。方法：以ApoB抗体作为沉淀剂，沉淀血清中与LDL及VLDL结合的GGT并测定其活性，测定65例肝癌，53例肝硬化，32例慢性肝炎及75例正常人结果，并进行统计分析。结果：ApoB抗体能很好地沉淀各种样品中LDL和VLDL，该方法批内精密度为3.56％-8.21％，批间精密度为5.45％-9.77％。LDL-VLDL-GGT活性在0-58U/L范围内线性良好。以10U/L为cutoff值，则其对肝癌的诊断敏感性可达86.15％，肝癌与肝硬化和慢性肝炎鉴别诊断的特异性分别为67.92％和81.25％。结论：本法检测血清LDL-VLDL-GGT活性对鉴别肝癌与其它肝病具有重要意义。

简介：笔者用英语讲授免疫检验专业课，并采用问答式讨论法的教学方法，使学生的专业英语水平明显提高。采用此教学方法有利于学生对知识的深入理解和融会贯通，有利于学生创造性思维能力和创新能力的培养。

简介：目的探讨二价金属离子Cd^2+、Mn^2+、Ca^2+、Zn^2+、Mg^2+、Cu^2+、Ba^2+对血清中肌肽酶与肝脏中肌肽酶活性的影响。方法测定0．1—10mmol/L范围内cd^2+和其它几种二价金属离子对血清及肝中肌肽酶活性的影响，比较其激活结果。结果Cd^2+能将血清中肌肽酶活性提高16倍，而对肝脏中肌肽酶无激活作用；Mn^2+能将血清中肌肽酶活性提高2倍，将肝脏中肌肽酶提高2．7倍。其它离子激活效果不明显。血清中肌肽酶与肝脏中肌肽酶的[Mn^2+/Cd^2+]激活比值差异非常显著。结论血清中肌肽酶与肝脏中肌肽酶在化学性质上存在差异，很可能在人体内存在肌肽酶同工酶。

简介：L-谷氨酸氧化酶的发现是近20年的事情。它是一种十分有用的工具酶，在临床生化检验上，可以用于测定丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转酶和γ-谷氨酰基转移酶等的活性以及肌酐等的浓度。此外，在医药工业和食品工业上也有重要的应用。本文对该酶的来源、特性和应用等有关的文献作了系统回顾和综述。

简介：目的：建立实时定量RT—PCR检测人转化生长因子β1(transforminggrowthfactorβ1，TGF-β1)的方法，对慢性肝炎肝纤维化患者外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell，PBMC)中TGF-β1mRNA进行定量检测。方法：在TGF-β1基因的外显子1和2之间设计一对引物和一条TaqMan—MGB探针；构建TGF-β1质粒克隆，以T7RNA聚合酶体外转录合成带有目的片断的cRNA作为标准品，根据10倍系列稀释cRNA标准浓度对数和其循环域值(Cyclethreshold，Ct)制作标准曲线，检测PBMC中TGF—β1mRNA含量；并对本方法进行方法学评价。结果：重组质粒测序显示插入的片断为TGF—β1mRNA特异性片断，成功的建立了实时定量RT—PCR检测TGF-β1mRNA方法，灵敏度达6．81拷贝，线性范围为6．81～6．81×10^8拷贝，且重复性好，批内、批间变异系数分别为1．28％-2．27％和2．56％-2．61％，临床应用显示，27例肝纤维化病人PBMC中TGF-β1表达量为1．20×10^8(1．80×10^7～9．80×10^7)拷贝数／10^5细胞，显著高于正常对照组3．30×10^7(7．24×10^6～5．00×10^7)拷贝数／10^5细胞(P<0．05)。结论：实时定量RT-PCR检测TGF-β1mRNA具有敏感、特异、快速、高效等特点，为TGF—β1mRNA作为肝纤维化的诊断指标提供方法学依据。

简介：MR已广泛应用于关节的检查,其成像参数多,可作各个方位的多平面成像,软组织分辨率高,可使组成关节的骨骼、韧带、半月板的正常结构和病理改变得以很好的显示.

简介：在表科生教学过程中利用网络中的生物信息资源，结合第三军医大学医学检验系临床生物化学教研室的科研方向和已有的条件，对学有余力的检验表科生，开设了“人乳腺球蛋白基因的克隆和序列测定”诊断分子生物学综合实验。通过此综合实验．使学员掌握了科研课题设计的基表理论和方法，为其将来的研究生阶段学习或相关的科研工作打下一定基础。

简介：目的应用尿液自由基活性快速检测方法，以探讨严重急性呼吸综合征(severeacuterespiratorysyndrome，SARS)患者尿液自由基活性测定在评价急性肺损伤病理演变中的作用。方法采用VesPro公司提供的快速检测尿液总自由基活性(FreeRadicalActivity，FRA)的检测试剂杯，分别对20名健康成年人及20名临床确诊的SARS患者，10名疑似病例测定了尿液总FRA水平。结果与正常对照组比较，SARS和疑似病例其FRA明显增高，两者有显著性差异(P<0，01)，而SARS患者组与疑似病例组之间相差不显著(P>0．05)。结论尿液总自由基活性(FRA)检测方法具有取样简便、操作简单、结果可靠等特点，对SARS患者急性肺损伤的程度的判断及抗氧化治疗效果评价有一定的临床应用价值。

简介：在小儿泌尿外科的临床中,常会遇到下列棘手问题:对经体检、B超、CT、MRI等检查都未发现睾丸的双侧隐睾患儿是否需手术探查以与无睾的鉴别;对外阴模棱两可的两性畸形患儿是否需手术探查以明确何种性腺的存在;如睾丸存在,应如何检测此类儿童的睾丸功能等.随着医学发展,血清苗勒抑制物(Müllerianinhibitingsubstance,MIS)浓度测定将成为一项新型的诊断方法,用以解决上述问题,减少不必要的手术探查.

简介：目的了解肺炎衣原体(TWAR)与心脏病的相关性，多方面探讨冠心病的发病因素。方法采用聚合酶链反应(PCR)法，对冠心病100例，高血压病40例，心肌疾病40例，心律失常40例，正常对照60例，血清TWARDNA进行检测。结果不同组别间TWAR阳性率的差别有高度显著性(χ2＝30.52，P＜0.05)，其中冠心病占31.0%，心肌疾病占32.5%，高血压7.5%，心律失常12.5%，正常对照1.67%，提示冠心病和心肌疾病TWAR阳性率较高。结论冠心病、心肌疾病TWAR阳性检出率比高血压，无临床心脏病证据的心律失常和正常对照组高，提示TWAR是引起冠心病和心肌疾病的原因之一。

简介：目的：利用TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ—RT—PCR)检测强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞白细胞介素-2受体α(IL-2Rα)mRNA的表达水平，并进行疾病的活动性相关分析。方法：用PrimerExpressv2．0软件，根据GenBank提供的序列，在人IL-2RαmRNA的第2和第3外显子之间设计一对引物和一条TaqMan探针。提取总RNA，加入已优化的一步法FQ—RT—PCR反应体系，扩增产物经凝胶电泳后切胶回收，并与pUCm—T载体连接。制备好的重组质粒转化感受态细胞进行克隆。经测序分析确定为特异性片段后，用T7RNA聚合酶转录为cRNA，作为FQ—RT—PCR系列浓度标准品。评价FQ—RT—PCR检测IL-2RαmRNA的特异性、线性、精密度和探针稳定性等。定量测定HLA—B27阳性活动组与阴性非活动组强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞IL-2RαmRNA基因的表达水平，结合血浆可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)浓度，探讨与炎症活动的相互关系。结果：成功构建了cRNA标准品。该方法的线性范围为7～107cells／ml，其批内CV8．4％，批间CV9．6％；扩增产物克隆的双向测序结果经BLAST比较、分析，证实为IL-2RαmRNA特异性片段。对各30例HLA—B27阳性与阴性的强直性脊柱炎的测定表明：与正常人对照组结果比较，HLA—B27阳性组与HLA—B27阴性组IL-2RαmRNA和sIL-2R都有明显增加(P<0．01)。IL-2RαmRNA对炎症活动评价的灵敏度为96．7％。结论：FQ—RT—PCR具有灵敏、特异、结果重复性好等优点；IL-2RαmRNA与sIL-2R比较更能反映强直性脊柱炎患者的免疫状态，可能为免疫药物的疗效评价和药物筛选提供基因表达水平上的信息。